新型多价人CTL肽构建物可诱导HLA-A~*0201转基因小鼠产生特异性细胞免疫应答

1型人类嗜 T淋巴细胞病毒 ( HTLV- 1 )是成人 T淋巴细胞白血病 ( ATL )和 HTLV-1相关的脊髓病 /热带痉挛性截瘫 ( HAM/TSP)的致病因素 ,特异性细胞免疫应答对于消除慢病毒感染非常重要 ,而多肽类细胞毒性 T细胞 ( CTL)表位疫苗可诱发抗病毒的特异性 CTL 应答。作者研究了 HTLV- 1TAX蛋白的 3个 CTL表位肽诱导转基因小鼠产生特异性细胞免疫应答的结果。　　在设计多肽疫苗时 ,尽可能多地包含CTL表位有可能同时诱导产生较为广泛的特异性细胞免疫应答。因此 ,作者将三个与HLA- A*0 2 0 1相匹配的 CTL 表位肽分别通过两个精…     

疫苗研制中辅助性T淋巴细胞功能的优化

辅助性T淋巴细胞（HTL）应答在诱导体液和细胞免疫中起着重要作用,故HTL表位应是预防和治疗性疫苗的重要组成部分。基因工程制备的泛DR辅助T细胞表位（PADRE）以高亲和力与常见HLA-DR分子结合,发挥了强免疫原作用。含PADRE-B细胞表位的线性肽能诱导显著抗体应答,主要是IgG抗体应答,而且PADRE表位能增强疫苗激发细胞免疫的能力。含PADRE-CTL表位的脂肽也能在转基因小鼠模型中打破CTL耐受。因此采用合成或病原体衍生的有广泛交叉反应性的HTL表位,使HTL功能最优化,为高效疫苗的产生开辟了光辉前景。     

脐血树突状细胞提呈抗原对特异性CTL诱导杀伤的探讨

利用pH3．3柠檬酸．磷酸盐缓冲液（0．131M柠檬酸／0．066M Na2HPO4）提取的QGY-7703细胞膜外抗原多肽（50μg／m1），经过细胞因子GM-CSF（100ng／m1）、TNF-a（1000U／m1）以及IL-4（50ng／m1）诱导脐血造血干细胞分化的脐血树突状细胞（DC）进行抗原加工和提呈后，可以有效地激活外周血淋巴细胞（PBLC），形成特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）．使其对QGY-7703细胞具有明显的杀伤活性，且这种杀伤活性在50：1以后随效：靶比例的增加而更加明显，在对QGY-7703、SPGA-1、HL-60以及K562细胞的杀伤比较时，更加明显地表现出杀伤细胞的特异性，而且研究还表明，这种选择性杀伤作用是通过诱导肿瘤细胞凋亡途径杀死肿瘤细胞，本研究进一步表明应用脐血来源的脐血树突状细胞可以作为肿瘤免疫中的抗原提呈细胞（APC），并执行其抗原提呈作用，激活特异性细胞毒性T淋巴细胞执行其细胞免疫功能。     

病毒T细胞表位和T细胞疫苗的研究进展

细胞免疫应答是机体免疫防御和免疫监视的重要途径,主要由T细胞完成。研究鉴定T细胞表位,研制T细胞疫苗,诱导机体产生细胞免疫应答,是预防病毒等病原体感染和治疗自身免疫病和肿瘤的重要途径,本文介绍了几种T细胞疫苗的研制方法。     

慢性乙型肝炎不同感染谱患者外周血特异性T淋巴细胞功能的研究

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)不同感染谱患者外周血人类白细胞抗原(HLA)-A2限制性HBV核心抗原(HBcAg)特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的功能。方法将HBV感染者分为显性感染组、隐性感染组、无症状携带组、健康对照组,用HBcAg18-27V和HBcAg18-27I2条特异性多肽刺激各组外周血单核细胞(PBMC)后,酶联免疫斑点(ELISPOT)检测抗原表位特异性CTL分泌干扰素(IFN)-γ的应答比例和平均反应强度。结果各组对2条多肽的应答比例和平均反应强度差异均无统计学意义(P>0.05);隐性组的应答比例和平均反应强度均明显高于显性组、携带组和对照组(P<0.05);携带组应答比例和平均反应强度与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HBV不同感染谱患者外周血特异性CTL对HBcAgl8-27V/I刺激应答水平有差别,隐性感染者有较高水平特异性CTL应答。     

