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1.
王春荣 《国际生物制品学杂志》1999,(4)
作者用编码卡介苗（BCG）热休克蛋白（Hsp）65的DNA分别与流感病毒核蛋白（NP）的H-2K~d和H-2D~b限制性细胞毒性T细胞（CTL）表位基因构成融合基因,在大肠杆菌中表达。表达的融合蛋白（Hsp65-NP.D和Hsp65-NP.B）经提纯后分别免疫相应的H-2单倍型小鼠,测定其诱生NP特异性CTL的能力。 相似文献
2.
姜春鹏 《国际生物制品学杂志》2004,(1)
理想的丙型肝炎病毒 ( HCV)疫苗应既能诱导特异性中和抗体 ,又能诱导有力的 T细胞免疫应答 ,DNA疫苗在此方面已经显示了一定的前景。为了探索增强 HCV DNA疫苗免疫效果的可行途径 ,作者观察了改变抗原的细胞分布和增加质粒骨架中的 Cp G免疫刺激基元对 HCV E2抗原 DNA疫苗诱导免疫应答的影响。 作者分别构建了三种表达不同细胞分布模式 HCV E2抗原的 DNA疫苗 ,即表达胞内型 E2的 p MAS- E2 ic,编码 HCV36 4- 80 9位氨基酸 ;表达分泌型 E2的 p MAS- E2 s,编码 HCV36 4- 6 6 1位氨基酸 ;表达膜结合型的p MAS- E2 m,编… 相似文献
3.
张春涛 《国际生物制品学杂志》2004,(5)
1型人类嗜 T淋巴细胞病毒 ( HTLV- 1 )是成人 T淋巴细胞白血病 ( ATL )和 HTLV-1相关的脊髓病 /热带痉挛性截瘫 ( HAM/TSP)的致病因素 ,特异性细胞免疫应答对于消除慢病毒感染非常重要 ,而多肽类细胞毒性 T细胞 ( CTL)表位疫苗可诱发抗病毒的特异性 CTL 应答。作者研究了 HTLV- 1TAX蛋白的 3个 CTL表位肽诱导转基因小鼠产生特异性细胞免疫应答的结果。 在设计多肽疫苗时 ,尽可能多地包含CTL表位有可能同时诱导产生较为广泛的特异性细胞免疫应答。因此 ,作者将三个与HLA- A*0 2 0 1相匹配的 CTL 表位肽分别通过两个精… 相似文献
4.
全球有超过1．7亿HCV感染者，其中约80%的感染者可能发展为慢性感染。研究提示，增加靶向多个表位的多重特异性T细胞应答有利于清除病毒和防止病毒逃逸。法国Fournillier等合成了选自HCV非结构蛋白NS3、NS4、NSSB的4个多表位长肽A、B、C、D，4个长肽中均含最小HLA—A2限制性表位，A肽中还有1个HLAⅡ类表位。用代表HLA—A2最小表位的多肽或多表位长肽免疫6～8周龄HLA～A2．1转基因小鼠，通过CTL试验检测小鼠体内多表位长肽诱导特异性CTL的能力。 相似文献
5.
任丽虹 《国际生物制品学杂志》2001,(3)
作者在 BALB/c小鼠中比较了基因枪接种与肌肉注射编码单个细胞毒性 T淋巴细胞 ( CTL )表位或卵白蛋白 ( OVA)的质粒DNA诱导的免疫应答重复性的异同。 李斯特菌溶血素 O( L LO)的 91 - 99寡核苷酸残基是一个 H- 2 Kd 限制性显性 T细胞表位。含 LL O 91 - 99寡核苷酸的质粒p91 mam可表达 L LO91 - 99多肽。质粒 p CI-OVA是将 OVA的 c DNA插入到表达质粒p CICMV增强子 /启动子区域的 Eco RI酶切位点构建而成的。将 6～ 1 2周龄的 BALB/c小鼠分成两组 ,肌肉注射组小鼠免疫前先注射 5 0 μl0 .2 5 %布比卡因以增强细胞对… 相似文献
6.
