精氨酸对大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合影响的实验研究

精氨酸是一种条件必需氨基酸 ,在创伤时机体对精氨酸的需要量增加 ,而精氨酸合成不能相应增加 ,此时需要补充外源性精氨酸才能满足机体对精氨酸的需要。ＢａｒｂｕｌＡ等发现在人体内补充精氨酸可加速切口伤创面愈合。本实验的目的是为了探讨精氨酸是否可加速烧伤大鼠创面愈合及其量效关系 ,为临床合理应用精氨酸提供实验依据。1　材料与方法1.1　研究对象　清洁级Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙ大鼠 ,体重 2 0 0～ 2 50 ｇ ,雌雄不拘 ,上海必凯 -西普尔实验动物有限公司供应 ,数量 36只。1.2　大鼠深Ⅱ度烫伤模型制作〔1〕。1.3　实验分组　…     

重组人表皮生长因子凝胶在Ⅲ期压疮护理中的应用研究

 目的 观察重组人表皮生长因子(recombinant human epidermal growth factor,rhEGF)凝胶在Ⅲ期压疮护理中的疗效.方法 38例Ⅲ期压疮入院患者随机分为治疗组和对照组.治疗组以rhEGF凝胶均匀涂布于创面;对照组仅以3%过氧化氢液冲洗.观察两组创面愈合率、组织学改变、创面羟脯氨酸(HYP)含量及Ⅰ型/Ⅲ型胶原比例.结果 治疗组的创面愈合速度较对照组明显加快,其Ⅲ期压疮平均愈合时间为(10±2.5)d,对照组为(35±8.7)d(P＜0.01).在治疗后第3、6、9天,治疗组可见创面肉芽组织灶明显增生,富含血管及细胞,同时创面中HYP含量增加,Ⅰ型/Ⅲ型胶原比例降低(P＜0.01).结论 rhEGF治疗Ⅲ期压疮可以缩短创面愈合时间,增加肉芽组织及HYP含量,降低Ⅰ/Ⅲ型胶原比例,明显促进压疮创面的修复.     

异种无细胞真皮基质与薄自体皮复合移植后细胞外基质的变化

目的观察异种无细胞真皮基质与薄自体皮复合移植后细胞外基质的动态变化。方法以SD大鼠为动物模型,在其背部造成4 cm×5 cm的全层皮肤缺损。大鼠分为薄自体皮移植组和猪无细胞真皮基质+薄自体皮移植组,分别于移植后1,2,3,4,8,12,16周取标本,检测羟脯氨酸含量、Ⅰ/Ⅲ型前胶原mRNA的表达、透明质酸含量及纤维连接蛋白的变化。结果猪无细胞真皮基质与薄自体皮复合移植后,各时相点羟脯氨酸含量、Ⅰ型前胶原mRNA的表达均低于薄自体皮移植组(P<0.05);Ⅲ型前胶原mRNA的表达与薄自体皮移植组差异无统计学意义(P>0.05);透明质酸含量高于薄自体皮移植组(P<0.05);而纤维连接蛋白的表达在早期高于薄自体皮移植组,后期则低于薄自体皮移植组(P<0.05)。结论猪无细胞真皮基质与薄自体皮复合移植后能够减少胶原合成和Ⅰ型前胶原mRNA的表达,增加皮肤中透明质酸含量,从而减轻瘢痕增生。纤维连接蛋白早期表达增高有利于创面愈合及基底膜的重塑,而后期表达降低有助于减轻瘢痕增生。     

