肠道菌群影响慢性乙型肝炎、慢性丙型肝炎及相关肝病的研究进展

HBV、HCV感染常可进展为肝硬化、肝衰竭和肝细胞癌等终末期肝病，危及患者生命。近年来研究发现肠道菌群与慢性病毒性肝病关系密切。本文就肠道菌群与慢性乙型肝炎、慢性丙型肝炎及其相关肝病之间的相关性，以及靶向肠道菌群治疗慢性乙型肝炎及其相关肝病的研究进展进行了综述，以期为临床治疗慢性乙型肝炎、慢性丙型肝炎及其相关肝病提供更多思考。     

探讨人性化护理在急诊患者护理工作中的应用效果

目的：探讨人性化护理在急诊患者护理工作中的应用效果。方法选取我院2011年5~2013年5月于门诊接受护理的急诊患者200例,将患者随机分为观察组和对照组各100例,对对照组进行常规护理,对观察组给予人性化服务护理措施的方法,在护理结束后发放问卷进行调查,比较两组患者的护理质量以及满意程度。结果观察组的生活质量各项指标都高于对照组,差异具有统计学意义(<0.05)。观察组在护理的满意情况方面也好于对照组,差异具有统计学意义(<0.05)。结论人性化护理在急诊患者护理工作中的应用效果有更好的效果,并且能够提高患者的满意度,值得推广。     

载脂蛋白质B mRNA编辑酶催化多肽3G抑制乙型肝炎病毒和鸭乙型肝炎病毒复制

目的了解载脂蛋白质BmRNA编辑酶催化多肽3G（APOBEC3G）对乙型肝炎病毒（HBV）和鸭乙型肝炎炎病毒（DHBV）复制的抑制作用。方法从健康人外周血单个核细胞提取RNA，逆转录聚合酶链反应扩增APOBEC3G，将产物克隆到pXF3H载体的EcoRⅠ和Hind Ⅲ酶切位点以构建真核表达质粒；以ayw亚型HBV全长质粒构建具有复制能力的1．3倍HBV质粒（pHBV1．3）。不同剂量的APOBEC3G真核表达质粒与pHBV1．3共转染HepG2细胞；酶联免疫吸附法检测细胞培养上清液的乙型肝炎表面抗原和e抗原水平，Southernblot和Northernblot分析HBV核衣壳相关DNA和RNA的水平变化。不同剂量APOBEC3G真核表达质粒与头尾相接的2倍DHBV质粒共转染LMH鸡肝癌细胞，Southernblot分析DHBV核衣壳相关DNA水平变化。结果成功构建APOBEC3G真核表达质粒和具有复制能力的1．3倍HBV质粒。APOBEC3G抑制乙型肝炎表面抗原和e抗原的分泌，转染细胞内HBV核衣壳相关RNA表达水平下降，而对核心蛋白质的表达没有影响；APOBEC3G对转染细胞内HBV和DHBV核衣壳相关DNA水平具有剂量依赖的抑制效应。结论APOBEC3G对HBV和DHBV复制具有抑制作用。     

湖北地区乙型肝炎病毒基因型分布与临床的相关性

目的 了解湖北地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型的分布及其与临床的相关性。 方法 选择湖北地区HBV DNA阳性的慢性HBV感染者190例,其中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)携带者52例、慢性乙型肝炎56例、重型肝炎32例、肝硬化22例、原发性肝癌28例,应用多对型特异性引物-聚合酶链反应检测HBV的基因型。 结果 多对HBV型特异性引物法可快速准确鉴定HBV的基因型。190份HBV DNA阳性血清标本中,B基因型140例(73.7％),C基因型42例(22.1％),BC混合型8例(4.2％),未发现A、D和E基因型;B基因型在重型肝炎和肝癌患者中占绝对优势,分别为87.5％和89.3％,显著高于HBsAg携带者的67.3％;B基因型患者血清丙氨酸氨基转移酶水平(253.1±306.7)U／L高于C基因型患者的(154.1±192.9)U／L,差异有统计学意义(P<0.05);除HBsAg携带者外的慢性HBV感染者中,B基因型患者血清抗-HBe阳性率50.5％(53／105)显著高于C基因型的18.5％(5／27),P<0.01。 结论 多对型特异性引物同时进行聚合酶链反应的基因分型方法可用于HBV基因型的流行病学调查;湖北地区存在HBV的B、C和BC混合基因型,B型为本地区的优势基因型并在严重肝病和肝癌中的比例较高,基因型的分布可能有较大的地区差异。     

