反相高效液相色谱法测定灵芝子实体中灵芝酸A的含量

目的 建立测定灵芝子实体中灵芝酸A含量的反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定方法.方法 采用Promosil-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-体积分数0.03％甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速为0.8 ml/min,检测波长254 nm.结果 灵芝酸A的质量浓度在1.1～11μg范围内与...     

灵芝三萜成分分析

目的建立灵芝子实体、孢子粉、发酵菌丝体三萜成分的HPLC含量测定方法.方法以赤芝孢子酸A(ganosporeric acid A,1),赤芝酸A(lucidenic acid A,2),灵芝酸B(ganoderic acid B,3)和灵芝酸C(ganoderic acid C,4)为对照品;色谱柱:反相C18;流动相:乙腈-水(37∶63);流速:1.0 mL*min-1;检测波长:UV 254 nm.结果进样量在0.2～1 μg有良好的线性关系,(1),(2),(3)和(4)的加样回收率分别为100.9%,101.2%,101.3%和101.7%.结论本法快速、简便、灵敏和分离度好,适用于灵芝子实体、孢子粉、发酵菌丝体及相关制剂的三萜类物质检查和含量测定.     

灵芝三萜成分分析灵芝三萜成分分析

目的建立灵芝子实体、孢子粉、发酵菌丝体三萜成分的HPLC含量测定方法。方法以赤芝孢子酸A(ganosporeric acid A,1),赤芝酸A(lucidenic acid A,2),灵芝酸B(ganoderic acid B,3)和灵芝酸C(ganoderic acid C,4)为对照品;色谱柱:反相C₁₈;流动相:乙腈-水(37∶63);流速:1.0 mL·min^-1;检测波长:UV 254 nm。结果进样量在0.2～1 μg有良好的线性关系,(1),(2),(3)和(4)的加样回收率分别为100.9%,101.2%,101.3%和101.7%。结论本法快速、简便、灵敏和分离度好,适用于灵芝子实体、孢子粉、发酵菌丝体及相关制剂的三萜类物质检查和含量测定。     

HPLC测定灵芝孢子油中灵芝酸C1的含量

目的 建立灵芝孢子油中灵芝酸C1的含量测定方法。方法 采用Agilent Zorbax-SB C8 ( 150 mm×4.6 mm,3.5 μm)色谱柱,以乙腈- 0. 1%醋酸（25：75）为流动相,流速为1. 0 mL·min-1 ,检测波长256 nm,柱温22℃。结果 灵芝酸C1在1～25.04μg· mL-1范围内呈良好的线性关系（r=0.9999）,平均回收率为97.47%。不同来源的灵芝孢子油中灵芝酸C1含量有一定差别且灵芝酸C1含量均较低,部分样品中不含有灵芝酸C1。结论 该方法简便准确,重现性好,可为灵芝孢子油的质量控制提供参考依据。     

RP-HPLC和UV-VIS法测定灵芝不同收获期的多糖肽和灵芝酸

目的研究灵芝不同栽培方式和不同收获期中多糖肽和灵芝酸A、B的变化,为灵芝规范化栽培及制定产品质量标准提供依据。方法 RP-HPLC测定菌草灵芝和仿野生栽培的灵芝提取物的灵芝酸A、B的变化。色谱柱为XB-C18柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为0.05%磷酸-乙腈(65:35),检测波长254nm,常温,进样量50μL。以灵芝多糖肽为对照品,采用Folin-酚试剂法,通过紫外-可见吸收光谱法检测菌草灵芝和仿野生栽培灵芝不同收获期提取物的多糖肽。结果灵芝酸A、B线性范围分别为14.8～371.0和16.4～409.0μg/mL,平均回收率为95.0%、100.5%,RSD分别为1.18%、3.37%(n=6)。灵芝多糖肽在100～600μg/mL与吸光度值呈线性关系,r=0.9995,回收率95%～100%。结论该方法简便、快速,可用于灵芝及其产品中多糖肽和灵芝酸A、B的质量控制。菌草灵芝沸水提取能将多糖肽和灵芝酸分离,既简化了灵芝水、醇提取工艺,又提高经济效益。     