辛伐他汀对老年大鼠心肌胶原含量及MMP-9表达水平的影响

目的 观察老年大鼠心肌胶原含量和MMP-9 mRNA表达水平的变化及辛伐他汀干预的效果.方法 20月龄的Wistar鼠45只,随机分为老年对照组、大剂量辛伐他汀组[20 mg/(kg·d)]和小剂量辛伐他汀组[2 mg/(kg·d)],每组15只;另有15只3月龄的Wistar鼠作为青年对照组.辛伐他汀组给予相应剂量的药物灌胃4个月;对照组给予相同体积的生理盐水灌胃.灌胃4个月后,留取心脏标本,采用苦味酸 - 天狼腥红染色方法,观察各组大鼠心肌胶原含量,在偏振光显微镜下观察各组大鼠心肌Ⅰ/Ⅲ型胶原比例;同时,应用RT-PCR方法检测各组大鼠心肌MMP-9 mRNA含量的变化.结果 与青年对照组相比,老年对照组大鼠的心肌胶原含量、Ⅰ/Ⅲ型胶原比例及MMP-9 mRNA表达水平均显著增高(P＜0.01),辛伐他汀可显著抑制这一变化(P＜0.01);不同剂量辛伐他汀组之间的比较显示,大剂量组的心肌胶原含量和MMP-9 mRNA表达水平低于小剂量组(P＜0.05或P＜0.01),而Ⅰ/Ⅲ型胶原比例两组之间无显著差别(P＞0.05).结论 辛伐他汀可显著降低老年大鼠心肌胶原含量和Ⅰ/Ⅲ型胶原比例,抑制MMP-9 mRNA表达水平的增高.     

糖尿病皮肤"隐性损害"的机制研究

目的明确糖尿病皮肤的伤前病理改变是创面难愈的潜在机制。方法体重200～220g的SPF级SD大鼠14只，分为糖尿病组(8只)和正常对照组(6只)，以链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠模型，成模后8周与正常对照组同时采集背部皮肤，观察皮肤的组织学特征，检测表皮细胞周期，测定皮肤组织糖含量、糖基化终末产物(AGEs)蓄积程度、羟脯氨酸含量、Ⅰ型和Ⅲ型胶原、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达量及其被糖基化程度、髓过氧化物酶(MPO)含量以及基质金属蛋白酶-2(MM-2)活性和基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)水平：结果糖尿病皮肤表皮细胞层次欠清晰，部分表皮细胞缺乏复层排列，棘细胞数量明显减少，表皮层厚度明显变薄；糖尿病大鼠皮肤真皮层明显变薄，胶原纤细、排列紊乱，Ⅲ型胶原分泌增加，Ⅰ、Ⅲ胶原交织排列，部分胶原可见变性、肿胀，胶原变性区域可见慢性炎性细胞局灶性浸润；糖尿病大鼠皮肤组织糖含量明显高于正常对照组，AGEs明显蓄积；糖尿病大鼠皮肤S期以及G2／M期的表皮细胞百分比明显低于正常对照组；糖尿病皮肤局部bFGF释放和表达虽不少于正常皮肤，但存在明显的bFGF糖基化；此外，糖尿病大鼠皮肤组织MPO含量明显增多、MMP-2活性明显增加，活化的MMP-2／TIMP-2比值升高。结论糖尿病大鼠皮肤组织在未损伤、组织结构完整性未遭到破坏的情况下已经存在着组织学和细胞生物学行为的改变，这种有别于皮肤组织完整性破坏的隐匿性损害可能是糖尿病皮肤易损或创面形成后难以愈合的重要原因之一。     

超高频超声在烧伤创面深度诊断中的临床应用

目的 :探讨应用超高频超声检测烧伤部位真皮肿胀度和真皮—皮下界面突破情况与烧伤创面深度的关系。方法 :以病理组织学检查作为烧伤创面深度的诊断标准 ,应用 1 3MHZ超高频超声检测 41例烧伤患者 62个烧伤部位的真皮肿胀度和真皮—皮下界面是否突破。结果 :烧伤后 6小时内 ,2 7个部位浅Ⅱ°烧伤创面真皮肿胀度为32 75%± 1 3 2 3% ,2 0个部位深Ⅱ°烧伤创面真皮肿胀度为 76 0 9%± 1 5 88% ,Ⅱ°烧伤创面真皮—皮下界面完整 ,1 5个部位Ⅲ°创面真皮肿胀度为 1 50 46%± 2 4 0 6% ,且大部分Ⅲ°创面 ( 1 3/1 5)真皮—皮下界面被破坏。经统计学处理 ,三组间真皮肿胀度差异有显著性 (P <0 0 1 )。结论 :随着烧伤深度增加 ,真皮肿胀度亦增加 ,大部分Ⅲ°创面真皮—皮下界面被破坏。超高频超声作为一种无创、准确、客观的方法 ,可望在烧伤创面深度的诊断中得到广泛应用。     