肿瘤DNA疫苗:诱导抗肿瘤抗原的CTL应答

CD8 T细胞可以识别肿瘤抗原,因此促使DNA疫苗诱导抗肿瘤抗原的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)应答至关重要。本文主要介绍了DNA疫苗在免疫学方面的最新进展,以及一些增强DNA疫苗诱导CTL应答的方法。     

基于分枝杆菌热休克蛋白70的治疗慢性HBV感染的新疫苗

细胞毒性T淋巴细胞(CTL)能够识别在感染细胞或肿瘤细胞表面表达的与MHC类分子结合的全长8~10个氨基酸的抗原多肽,在控制和消除HBV感染中起核心作用。慢性HBV感染常伴有T细胞低应答和耐受,且树突状细胞(DC)功能不良。而热休克蛋白(hsp)能够诱导T细胞应答和DC成熟。重庆医科大学P     

HCV多表位长肽诱导的初次和记忆T细胞应答

全球有超过1．7亿HCV感染者，其中约80%的感染者可能发展为慢性感染。研究提示，增加靶向多个表位的多重特异性T细胞应答有利于清除病毒和防止病毒逃逸。法国Fournillier等合成了选自HCV非结构蛋白NS3、NS4、NSSB的4个多表位长肽A、B、C、D，4个长肽中均含最小HLA—A2限制性表位，A肽中还有1个HLAⅡ类表位。用代表HLA—A2最小表位的多肽或多表位长肽免疫6～8周龄HLA～A2．1转基因小鼠，通过CTL试验检测小鼠体内多表位长肽诱导特异性CTL的能力。     

动物模型HBV发病机理：血小板功能的最近进展

乙型肝炎病毒（HBV）引起急慢性炎症坏死性肝病和肝细胞癌（HCC）。HBV在肝细胞内进行复制．无致细胞病变作用．大部分与HBV感染有关的肝损伤归咎于免疫应答．固有性免疫应答可能不能明显促进肝病发生或病毒清除．而获得性免疫应答．尤其是细胞毒性T淋巴细胞（CTL）应答则促进二者发生。近期观察也显示抗原非特异性炎症细胞能增强CTL诱导的肝脏病理学变化．     

病毒T细胞表位和T细胞疫苗的研究进展

细胞免疫应答是机体免疫防御和免疫监视的重要途径，主要由Ｔ细胞完成，研究鉴定Ｔ细胞表位，研制Ｔ细胞疫苗，诱导机体产生细胞免疫应答，是预防病毒等病原体感染和治疗自身免疫病和肿瘤的重要途径，本文介绍了几种Ｔ细胞疫苗的研制方法。     

疫苗研制中辅助性T淋巴细胞功能的优化

辅助性Ｔ淋巴细胞（ＨＴＬ）应答在诱导体液和细胞免疫中起着重要作用，故ＨＴＬ表位应是预防和治疗性疫苗的重要组成部分。基因工程制备的泛ＤＲ辅助Ｔ细胞表位（ＰＡＤＲＥ）以高亲和力与常见ＨＬＡ－ＤＲ分子结合，发挥了强免疫原作用。     

T淋巴细胞凋亡信号途径与系统性红斑狼疮

正T淋巴细胞来源于骨髓中的淋巴样前祖细胞,在胸腺中发育成熟,具有介导细胞免疫应答并辅助机体产生体液免疫应答的功能。细胞凋亡(apoptosis)是程序性细胞死亡,机体通过凋亡机制清除衰老及异常细胞,在维持细胞数量平衡及正常功能方面有重要作用。T淋巴细胞功能异常和凋亡紊乱     

