特异性CTL胞毒作用与HLA型别关系探讨

目的：探讨特异性CTL胞毒作用与靶细胞的HLA型别关系。方法：本实验以特定HLA型别，EB病毒转化的B淋巴母细胞（EBV－LCL）与同种异体单个核细胞（PBMC）混合培养，激活同种抗原特异性细胞性T细胞（CTL），观察其对携带不同HLA型别的EBV－LCL靶细胞的杀伤活性。结果：用EBV－LCL1致敏的效应细胞1对EBV－LCL2的杀伤效应比对EBV－LCL3强，用EBV－LCL2致敏的效应细胞2对EBV－LCL1的杀伤效应比对EBV－LCL3强，用EBV－LCL3致敏的效应细胞3对EBV－LCL1，2几乎无杀伤效应。结论：特异性CTL对不同HLA型别的靶细胞的胞毒作用存在差异，这不仅仅与HLA型别关联，而可能取决于抗原肽与MHC所组成的抗原综合信息。     

急性重症胰腺炎42例治疗体会

急性重症胰腺炎(SevereAcute Pancreatitics.SAP)是外科常见病、多发病,进展凶猛、病情复杂,并发症多、愈后差。目前国内外对SAP诊断的认识已基本一致。非手术治疗已逐渐为大家所接受,而手术治疗中手术指证、时机及方式的选择上仍有诸多争议。现将我院1999年至2005年12月份收治的重症胰腺炎42例的治疗经验总结报告如下。1资料和方法1.1一般资料男20例,女22例,年龄22岁~82岁,平均急性重症胰腺炎42例治疗体会@杨东亮$莱芜市中医院!山东莱芜271100急性重症胰腺炎;;治疗方法;;效果[1]中华医学会外科学会胰腺学组.急性胰腺炎的诊断及分级标准[J].中华外科杂志,1997,35(12):773.     

表达人去唾液酸糖蛋白受体分子细胞系的建立

目的 构建稳定表达人肝细胞表面分子去唾液酸糖蛋白受体(asialoglycoprotein receptor,ASGPR)的细胞系.方法 逆转录PCR扩增人肝组织ASGPR大亚基H1全编码序列,插入到真核表达载体pIRES2EGFP中,重组质粒pIRES2EGFP/ASGPRH1转染HeLa细胞,G418筛选,RT-PCR,Western印迹及免疫荧光检测ASGPRH1的表达.结果 成功构建了pIRES2EGFP/ASGPRH1重组质粒,该质粒转染HeLa细胞后,Western印迹及免疫荧光均检测到ASGPRH1蛋白的表达.结论 成功建立了稳定表达人ASGPRH1的细胞系,为进一步研究ASGPR分子奠定了基础.     

Clinical significance of a myeloperoxidase gene polymorphism and inducible nitric oxide synthase expression in cirrhotic patients with hepatopulmonary syndrome

The clinical significance of a myeloperoxidase (MPO) gene polymorphism and inducible nitric oxide synthase (iNOS) expression in cirrhotic patients with hepatopulmonary syndrome (HPS) was explored. Enrolled subjects were divided into three groups according to their disease/health conditions: the HPS group (cirrhotic patients with HPS; n=63), the non-HPS group (cirrhotic patients without HPS; n=182), and the control group (healthy subjects without liver disease; n=35). The distribution of the MPO-463 G/A geno...     

儿童前臂双骨折的中西医结合治疗

目的：在儿童前臂双骨折治疗中,采用更适宜的治疗方案来提高治疗效果,以减少并发症。方法：选择76例5～12岁的闭合移位前臂双骨折患儿,其中,60例不同类型的骨折行手法复位小夹板或石膏托外固定．不成功者给予手术治疗;16例早期直接行手术切开复位钢板螺丝钉或克氏针内固定,以后二次手术取出内固定物。结果：60例手法复位患儿中,54例手法复位成功,成功率为90％,骨折愈合时间为33～50d;6例手法复位不成功,行手术切开复位钢板螺丝钉内固定,愈合时间为80～102d。16例直接手术治疗的患儿中,14例愈合时间为80～160d,平均7～12个月取出内固定物;1例伤后就诊时间长,造成前臂肌间隔综合征,行手术切开减压加克氏针内固定,二期植皮,术后半年骨折愈合;1例尺骨骨不连,需再次手术重新内固定加植骨术,术后1年愈合。结论：儿童前臂双骨折早期行手法复位非常重要,而旋转移位是前臂双骨折复位的难点,手术治疗不能作为首选,应充分运用中西医结合治疗骨折的理念,提高治疗效果。     

肝细胞表达的免疫相关分子与肝脏疾病

以往对于肝脏免疫的研究主要集中于非实质细胞如T细胞、DC、KC和窦状内皮细胞等,而对肝细胞本身的研究相对较少。目前的研究发现肝细胞在被刺激或者微生物侵袭后会表达一系列免疫活性物质参与机体的免疫应答,现就肝细胞表达的免疫相关分子与肝脏疾病之间的一些相关研究进展做一综述。     

