细胞密度对组织工程化三维支气管模型体外再造影响的研究

研究种子细胞接种密度对体外构建组织工程化三维支气管模型的影响,并筛选出适宜体外构建支气管模型的细胞密度.以人支气管上皮细胞系和人胎肺成纤维细胞系为种子细胞,胶原凝胶复合Matrigel为支架材料,将两种细胞按照6×104/ml、6×105/ml、6×106/ml和6×107/ml四个接种密度共培养,应用静态拉伸系统体外构建组织工程化三维支气管模型.通过宏观观察、相差显微镜观察和组织学检测的方法对模型中种子细胞的生长情况进行鉴定.结果表明:6×104/ml细胞密度未见到组织片层形成,其余三个细胞密度可以看到收缩良好的组织片层,并具有一定韧性;相差显微镜下观察6×105/ml和6×106/ml细胞密度的组织片层可以形成网状结构,6×107/ml细胞密度的组织片层结构疏松;HE染色证实6×105/ml和6×106/ml细胞密度的组织片层中有三维网状结构形成,免疫组织化学染色广谱CK和Vimentin均呈阳性,前者的细胞活性较后者更好,而6×107/ml细胞密度组织片层基本丧失细胞活性.体外构建组织工程化三维支气管模型其种子细胞密度在6×105/ml至6×106/ml之间较为适宜.     

椎间注射转化生长因子β1对兔退变腰椎间盘蛋白多糖表达的影响

背景:体外研究证实转化生长因子β1可以促进蛋白多糖合成,延缓椎间盘退变,但体内实验鲜见报道。目的:观察局部应用转化生长因子β1对兔退变腰椎间盘髓核蛋白多糖表达的影响。方法:取30只新西兰大白兔建立兔腰椎间盘退变模型,造模12周,经X射线证实退变后,随机选择6只模型兔及6只未造模正常兔,处死取材。分别向剩余24只模型兔L4~5椎间隙注射转化生子因子β1和生理盐水。末次给药2,4周取材,间苯三酚法测定兔椎间盘髓核内蛋白多糖的水平。结果与结论:造模12周,兔退变椎间盘髓核中蛋白多糖水平明显降低(P<0.01)。经局部注射转化生子因子β1后,兔退变椎间盘髓核中蛋白多糖表达明显增多(P<0.01)。说明在兔椎间注射转化生子因子β1可以促进髓核蛋白多糖的合成,延缓椎间盘退变。     

质子泵抑制剂埃索美拉唑对氯吡格雷抗血小板作用的影响

目的观察质子泵抑制剂埃索美拉唑是否影响氯吡格雷的抗血小板聚集作用。方法选择不稳定性心绞痛患者118例,于入院即刻行血小板聚集率测定;患者接受100 mg/d阿司匹林和75 mg/d氯吡格雷治疗7 d后,再次测定血小板聚集率,根据结果将患者分为有效反应组87例和低反应组31例;有效反应组再随机分为2个亚组,给予埃索美拉唑20 mg/d(治疗组,44例)和安慰剂20 mg/d(安慰剂组,43例)。30 d后,再次测定全部患者的血小板聚集率,比较用药前后各组血小板聚集率的变化。结果与有效反应组比较,低反应组体重指数、糖尿病及吸烟比例明显升高(P<0.05)。治疗组和安慰剂组治疗前后的血小板聚集率无明显差异;低反应组服药前后的血小板聚集率也无明显差异(P>0.05)。结论未发现埃索美拉唑对氯吡格雷的抗血小板聚集作用产生明显影响。     

经膝后下方小切口治疗后交叉韧带胫骨止点撕脱骨折

后交叉韧带(posterior cruciate ligament,PCL)胫骨止点撕脱骨折导致膝关节后直向不稳定,若得不到及时正确的治疗,将严重损害膝关节功能,远期出现骨关节炎.自2002年3月至2006年3月,我们采用膝后下小切口微创治疗PCL胫骨止点撕脱骨折47例,疗效满意.     