1型人类嗜T淋巴细胞病毒(HTLV-1)是成人T淋巴细胞白血病(ATL)和HTLV-1相关的脊髓病／热带痉挛性截瘫(HAM／TSP)的致病因素，特异性细胞免疫应答对于消除慢病毒感染非常重要，而多肽类细胞毒性T细胞(CTL)表位疫苗可诱发抗病毒的特异性CTL应答。作者研究了HTLV-1 TAX蛋白的3个CTL表位肽诱导转基因小鼠产生特异性细胞免疫应答的结果。 相似文献
7.
目的：观察乙型肝炎病毒（HBV）S区DNA疫苗pCR3．1－S诱导BALB／C小鼠（H-2^d)的特异性免疫应答,及其对稳定表达HBsAg的小鼠肥大细胞瘤细胞P815（P815－HBV-S)成瘤性的影响。方法：肌肉注射DNA疫苗;背部皮下接种P815－HBV－S细胞,观察成瘤情况;ELISA法检测小鼠血清抗HBs;4h^41Cr释放法检测小鼠脾细胞CTL活性。结果：pCR3．1－S 外可表达HBsAg;小鼠接肿该疫苗后血清450nmA值为0．38,强化免疫后达0．87;pCR3．1－S组CTL细胞杀伤活性为51．1％,对照组为20．5％（P＜0．01）。接种P815－HBV－S细胞后对照组成瘤率100％,pCR3．1－S小鼠成瘤率为16．7％,对照组小鼠6周后全部死亡;pCR3．1－S组6周后存活率为87．5％。结论：HBVS区DNA疫苗具有良好的免疫原性,能够诱导小鼠产生特异性体液免疫和细胞免疫应答,对体内HBV感染具有预防及治疗作用。 相似文献
8.
张薇 《国际生物制品学杂志》1999,(1)
候选痘病毒重组乙型脑炎（JE）疫苗NYVAC-JEV和ALVAC-JEV含有编码JE病毒前膜（prM）、包膜（E）及非结构1（NS1）蛋白的基因。本文旨在确定这些候选疫苗能否诱导人体产生JE病毒特异性CD8~+细胞毒性T淋巴细胞（CTL）。 相似文献
9.
邵圣文 《国际生物制品学杂志》2006,(1)
慢性丙型肝炎患者的T细胞免疫功能低下或不足是丙型肝炎病毒(HCV)持续存在的主要原因。瑞士风湿病与临床免疫学/变态反应医院Engler等应用脂质体包裹HCV的不同T细胞表位多肽,免疫HLA-A2.1转基因小鼠,观察其激活和诱生针对不同HCV表位的T细胞应答的能力。将200mg/ml的大豆卵磷脂、25mg/ml的胆固醇、1.2mg/ml的DL-α-维生素E共同溶解在体积比为1∶1的甲醇/亚甲基氯化物中,再分别与HCV1a基因型的10种CD8+T细胞表位多肽(4mg/ml)混合,制得包裹有HCV不同CD8+T细胞表位的脂质体多肽疫苗。将HBV核壳蛋白的一段多肽或PADRE多肽添加到… 相似文献
10.
目的：通过DNA疫苗与痘病毒联合免疫效果的分析，探讨这种免疫方案的优势及跨膜修饰的DNA质粒诱导的特异性CTL强度。方法：用跨膜修饰的DNA质粒PDRVISV1．0-gagtm在0、2、4周初始免疫BALB／c小鼠，在第6周用疽病毒rVV-syngag加强免疫。在第10周采集血清样本进行抗HIV抗体亚型检测，然后处死小鼠检测小鼠的细胞免疫水平。结果：这种联合免疫的策略免疫组诱导出了特异性CTL反应并且抗体亚型检测免疫反应趋向于Th1型细胞免疫。结论：本实验为提高疫苗免疫原性提供了新的免疫方法。为免疫策略的深入研究奠定了一定的基础，提供了一定的数据支持和启示。 相似文献
11.
贾彦征 《国际生物制品学杂志》1997,(5)
抗原掺入的免疫刺激复合物(ISCOM)可诱导机体产生高水平体液免疫和细胞免疫.本实验将亲水性麻疹病毒(MV)核蛋白(NP)的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位(NP29)与副粘病毒融合肽(F1)嵌合制成IS-COM,用以诱导CTL的溶细胞效应.首先合成代表WVNP281-290氨基酸序列的NP29和含位于NP29CTL表位羧基端融合蛋白序列的NP29-F1,进而制备IS-COM.用表达MVNP的腺病毒载体RAd 68腹腔注射BALB/c小鼠,5～6天后取脾,分离淋巴细胞.用NP29和NP29-F1体外刺激后,与靶细胞P815共同培育,证实NP29-F1与NP29体外诱导的溶靶细胞效应相同.将乳化于弗氏完全佐剂的NP29免疫BALB/c 相似文献
12.