载脂蛋白质B mRNA编辑酶催化多肽3G抑制乙型肝炎病毒和鸭乙型肝炎病毒复制

目的了解载脂蛋白质BmRNA编辑酶催化多肽3G（APOBEC3G）对乙型肝炎病毒（HBV）和鸭乙型肝炎炎病毒（DHBV）复制的抑制作用。方法从健康人外周血单个核细胞提取RNA，逆转录聚合酶链反应扩增APOBEC3G，将产物克隆到pXF3H载体的EcoRⅠ和Hind Ⅲ酶切位点以构建真核表达质粒；以ayw亚型HBV全长质粒构建具有复制能力的1．3倍HBV质粒（pHBV1．3）。不同剂量的APOBEC3G真核表达质粒与pHBV1．3共转染HepG2细胞；酶联免疫吸附法检测细胞培养上清液的乙型肝炎表面抗原和e抗原水平，Southernblot和Northernblot分析HBV核衣壳相关DNA和RNA的水平变化。不同剂量APOBEC3G真核表达质粒与头尾相接的2倍DHBV质粒共转染LMH鸡肝癌细胞，Southernblot分析DHBV核衣壳相关DNA水平变化。结果成功构建APOBEC3G真核表达质粒和具有复制能力的1．3倍HBV质粒。APOBEC3G抑制乙型肝炎表面抗原和e抗原的分泌，转染细胞内HBV核衣壳相关RNA表达水平下降，而对核心蛋白质的表达没有影响；APOBEC3G对转染细胞内HBV和DHBV核衣壳相关DNA水平具有剂量依赖的抑制效应。结论APOBEC3G对HBV和DHBV复制具有抑制作用。     

人宫颈癌基因小干扰RNA抑制HepG2细胞生长的作用及其机制

目的 利用RNA干扰技术探讨人宫颈癌基因(HCCR)对肝癌细胞增殖、凋亡的影响及其可能的分子机制. 方法 构建表达HCCR小干扰RNA的真核表达质粒pRIV2-siHCCR,将其转染肝癌细胞株HepG2细胞,定量PCR、Westem blot检测HCCR及其相关基因的表达,四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖状态,流式细胞术观察细胞凋亡与细胞周期变化. 结果 成功构建真核表达质粒pRIV2-siHCCR,其表达的HCCR siRNA可有效抑制HepG2细胞内HCCR的表达,细胞增殖受到抑制,细胞凋亡增加.Western blot结果显示HCCR小干扰RNA作用HepG2细胞后,细胞内P53蛋白的表达降低,P15蛋白的表达明显升高,而PTEN、P16、P27蛋白水平没有明显改变. 结论 HepG2细胞中HCCR蛋白下调后,细胞增殖受到抑制,凋亡细胞增多,其作用机制可能与蛋白质P53、P15有关.     

慢性病毒性肝炎肝细胞凋亡与Fas抗原和病毒表达的相互关系

为探讨病毒性肝炎肝细胞凋亡及其与病毒和Ｆａｓ抗原表达的关系，应用原位末端标记技术检测一组慢性乙、丙型肝炎患者肝组织中细胞凋亡状况，并以免疫组化方法检测病毒和Ｆａｓ抗原表达。结果３１例患者中，２５例肝组织中检出末端标记阳性细胞，散布于肝小叶和肝窦内，部分炎症坏死灶中和胆管上皮细胞也可检出阳性细胞；组织炎症活动度较大者和病毒抗原阳性者凋亡指数较高；凋亡细胞可为病毒抗原阳性和阴性；Ｆａｓ抗原阳性与阴性组间凋亡程度无显著差异。提示病毒性肝炎患者感染和未感染病毒的肝细胞均可发生凋亡，其机制有待进一步研究。     

复发性生殖器疱疹患者外周血IL-12与Th1/Th2细胞因子的检测

目的检测复发性生殖器疱疹(RGH)患者不同病期外周血CD4+T细胞内IL-12,IFN-,γIL-4的水平,探讨IL-12,Th1与Th2亚群在疾病中的可能作用。方法应用流式细胞仪对20例发作期、15例恢复期RGH患者和15名健康人外周血CD4+T细胞IL-12,IFN-γ和IL-4进行检测。结果发作期患者外周血IFN-γ+-CD4+T细胞百分率显著低于正常对照组(P<0.05),IL-4+-CD4+T细胞百分率明显高于正常对照组(P<0.01),Th1/Th2比值显著低于正常对照组(P<0.01),同时IL-12+-CD4+T细胞百分率显著降低(P<0.01)。恢复期患者外周血IL-12+-CD4+T细胞百分率仍显著低于正常(P<0.05)。结论RGH患者存在Th1/Th2比例失衡和IL-12水平低下,而后者可能是导致Th1/Th2比例失衡和病情反复发作的重要原因。