既往疾病史和胆道癌关系的全人群病例对照研究

目的　研究分析既往疾病史和胆道癌 (包括胆囊癌、肝外胆管癌和壶腹部癌 )的关系。方法　自 1997年 6月～ 2 0 0 1年 5月 ,在上海市区开展了一项大规模的基于全人群的胆道癌的病例对照研究 ,共收集、调查了 6 6 4例胆道癌新病例和 894例人群对照。结果　研究发现既往有胆囊炎疾病史者患胆囊癌、肝外胆管癌的危险性升高 ,调整的比数比分别为 2 .2 (95 %CI =1.3～ 3.6 )和 1.9(95 %CI=1.0～ 3.3)。糖尿病患者患胆囊癌的危险性增加 ,调整的比数比为 1.5 (95 %CI=0 .9～ 2 .5 ) ,在非胆结石者中调整的比数比为 2 .0 (95 %CI=0 .9～ 4 .5 ) ;此外 ,研究还发现肝硬化者患肝外胆管癌的危险性明显增加 ,调整的比数比为 3.0 (95 %CI=1.0～ 9.1) ,在非胆结石者中调整的比数比为 4 .9(95 %CI=1.2～ 19.8)。结论　该项研究为论证胆囊炎症增加患胆道癌的危险性提供了依据 ,研究还提示糖尿病和肝硬化分别提高患胆囊癌和肝外胆管癌的危险性。     

腺病毒介导的KDR启动子-胸苷激酶系统对血管内皮细胞的选择性杀伤作用

目的研究腺病毒介导的KDR启动子-胸苷激酶系统对血管内皮细胞的选择性杀伤作用.方法应用PCR克隆出人KDR基因启动子序列-225 bp～+127 bp,以AdEasy system为载体,构建携带受KDR启动子或CMV启动子调控tk基因表达的2种重组腺病毒质粒pAdKDR-tk和pAdCMV-tk,在293细胞中包装、扩增后,体外感染表达KDR的脐静脉血管内皮细胞系HUVEC和不表达KDR的肝癌细胞系HepG2,并给予不同浓度的丙氧鸟苷(GCV)处理,5 d后收集存活细胞并计数.结果产生的病毒滴度均为5×109pfu/ml.在MOI为100、GCV为50μg/ml条件下,AdKDR-tk转染HUVEC后细胞生存率下降(31.49%±6.42%),AdKDR-tk转染HepG2后细胞生存率为76.57%±3.49%,而转染AdCMV-tk的2细胞系生存率均显著下降,细胞生存率分别为22.24%±3.77%(HUVEC)和26.53%±6.84%(HepG2).结论KDR基因启动子可调控HSV-tk在血管内皮细胞中特异性表达,为进一步开展靶向肿瘤血管内皮的自杀基因治疗研究奠定了基础.     

肝胆外科进修医师带教体会

肝胆外科进修医师的教学属于继续教育的范畴。在教学工作中,采用"以人为本"的进修教学计划,进行医院优良传统教育,构建自主和谐的进修学习氛围,采用PBL教学方法,运用丰富生动的多媒体课件,适度增加手术和操作实践,达到了满意的教学效果。     

手术对Ⅳ期胆囊癌预后的影响

目的分析不同手术方式对Ⅳ期胆囊癌预后的影响.方法对1997年6月～2001年5月间上海市172例Ⅳ期胆囊癌病例进行临床病理分析,并对获得随访的164例的预后与手术方式的关系进行探讨.数据分析采用Kaplan-Meier法.结果 172例中未手术者44例(25.6%),手术者128例(74.4%),其中包括单纯胆囊切除术45例(35.1%)、胆囊癌根治性切除术17例(13.3%)、胆囊癌扩大根治性切除术5例(3.9%)和剖腹探查术61例(47.7%).在行根治性切除者中,Ⅳa和Ⅳb期的1年生存率分别为69.2%和40.7%,明显好于胆囊未切除或单纯切除者,在Ⅳa和Ⅳb期中各有2例存活期超过5年.结论有选择地进行Ⅳ期胆囊癌病例根治性或扩大根治性手术,有助于改善预后.     

表达FasL的肝癌细胞通过Fas/FasL诱导T淋巴细胞发生凋亡

目的研究发现肿瘤组织中FasL阳性表达区肿瘤浸润淋巴细胞的凋亡率比FasL阴性区高,推测肿瘤细胞可通过增加FasL表达来促使肿瘤浸润淋巴细胞凋亡.本实验在体外验证肝癌细胞是否可以诱导T淋巴细胞发生凋亡.方法选择FasL表达阳性的肝癌细胞(效应细胞)与对Fas介导凋亡敏感的活化T淋巴细胞共培养,取3种效靶比20:1,10:1,5:1.生长曲线法,流式细胞术,荧光显微镜观察分别检测T淋巴细胞的凋亡情况.结果流式细胞仪检测结果显示,肝癌细胞接种浓度为0(对照),0.5×105/ml,1×105/ml,2×105/ml时,T淋巴细胞凋亡率为1.80±0.21%,5.49±0.17%,11.18±0.14%,18.22±0.11%.荧光显微镜观察结果表明,肝癌细胞接种浓度为0(对照),0.5×105/m1,1×105/ml,2×105/ml时,T淋巴细胞凋亡率为1.58±0.12%,5.22±0.13%,9.74±0.21%,19.33±0.18%.3种效靶比条件下,肝癌均能诱导T淋巴细胞发生凋亡.随着肝癌接种浓度的升高及培养时间的延长,T淋巴细胞凋亡率逐渐增加,每个实验组与对照组比较P值均＜0.01.结论肝癌细胞可以通过Fas系统诱导淋巴细胞发生凋亡,这为肝癌的免疫逃逸和反攻击提供了证据.     