重组毕赤酵母HBsAg诱导小鼠细胞免疫应答的研究

目的   研究毕赤酵母表达的重组HBsAg(Pichia-rHBsAg)在小鼠中诱导T细胞免疫应答的能力,评价疫苗的免疫原性.   方法  以rHBsAg免疫雌性BALB/c小鼠,制备小鼠脾淋巴细胞,并在体外以抗原/特异性多肽刺激.采用ELISA法测定抗原特异性T淋巴细胞分泌的细胞因子,酶联免疫斑点法(ELISPOT)测定CTL频数.   结果 由毕赤酵母表达的rHBsAg可在小鼠中诱导Th1和Th2型免疫应答;加铝佐剂的rHBsAg诱导IFN-γ的水平及CTL克隆明显高于无佐剂抗原;Pichia-rHBsAg刺激小鼠细胞免疫应答的水平强于酵母-rHBsAg,与中国仓鼠卵巢细胞-rHBsAg相仿.   结论   Pichia-rHBsAg可在BALB/c小鼠中诱导较强的细胞免疫应答.     

通过接种剂量及接种程序调节对重组HIV-1_(MN)gp160疫苗的免疫应答

已知1型人类免疫缺陷症病毒（HIV-1）包膜糖蛋白含有诱导T细胞记忆的表位,能够诱生抗包膜糖蛋白中和抗体、其他功能性抗体及抗HIV-1细胞毒性T细胞（CTL）应答。研究证实重组包膜糖蛋白能在健康人中诱导这些形式的体液和细胞免疫应答,然而疫苗诱导的中和抗体对实验室适应株有很强的活性,抗HIV-1CTL活性不太强。作者评价了含有HIV-1_(MN)株包膜糖蛋白（MNrgp160）氨基酸序列的候选rgp160疫苗的安全性和免疫原性。     

树突状细胞疫苗对人肺腺癌GLC-82细胞体外杀伤作用的实验观察

目的 通过建立负载人肺腺癌细胞株GLC-82可溶性抗原的树突状细胞(DC)疫苗,探讨应用DC疫苗的致敏特异性杀伤性T细胞(CTL)体外杀瘤细胞的可行性和实验条件,为后期l临床应用提供实验依据.方法 通过用定量摩尔氯化钾提取法获得人肺腺癌细胞GLC-82的可溶性抗原多肽(TSA),从人外周血单核细胞(PBMC)中用GM-CSF、白细胞介素-4和肿瘤坏死因子-α体外诱导扩增并鉴定获取DC,构建DC疫苗;利用DC疫苗刺激同种异体外周血T淋巴细胞活化增殖,诱导产生具有识别肺癌细胞抗原的特异性CTL的可行性及MTT法检测该CTL对GLC-82、肺癌CALU-6和人红白血病K 562细胞的体外杀伤效应.结果 人PBMC体外经7d诱导出的DC,经形态学、免疫组化证实具有典型的树突状细胞特性;负载GLC-82抗原的DC疫苗能有效诱导同种异体T淋巴细胞活化增殖产生CTL,最适浓度为1:10;诱导活化的CTL对靶细胞的杀伤活性明显高于未经肿瘤抗原致敏的组.结论 诱导培养人外周血PBMC中的Mo可获取大量DC,诱导出的DC功能较强,适宜临床应用;DC疫苗能强烈刺激初始型同种异体T淋巴细胞增殖产生CD 8+表达增加的CTL;激活的CTL对肺癌靶细胞发挥高效而特异的细胞毒效应,对非肺组织瘤靶细胞也具有非特异性杀伤效应.     