Modify Kugel术与Rutkow术治疗成人原发腹股沟疝的对比研究

目的 与Rutkow术治疗成人原发腹股沟疝比较,探讨Modify Kugel术的优点.方法 回顾性分析笔者所在医院2006年3月~2009年3月开展的30例(35侧)Rutkow 疝环填充式无张力疝修补术及Modify Kugel 无张力疝修补术35例(40 侧)的临床资料.结果 全组病例按手术情况、术后并发症等,对两种手术方式进行比较,Modify Kugel术术后止痛剂应用次数、平均恢复自主活动时间、切口疼痛及异物感例数均明显减少,差异有统计学意义(P<0.01);平均切口长度、平均手术时间、发热例数、平均住院时间均减少,差异有统计学意义(P<0.05).结论 与Rutkow术比较,Modify Kugel术更符合工程力学原理,适应证更广,免缝合,减少了手术时间及并发症,术后疼痛轻、恢复快;具有微创手术的特点,与腹腔镜手术具有相似的效果.Modify Kugel术是一种具有良好发展潜力的无张力疝修补术.     

烧伤休克期血定安治疗对血液流变学影响的实验研究

严重烧伤对血液流变学有较大影响,可出现典型的高粘滞血症,如在烧伤休克的整个过程均伴有血液粘度、红细胞压积、红细胞聚集性等一系列改变。血定安(ｇｅｌｏｆｕｓｉｎｅ)是新一代明胶类血浆代用品,其突出特点为大剂量应用后不影响出凝血机制,不干扰交叉配血,不易引起过...     

幽门螺杆菌CagA对AGS细胞RNA转录相关磷酸化蛋白的影响

目的研究幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，H.pylori）细胞毒素相关蛋白A（CagA）作用后人胃腺癌上皮细胞（AGS）RNA转录相关蛋白磷酸化的变化情况，进一步揭示CagA的致病机制，为寻找生物标记蛋白奠定基础。方法采用金属离子亲和吸附富集技术富集H.pylori、H.pylori CagA缺失株（H.pylori△CagA）与AGS细胞相互作用4h、以及培养相同时间的AGS细胞的磷酸化蛋白，利用二维凝胶电泳技术分离磷酸化蛋门，ImageMaster 2D分析软件比较分析识别差异蛋白，4700型MALDI源蛋白分析器确认蛋白。结果CagA致使AGS细胞的7个RNA相关的磷酸化蛋白出现差异表达，其中1个磷酸化蛋白表达量上调、4个磷酸化蛋白表达量下调、2个新出现磷酸化的蛋白。hnRNP D0 127位的苏氨酸及137位的丝氨酸发生了磷酸化。结论CagA作用后，致使hnRNP D0蛋白磷酸化。AGS细胞与RNA转录相天蛋白磷酸化的变化，呈现出诱导细胞凋亡、增殖及有利于细胞免疫逃逸的趋势。     

90例小儿HCV感染患者血清型与基因型分布特点初探

[目的]了解小儿HCV感染患者血清型与基因型特点，为临床诊治提供有用实验室数据。[方法]对90例抗-HCV总抗体和HCV-RNA检测为阳性、临床明确诊断为HCV感染患者进行血清样本的基因型和血清型检测。患者年龄在1．5-13岁之问，血清型检测使用美国雅培Murex HCV Serotyping 1-6 Assay ELISA试剂盒，基因分型用自建引物特异性HCV基因分型法，分型标准采用Simmons法。[结果]90例HCV患者血清分出基因型的90例，检出率100％，其中1a型1例（0．9％），1b型59例（65．5％），1b／2a型29例（32．2％），2a型1例（0．9％）。分出血清型的49例，检出率为54．4％，1型40例（44．4％），2型8例（9％），1＋4混合型1例（0．9％）。未分出血清型的15例（16．6％），无反应的29例（32．2％）。基因型与血清型结果进行比较，同时可分出基因型与血清型的有49例，总检出率54．4％。[结论]HCV患儿血清基因型主要以1b型为主，血清型主要以1型为主。未分出血清型的样本建议进行HCV基因序列分析。     

慢性丙肝患者唾液HCV RNA定量检测及意义研究

[目的]探讨慢性丙型肝炎（HCV）感染者唾液HCV RNA定量检测的流行病学意义及诊断价值，比较唾液中HCV RNA阳性与否和肝脏功能损伤的关系。[方法]用荧光定量PCR法对8例慢性HCV感染者唾液和血液标本中的HCV RNA进行定量检测，采用全自动生化分析仪和血凝仪进行ALT、CHE和PTA的检测。[结果]8例慢性HCV感染者唾液和血液HCV RNA阳性率分别为30％和70％，唾液中HCV RNA阳性与肝脏功能损伤的程度关系密切。[结论]在国内首次在慢性HCV感染者唾液中进行HCV RNA定量检测，实验结果表明慢性HCV感染者唾液中含有HCV，可能有一定传染性。