染矽尘大鼠早期肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达

 目的探讨染矽尘大鼠早期肺组织中Ⅰ型、Ⅲ型胶原形成的时间规律.方法采用气管暴露法建立矽肺动物模型.取肺组织制作石蜡切片,天狼猩红法染色,偏振光显微镜观察Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达,用图像分析系统对Ⅰ、Ⅲ型胶原进行定量分析.结果染矽尘后第3天,Ⅲ型胶原开始增生,染矽尘后第7天,Ⅰ型胶原开始增生,直至染矽尘后第28天.这2种胶原进行性增加.Ⅰ、Ⅲ型胶原阳性面积百分比在染矽尘后均有不同程度的增加.染矽尘后第7天、第14天、第21天、第28天,Ⅰ型胶原阳性面积百分比分别增加27.12(P＜0.01),24.73(P＜0.01),16.01(P＜0.05),52.45(P＜0.01).染矽尘后第3天、第28天,Ⅲ型胶原阳性面积百分比分别增加2.20(P＜0.01)、24.13(P＜0.01).结论染矽尘大鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原明显增加.Ⅰ、Ⅲ型胶原增生出现的时相有所不同,染矽尘后第3天,Ⅲ型胶原开始出现,染矽尘后第7天,Ⅰ型胶原开始形成,此后,Ⅰ、Ⅲ型胶原呈进行性增多的趋势.天狼猩红-偏振光显微镜法是一种定量检测Ⅰ、Ⅲ型胶原的更加准确的方法.     

放射性肺纤维化起始部位的探讨

探讨早期放射性肺纤维化的始动部位及其变化规律。方法大鼠右胸部行单次照射，吸收剂量分别为０，１５，３０Ｇｙ，照后又分为１，３，５月组。用生化法检测肺羟脯氨酸；用偏振光法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原；用免疫组化法检测血管紧张素Ⅱ（ＡⅡ）分布。结果肺纤维化程度与照射剂量和照后时间有关；Ⅰ、Ⅲ型胶原比例随纤维化程度加大而增加；增生的胶原纤维起自细小支气管和细小动脉外膜的成纤维细胞，肺泡间隔中Ⅰ型胶原取代Ⅲ型胶原；间质成纤维细胞和巨噬细胞ＡⅡ免疫组化阳性。结论照射可刺激肺间质成纤维细胞增生，Ⅰ型胶原取代Ⅲ型胶原；间质细胞中ＡⅡ的表达与合成可能对此过程有一定的促进作用。     

外源性rhEGF对放射复合创伤伤口愈合的促进作用

采用宏观、光镜、免疫组化（显示Ⅲ型胶原）和原位杂交（检测１、３型胶原ＭＲＮＡ）等方法,动态观察外用ｒｈＥＧＦ对大鼠放射复合创伤口愈合病变的过程的影响。结果表明：（１）ｒｈＥＧＦ可促进放射复合伤口内肉芽组织的形成。伤后７天见ｒｈＥＧＦ用药创面肉芽组织含量较对照创面明显增多。（２）ｒｈＥＧＦ可促进血管生成。伤后７天见ＥＧＦ用药创面肉芽组织中有较对照创面明显增多的新生毛细血管网。（３）应用ｒｈＥＧＦ可间     

腹主动脉缩窄大鼠模型心肌Ⅰ型和Ⅲ型胶原改变及其mRNA的表达

目的:通过建立腹主动脉缩窄大鼠模型,观察腹主动脉缩窄大鼠心肌中Ⅰ型、Ⅲ型胶原及其mRNA的表达.方法:30只雄性SD大鼠随机分为假手术组(14只)和模型组(16只).模型组根据Doering等的方法,用银夹造成腹主动脉部分狭窄(银夹内径0.7 mm).8 w后用免疫组化法对心肌组织Ⅰ型和Ⅲ型胶原染色,并用光密度值作为其含量指标行图像分析,即时PCR扩增后分析并测定胶原mRNA水平.结果:模型组造模8 w时,Ⅰ型和Ⅲ型胶原平均光密度及其mRNA表达较假手术组显著升高(P＜0.01).胶原组化染色显示,模型组胶原明显增多、增粗、排列紊乱.结论:大鼠腹主动脉缩窄导致反应性纤维化心肌中Ⅰ型和Ⅲ型胶原及其mRNA表达升高,以心肌间质和血管周围增加为主;本模型适合高血压、心力衰竭等慢性过程致心肌纤维化的研究.