人树突状细胞融合肝癌细胞体外诱导特异性抗肿瘤免疫

目的探讨人树突状细胞（DC）融合肝癌细胞（HCC）体外诱导T淋巴细胞产生特异性抗肝癌免疫的作用。方法应用人重组粒细胞／巨噬细胞集落刺激因子（rhGM—CSF）和重组人白细胞介素4（rhIL-4）对人外周血单个核细胞进行体外诱导产生树突状细胞,流式细胞仪检测DC表面标志物表达水平,聚乙二醇融合DC与肝癌细胞HerG2,MTT法测定融合细胞（HerG2／DC）刺激T淋巴细胞增生、分化能力,细胞毒性实验检测HerG2／DC诱导的细胞毒T淋巴细胞（CTL）对HerG2的特异性杀伤作用。结果融合细胞HerG2／DC刺激T淋巴细胞增值能力明显提高,HerG2／DC活化的CTL对HerG2具有明显的特异性杀伤作用。结论人树突状细胞融合肝癌细胞可有效诱导T淋巴细胞产生特异性的抗肝癌肿瘤免疫。     

丙型肝炎脂质体多肽疫苗诱导转基因小鼠产生CD8^＋T细胞

慢性丙型肝炎患者的T细胞免疫功能低下或不足是丙型肝炎病毒（HCV）持续存在的主要原因。瑞士风湿病与临床免疫学／变态反应医院Engler等应用脂质体包裹HCV的不同T细胞表位多肽，免疫HLA—A2．1转基因小鼠，观察其激活和诱生针对不同HCV表位的T细胞应答的能力。     

丙型肝炎疫苗的研究进展与挑战

丙型肝炎病毒(hepatitis C vires,HCV)是具有高度基因变异性的RNA病毒,恢复期患者或黑猩猩再次暴露于不同型(株)病毒时可发生再感染.因此,研发HCV疫苗存在着巨大的挑战.HCV预防性疫苗黑猩猩体内研究证实,诱导并保持针对多个病毒表位的辅助T细胞和细胞毒性T细胞(cytotoxic T-lymphocyte,CTL)的免疫应答,是清除病毒和防止慢性感染的必要环节.多特异性B细胞应答可快速诱导产生交叉中和抗体,这些抗体有助于细胞免疫应答.此文总结候选HCV疫苗在分子病毒学和抗病毒免疫应答中的研究进展,并就疫苗在黑猩猩和HCV感染者的体内试验研究进行综述.     

泥鳅多糖对小鼠脾细胞免疫应答的影响

目的:研究泥鳅多糖对小鼠脾细胞免疫应答的影响.方法:分别给正常小鼠、刀豆蛋白(ConA)或左旋咪唑免疫增强小鼠、环磷酰胺免疫抑制小鼠腹腔注射提取的泥鳅多糖,连续给药7d.用~H-胸苷掺入法测定T淋巴细胞的增殖.用~(51)Cr同位素标记法测定细胞毒T淋巴细胞的细胞毒性和天然杀伤细胞的活性.结果:泥鳅多糖5或10mg·kg~(-1)·d~(-1)可以提高T淋巴细胞的增殖,并增强细胞毒T淋巴细胞的细胞毒性和天然杀伤细胞的活性,还能增强ConA解除环磷酰胺对T淋巴细胞增殖抑制的能力,抑制率从环磷酰胺对照组的51.4％分别降低到18.2％和35.1％.而且,给予小鼠10或20mg·kg~(-1)·d~(-1)的泥鳅多糖,可以恢复环磷酰胺所致的天然杀伤细胞活性降低.结论:泥鳅多糖能增强小鼠脾细胞中T细胞、细胞毒T淋巴细胞和天然杀伤细胞的活性.     

新型癌胚抗原疫苗能诱导T细胞增殖、干扰素γ分泌和CTL应答

癌胚抗原（CEA）在许多实体瘤细胞表面高表达，是肿瘤疫苗的潜在靶点。英国诺丁汉大学Parsons等在体外应用改造的CEA独特型抗体，证实了它能诱导T细胞增殖、干扰素γ（IFN-γ）分泌和特异性细胞毒性T细胞（CTL）应答。