在猪绦虫融合抗原pCC27(本室从六钩蚴cDNA表达文库筛选的3个保护性抗原经拼接所得)基因片段5′末端引入1个通用型辅助性T淋巴细胞表位、2个谷胱甘肽还原酶的辅助性T淋巴细胞表位(TGG)，构建成DNA疫苗。通过肌肉注射途径将这种DNA疫苗免疫小鼠和仔猪。动物试验结果表明，TGG表位可提高小鼠血清pCC27抗体IgG、IgG1、IgG2a的水平，且长时间保持较高应答水平。用该疫苗免疫仔猪获得了89％的保护率。 相似文献
13.
楚莉辉 《国际生物制品学杂志》2002,(5)
尽管多项研究表明 ,编码最少量细胞毒性T细胞 (CTL )抗原表位的 DNA疫苗能同时诱导对多个表位的免疫应答 ,但还未研究疫苗最优化的可能性。因此 ,作者通过实验探求与多表位 DNA疫苗免疫原性增强有关的各种因素 ,以期明确设计该类疫苗的适宜原则。 作者进行了两项实验。第一项实验是测定不同表位的 CTL应答与抗原呈递水平间的关系。首先将原型人类免疫缺陷病毒(HIV)多表位 DNA疫苗 HIV- FT中的表位构建体克隆到表达载体 pc DNA3.1,作为DNA免疫接种备用材料 ;同时 ,将此构建体亚克隆到 p CEI,作为细胞转染的备用材料。用弗氏… 相似文献
14.
唐彩华 《国际生物制品学杂志》1999,(4)
为增强DNA疫苗在体内诱导细胞毒性T细胞（CTL）的能力,作者构建了表达1型人类免疫缺陷症病毒（HIV-1）包膜和gag/pol蛋白的DNA疫苗（pCEnv、pCGag/pol）以及表达CD80和CD86的质粒（pCD80、pCD86）。对6～8周龄BALB/c小鼠的后肢肌肉以100μl 0.25％丁哌卡因盐酸预处理,2天后分3组进行免疫,剂量为:pCEnv+pCD80各50μg、pCEnv+pCD86各50μg以及pCEnv50μg（溶于PBS中）。两周后以铬释放法测CTL应答。发现pCEnv+pCD86可显著增强主要组织相容性Ⅰ类限制性及CD8~+T细胞依赖性CTL应答。 相似文献
15.
采用CTL进行免疫治疗，可能是清除慢性HCV感染的有效途径。虽然HCV核心基因高度保守，但先前的研究表明，HCV核心区可诱导自身免疫，其中氨基酸（aa）1-48以及aa178-187序列可分别诱导抗-GOR和抗-p450自身免疫CTL应答。HCV核心作为靶抗原使用前，应去除自身免疫刺激区。美国阿肯色医科大学Liu等构建了携带核心基因全长aa1-190或者截短的aa49—180（假-GOR和假-p450序列缺失）的两种重组腺伴随病毒（rAAV）载体，分别感染单核细胞／树突状细胞（DC），用PCR／DNA印迹、反转录PCR、流式细胞计量术、^51Cr释放法对AAV／核心的基因组整合、HCV核心mRNA的表达、AAV／核心病毒转导效率及HCV核心特异性CTL应答进行检测。 相似文献
16.
