糖尿病皮肤"隐性损害"的机制研究

目的明确糖尿病皮肤的伤前病理改变是创面难愈的潜在机制。方法体重200～220g的SPF级SD大鼠14只，分为糖尿病组(8只)和正常对照组(6只)，以链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠模型，成模后8周与正常对照组同时采集背部皮肤，观察皮肤的组织学特征，检测表皮细胞周期，测定皮肤组织糖含量、糖基化终末产物(AGEs)蓄积程度、羟脯氨酸含量、Ⅰ型和Ⅲ型胶原、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达量及其被糖基化程度、髓过氧化物酶(MPO)含量以及基质金属蛋白酶-2(MM-2)活性和基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)水平：结果糖尿病皮肤表皮细胞层次欠清晰，部分表皮细胞缺乏复层排列，棘细胞数量明显减少，表皮层厚度明显变薄；糖尿病大鼠皮肤真皮层明显变薄，胶原纤细、排列紊乱，Ⅲ型胶原分泌增加，Ⅰ、Ⅲ胶原交织排列，部分胶原可见变性、肿胀，胶原变性区域可见慢性炎性细胞局灶性浸润；糖尿病大鼠皮肤组织糖含量明显高于正常对照组，AGEs明显蓄积；糖尿病大鼠皮肤S期以及G2／M期的表皮细胞百分比明显低于正常对照组；糖尿病皮肤局部bFGF释放和表达虽不少于正常皮肤，但存在明显的bFGF糖基化；此外，糖尿病大鼠皮肤组织MPO含量明显增多、MMP-2活性明显增加，活化的MMP-2／TIMP-2比值升高。结论糖尿病大鼠皮肤组织在未损伤、组织结构完整性未遭到破坏的情况下已经存在着组织学和细胞生物学行为的改变，这种有别于皮肤组织完整性破坏的隐匿性损害可能是糖尿病皮肤易损或创面形成后难以愈合的重要原因之一。     

真皮模板对大鼠创面组织生物力学顺应性的影响

目的　探讨真皮模板对创伤修复过程中创面皮肤组织生物力学顺应性的影响。方法将144只SD大鼠造成全层皮肤组织缺损,根据是否行自体皮移植及移植皮厚度随机分为开放创面组(创面不植皮,包扎后自然愈合)、全厚皮组(创面移植自体全厚皮)、刃厚皮组(创面移植自体刃厚皮)、复合移植组(创面移植脱细胞真皮基质 自体刃厚皮),每组每时相点6只大鼠。分别于术后1、2、4、6、12、20周取创面组织标本,用Instron生物力学测定仪测定各组创面组织的生物力学顺应性;用亲和素生物素复合物(ABC)法检测各组真皮成纤维细胞中α平滑肌肌动蛋白(αSMA)的表达量。结果　术后4—20周复合移植组创面组织的力学顺应性优于开放创面组和刃厚皮组(P<0 .05), 较全厚皮组差(P<0 .05).术后4周复合移植组αSMA的阳性表达率为(7. 53±0. 98)%,低于开放创面组(26. 99±2. 90)%和刃厚皮组[ (12. 18±2. 79)%,P<0 .01], 高于全厚皮组。　结论　真皮模板可改善组织的力学顺应性, 这可能是其影响创面愈合过程中瘢痕形成、改善愈合质量的机制之一。     

晚期糖基化终末产物对人血管内皮细胞增殖及凋亡的影响

目的研究晚期糖基化终末产物(AGEs)对人血管内皮细胞增殖及凋亡的影响,探讨糖尿病难愈创面新生血管化障碍或延迟的机理.方法不同作用时间及浓度AGE修饰的人血清白蛋白(AGE-HSA)与人血管内皮细胞(ECV304)在体外共同培养,用四唑盐(MTT)比色试验和细胞计数检测AGE-HSA对血管内皮细胞的增殖抑制作用,并用台盼蓝排斥试验检测细胞活力.采用FITC Annexin-V及碘化丙碇(PI)染色,用流式细胞仪检测凋亡细胞百分率,同时应用荧光共聚焦显微镜观察凋亡或死亡细胞FITC Annexin-V和PI的荧光染色,并用透射电镜和光镜观察凋亡细胞特异性的形态学改变.结果内皮细胞在12.5、25和50μg/ml AGE-HSA培养条件下,第2天细胞增殖数量与对照组比较无明显差异性,第4天和第6天则显著低于对照组(P＜0.01);而内皮细胞经100或200μg/ml AGE-HSA干预6h,MTT法测其OD值与对照组比较有明显差异(P＜0.01),同时内皮细胞出现特异性的凋亡形态学变化以及FITC Annexin-V阳性和/或PI阳性的细胞逐渐增多,且凋亡或死亡细胞数量随AGE-HSA作用时间及浓度的增加而增多.结论AGE-HSA能抑制内皮细胞增殖,并可以诱导其凋亡,而且与作用时间及浓度相关.提示AGEs可能是引起糖尿病难愈创面中新生血管化障碍或者延迟的机制之一.     

褪黑素与免疫相关性疾病

褪黑素在神经-内分泌-免疫调节网络中起着极其重要的作用。通过直接作用于靶器官上的褪黑素受体或间接作用于吗啡受体而发挥其免疫调节作用。在生理状态下维系并激活免疫细胞功能和细胞因子的产生使免疫应答最优化,并通过缓慢的昼夜节律重置而维持免疫自稳状态。在一些免疫相关性疾病(如肿瘤、胰岛素依赖性糖尿病、获得住免疫缺陷综合征、类风湿性关节炎、阿尔茨海默病、以及丛集性头痛症等)的发生、发展和治疗的各方面均与褪黑素有着密切的关系,本文就此作了较详尽的阐述,旨在对褪黑素的免疫调节机制作进一步的探讨,以期合理开发应用褪黑素,为免疫相关性疾病的治疗开拓新的领域。     

口服精氨酸对糖尿病大鼠皮肤组织糖利用的影响

目的:探讨精氨酸对糖尿病大鼠皮肤组织糖利用的影响及其可能的机制。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病对照组、糖尿病精氨酸治疗组和糖尿病甘氨酸对照组。糖尿病模型通过腹腔注射链脲佐菌素建立。模型成功后糖尿病精氨酸治疗组和糖尿病甘氨酸对照组分别予精氨酸和甘氨酸200mg/(kg·d)喂养,测其不同时期的血糖和体质量。8周后取胰腺组织观察组织形态学改变,并对血浆胰岛素含量、皮肤组织糖含量进行检测。结果:与甘氨酸对照组相比,精氨酸治疗后血糖恢复正常者显著增加;与糖尿病组相比,胰腺组织修复不明显的情况下,应用精氨酸后,血浆胰岛素增加,皮肤组织糖含量降低,体质量增加。结论:口服精氨酸可通过改善胰腺功能,促进胰岛素分泌,增加糖尿病皮肤组织等糖利用,降低血糖。