喜马拉雅旱獭肝穿刺方法的建立

目的建立喜马拉雅旱獭活体肝穿刺方法。方法动物经盐酸氯胺酮（45mg／kg）肌肉注射麻醉后,活检穿刺枪于动物右侧上腋中线第3、4肋间,距离胸骨剑突下方1．5cm,肝实音区进针,快速采集肝组织。对20只旱獭施行了肝穿刺,间隔15d穿刺1次,共80次。结果80次组织穿刺取得组织72份,穿刺成功率90％。HE染色证实72例穿刺组织均为肝组织,其中70例穿刺组织在镜下可见至少3个门管区。因肝穿刺导致的旱獭死亡2例,死亡率10％。结论该法操作简便,定位准确,可间隔重复采集肝组织,适用于旱獭肝组织病理学研究。     

土拨鼠白细胞介素15的克隆、表达和活性分析

目的对土拨鼠白细胞介素15（woodchuck interleukin 15，wIL-15）分子进行克隆、表达并鉴定其活性，为进一步研究IL-15在嗜肝病毒感染中的作用以及评价IL-15用于治疗慢性HBV感染奠定基础。方法用IL-15的保守引物将wIL-15基因克隆、测序并进行分析，构建wIL-15的原核表达质粒，在大肠杆菌中表达，分离纯化后用淋巴细胞增殖试验检测其生物学活性。结果wIL-15的完整编码序列为489nt（与其他哺乳动物IL-15编码序列的同源性高达78％～87％），编码162AA长度的前体蛋白（与其他哺乳动物IL-15蛋白的同源性高达70％～80％），其信号肽为N端的48AA，成熟蛋白由114AA组成。土拨鼠IL-15与灵长动物IL-15的同源性高于啮齿动物。带有His-tag的成熟蛋白，可以在大肠杆菌中表达，分离纯化后，可以刺激Con A活化的小鼠脾细胞和土拨鼠PBMC增殖（其SI值可高达10以上），并存在明显的剂量依赖性。结论（1）wIL-15与其他哺乳动物IL-15高度同源，并且与灵长类动物的IL-15更接近。（2）wIL-15可以在大肠杆菌中表达，并在纯化后能刺激小鼠和土拨鼠淋巴细胞增殖，表现出较好的生物学活性。     

抑制α／β干扰素受体α亚基表达的pSUPER—H1 RNAi系统构建及功能初步鉴定

干扰素是目前公认的一种有效抗病毒药物，其作用机制是与其受体结合，使信号转导通路中的蛋白质分子磷酸化，进而激活转录并产生各种抗病毒蛋白。α／β干扰素共用Ⅰ型受体，该受体有α、β两个亚单位，分别称为IFNAR1和IFNAR2。本研究构建抑制α／β干扰素受体α亚基表达的pSUPER—H1 RNAi系统，并对其生物学功能进行初步探讨。     

输血传播病毒TTV研究的进展及评价

1．TTV的发现和生物特性1997年NishizawaT和OkamotoH等人相继报告，用代表性区别分析（Representa－nonaldifferenceanalysis）在5例因冠心病、食道癌等疾病作外科手术治疗，接受大量输血后，出现不明原因输血后肝炎的病人中，3例发现一种新型输血后感染病毒。从一名为TT的患者     

人微小病毒B19感染的血液学异常

人微小病毒B19(HPVB19)骨髓感染引起造血功能紊乱,为了解该类感染的发生率和临床表现,我们调查血红蛋白<90g/L的患者121例,其中33例HPVB19-DNA阳性,阳性率27.3%;临床可表现为白细胞减少或增加,全血细胞减少、肝炎并发再生障碍性贫血、继发性骨髓增生异常综合征等.缺铁性贫血可并发HPVB19感染.因此,对不易解释的血液学改变,检测HPVB19-DNA,有助于明确病因.     

一种新的土拨鼠α干扰素基因分型方法的建立及其意义

目的：建立新的土拨鼠α干扰素（IFN-α）基因分型方法，分析急性和慢性土拨鼠肝炎病毒（Woodchuck hepati-tis virus，WHV）感染的土拨鼠肝细胞中不同型别的IFN-α基因表达谱及其意义。方法：利用已知序列和基因型的土拨鼠IFN-α基因克隆质粒，建立基于土拨鼠IFN-α基因序列的限制性片段长度多态性的土拨鼠IFN-α基因分型方法。PolyIC体外刺激正常土拨鼠外周血单个核细胞（PBMC），调查正常土拨鼠PBMC受PolyIC刺激后IFN-α基因的表达谱。提取急性和慢性土拨鼠肝炎病毒感染的土拨鼠肝组织mRNA，RT-PCR扩增土拨鼠IFN-α基因，分子克隆后调查急性和慢性感染的土拨鼠肝细胞中IFN-α基因表达谱。结果：建立了土拨鼠IFN-α基因限制性片段长度多态性分型方法。急性和慢性感染的土拨鼠肝细胞中IFN-α基因的表达谱明显不同于正常动物的表达谱，假基因表达所占比例大。结论：新建立的土拨鼠IFN-α基因分型方法可用于分析土拨鼠不同组织中IFN-α的基因表达谱。