慢病毒介导基于microRNA系统的HBs RNAi技术抑制HBV复制

目的:构建HBs基因RNAi慢病毒载体,观察其对HBV复制和抗原表达的作用。方法:针对已经筛选确定的HBs基因RNAi有效靶序列,合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与经MluⅠ和ClaⅠ酶切后的pGCLM-GFP载体连接产生慢病毒载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定。用pGCLM-GFP、pHelper1.0和pHelper2.0质粒共转染包装细胞293T,包装产生慢病毒,以293T细胞GFP蛋白的表达水平测定病毒滴度。培养HepG2.2.15细胞系,用慢病毒（MOI=1和MOI=10）对肝癌细胞进行感染,感染后细胞培养上清进行ELISA、Western印迹、HBV DNA定量分析。结果:PCR和测序结果证实,成功构建HBs shRNA的慢病毒载体。包装慢病毒后浓缩病毒悬液的滴度为5×108~2×109 TU /ml。慢病毒HBs RNAi后,对HBV复制和抗原表达的抑制作用显著。感染4 d后,抑制效应开始出现,一直持续到第9天,抑制效应达到高峰(P<0.05)。相对于阴性对照,HBs shRNA作用后细胞上清中HBsAg分泌量下降70％以上(P<0.05),而Western印迹和real-time PCR结果进一步证实了上述结果,在蛋白水平和mRNA水平都得到了进一步验证。经HBV DNA定量,发现慢病毒RNAi后DNA水平也显著下降(P<0.05)。结论:成功构建HBs基因RNAi慢病毒载体,以HBs基因为靶点的慢病毒介导的基于microRNA系统的RNAi技术能有效抑制HBV的复制和抗原表达。     

TACE联合PEI治疗原发性肝癌血液循环性肝癌细胞的变化及意义

目的：探讨联合经肝动脉化疗栓塞术(TACE)及B超引导下肿瘤局部无水酒精注射术(PEI),治疗原发性肝癌周围静脉血液循环性肝癌细胞的变化及其意义.方法:应用巢式RT-PCR检测12例原发性肝癌患者血液循环性肝癌细胞,并经TACE及PEI联合治疗,观察其血液循环性肝癌细胞的变化.结果:血液循环性肝癌细胞表达阳性的5例原发性肝癌患者(41.67%),经TACE及PEI联合治疗后,其血液循环性肝癌细胞均转为阴性(100%,P<0.01).结论:联合TACE及PEI治疗原发性肝癌可有效地杀灭血液中播散的循环性肝癌细胞,可预防肝癌的复发和转移.     

巢式RT-PCR定量检测肝癌、癌旁组织及正常肝组织内AFPmRNA

目的:探讨肝癌、癌旁组织及正常肝组织内AFPmRNA的表达含量 。方法:应用巢式RT-PCR定量检测肝癌、癌旁组织及正常肝组织内AFPmRNA 。结果:17例AFP（+）癌旁组织内AFPmRNA表达强阳性（+++）,其癌旁组织内AFPmRNA表达呈中度阳性（++）。15例AFP（-）肝癌、癌旁组织及正常肝组织内AFPmRNA表达弱阳性（+） 。结论:AFP（+）肝癌组织过量表达AFPmRNA基因,正常肝组织仅微弱表达AFPmRNA。     

段或亚段肝切除术治疗原发性肝内胆管结石伴狭窄60例

原发性肝内胆管结石常伴肝内胆管狭窄 ,尤其是Ⅲ级以上的肝内胆管 ,这是肝内胆管结石残留或复发的主要原因之一。对肝内胆管结石的外科治疗报道甚多 ,但对肝内胆管狭窄的处理未能引起应有的重视。我们从１９９４年４月至１９９９年１２月对６０例原发性肝内胆管结石伴狭窄者行段或亚段肝切除术 ,取得较满意效果 ,现报道如下。１．一般资料本组６０例 ,男２９例 ,女３１例 ;年龄１６～８５岁 ,平均５０．２岁。反复右上腹疼痛５１例 ,发热３０例 ,黄疸１０例。肝功能异常４０例 ,糖类抗原１９-９明显异常者４例。有胆道手术史１５例。２．诊…     

Mirizzi综合征15例的术前诊断分析

目的 探讨Mirizzi综合征术前诊断的方法。方法 回顾性分析研究15例Mirizzi综合征患者的临床症状及术前B超、内镜逆行胰胆管造影（ERCP）、磁共振胰胆管显影（MRCP）等影像学资料。结果 术前93％（14／15）的病例不能除外此征,67％（10／15）于诊断时考虑此征,47％（7／15）高度怀疑此征。结论 B超是术前诊断的首选检查方法,ERCP广泛而熟练的应用是提高术前诊断率的必要条件,MRCP能够应用并提高其术前诊断率。在考虑Mirizzi综合征诊断的前提下,术前黄疸持续时间超过7周者可能存在瘘,超过8周者存在瘘的可能性极大。