卢海蓉 《国际生物制品学杂志》2002,(4)
为确定重组酵母是否能诱导保护性细胞毒性 T淋巴细胞 (CTL )应答 ,作者应用E.G7- OVA肿瘤模型〔表达鸡卵清蛋白(OVA)的 EL- 4小鼠淋巴瘤细胞〕进行研究。C57BL / 6小鼠 (H- 2 b)皮下注射磷酸盐缓冲溶液 (PBS)或 2× 1 0 7表达 OVA的重组酵母(OVAX) ,每周 1次 ,第 2次注射后 7天用EL- 4或 E.G7- OVA细胞攻击小鼠。结果显示 ,模拟物和 OVAX免疫小鼠都逐渐产生了EL- 4淋巴瘤 ,但是 OVAX免疫小鼠能预防E.G7- OVA肿瘤形成 ,而 PBS免疫小鼠则不能。将研究动物换成 CD8+缺乏的 C57BL/6- Cd8atm IMak基因敲除小鼠 ,则两组… 相似文献
17.
丙型肝炎病毒 (HCV)是引起急、慢性非甲非乙型肝炎的主要原因。目前尚无有效的预防制剂。序列分析表明 ,HCV的核心基因是高度保守的区段 ,故近年来人们的研究集中在以含有核心及包膜基因的质粒进行的DNA免疫上。本文报告了以插入 HCV核心基因片段的重组质粒 p CI- HCV- C免疫小鼠所诱导的免疫应答情况。 将编码 1～ 1 91氨基酸的 HCV核心基因插入 p CI质粒的 Mlu 及 Xba 酶切位点之间 ,构建携带 HCV核心基因的重组质粒p CI- HCV- C。将纯化的 p CI- HCV- C质粒1 0 0μg注入 6～ 8周龄雌性 BAL B/c小鼠胫骨肌肉内 ,以 p… 相似文献
18.
张辉 《国际生物制品学杂志》2003,26(4)
目前 ,合成脂肽相当受人关注 ,是有希望的候选疫苗。胃肠外注射含人巨细胞病毒( HCMV)免疫显性基质蛋白 pp6 5的人白细胞抗原 ( HLA) - A* 0 2 0 1限制性细胞毒性 T淋巴细胞 ( CTL)表位的脂肽能在 HLA- A*0 2 0 1转基因小鼠中有效诱导系统 CTL应答。在此项研究中 ,作者将 HL A- A* 0 2 0 1限制性 HCMV CTL表位 pp6 5495- 50 3与 Th表位PADRE共价偶联 ,构建了合成脂肽 PAM2 -K2 5V。选用 6～ 8周龄的 HLA- A* 0 2 0 1转基因小鼠 ,于第 0、 2 0天鼻内接种 2 5nmolPAM2 - K2 5V。接种后 1 2天取小鼠脾脏和引流颈淋巴结 ( … 相似文献
19.
李振红 《国际生物制品学杂志》2003,26(5)
业已证明含 1 6型人乳头瘤病毒( HPV1 6 ) L2、E6和 E7融合蛋白的候选疫苗TA- CIN在动物模型中可引发 HPV1 6特异性细胞毒性 T细胞 ( CTL )、辅助性 T细胞和抗体产生 ,而且 TA- CIN免疫后可有效阻止HPV1 6阳性肿瘤细胞的生长。本文主要介绍TA- CIN的安全性和免疫原性。 HPV1 6 DNA由 W1 2细胞系分离而得 ,聚合酶链反应特异性扩增 HPV1 6 L2、E7、E6基因 ,将目的基因克隆入 p ET质粒 ,在大肠杆菌表达系统表达融合蛋白 HPV1 6L2 E7E6 ,蛋白经纯化后备用。 将 4 0名健康志愿者 ( 30男 ,1 0女 )随机分为 4组 :安慰… 相似文献
20.
张颖 《国际生物制品学杂志》2005,(3)
丙型肝炎病毒(HCV)会引起急慢性肝炎,包膜糖蛋白(E1E2)经常作为诱生病毒中和抗体的主要目标。因此,美国食品和药物管理局Puig等设计了以E1E2为基础的疫苗,它能诱生抗病毒表面表位的抗体和抗高变区1(HVR1)序列的中和性抗体。将未感染过HCV的黑猩猩Ch1605作为对照,不接种疫苗,只注射3.2半数黑猩猩感染剂量(CID50)的HCV,待其康复后10个月再注射100CID50同样的病毒进行攻击。未感染过HCV的黑猩猩Ch1601在第0、15、20周肌肉注射1mg表达HCV包膜蛋白的DNA质粒,在第5、10周肌肉注射2mgHVR1多肽,使之产生弱的体液和细胞免疫应答。然后… 相似文献