灵芝孢子粉质量标准提高研究

目的 建立灵芝孢子粉的HPLC特征图谱及三油酸甘油酯的含量测定方法。方法 采用ACCHROM Unitary-C₁₈(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,流动相为乙腈-异丙醇(51∶49),流速为1.0 mL·min^-1,柱温为30 ℃,检测器为蒸发光散射检测器。结果 建立了灵芝孢子粉HPLC特征图谱,确定了10个共有峰,指认了其中8个共有峰的成分分别为三亚油酸甘油酯、二亚油酸油酸甘油酯、二亚油酸棕榈酸甘油酯、二油酸亚油酸甘油酯、棕榈酸油酸亚油酸甘油酯、三油酸甘油酯、二油酸棕榈酸甘油酯和二油酸硬脂酸甘油酯。三油酸甘油酯进样量在0.613 2~18.40 μg(r=0.998 9)内与峰面积线性关系良好,平均加样回收率为104.1%(RSD=1.8%)。结论 特征图谱结合三油酸甘油酯的含量测定,能更好地控制灵芝孢子粉的质量。     

灵芝中10种灵芝酸类成分含量一测多评法的建立

目的 建立同时测定灵芝中10种灵芝酸类成分的一测多评法。方法 采用高效液相色谱（HPLC）法，以灵芝酸A为内参物，分别计算灵芝酸B、灵芝酸C2、灵芝酸D、灵芝酸F、灵芝酸H、灵芝烯酸A、灵芝烯酸B、灵芝烯酸C、灵芝烯酸D 9种成分的相对校正因子，用相对校正因子计算上述灵芝酸类成分的含量，并与外标法测定结果进行比较。结果 灵芝酸A、灵芝酸B、灵芝酸C2、灵芝酸D、灵芝酸F、灵芝酸H、灵芝烯酸A、灵芝烯酸B、灵芝烯酸C、灵芝烯酸D的线性范围分别为0.032～3.996、0.040～4.971、0.037～4.568、0.028～3.558、0.033～4.177、0.044～5.440、0.032～3.944、0.040～4.994、0.045～5.593、0.035～4.342 mg/mL(R 2均不小于0.999 2)；精密度、稳定性（24 h）、重复性试验的RSD均小于2%；平均加样回收率分别为99.43%、100.25%、98.50%、99.88%、100.59%、99.64%、98.50%、99.40%、99.64%、99.76%(RSD<2%,n=6)。灵芝酸B、灵芝酸C...     

HPLC法测定脑心清片中糠酸的含量

目的 建立脑心清片中糠酸含量的HPLC测定方法.方法 采用HPLC法,Hypersil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相:甲醇-0.3％磷酸(20∶80);流速:1.0 ml/min;检测波长:240 nm.结果 糠酸在0.15 ～1.50 μg(r=0.999 9)范围内呈良好线性关系;平均加样回收率(n=6)为100.71％,相对标准偏差(RSD)为2.36％.结论 本方法简便,结果准确,重现性好,可为脑心清片的质量控制提供参考依据.     

RP-HPLC法测定双灵固本散中灵芝酸H的含量

目的建立测定双灵固本散中灵芝酸H含量的RP-HPLC方法。方法采用RP-HPLC法,Zor-bax SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-体积分数为0.03%的磷酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速为1.0 mL.min-1,检测波长为252 nm,柱温为35℃。结果灵芝酸H的质量浓度在16.34~408.5 mg.L-1内与峰面积呈良好线性关系,r=0.999 8;平均回收率为99.0%,RSD为2.6%(n=9)。测定的10批双灵固本散样品中,灵芝酸H的含量质量分数均在0.130%~0.348%之间。结论该方法可为双灵固本散的质量控制及质量标准的建立提供了科学的依据。     

高效液相色谱法测定灵芝提取物中尿苷和腺苷含量

目的 建立测定不同产地的灵芝提取物(包括赤芝提取物和紫芝提取物)中尿苷和腺苷含量的反相高效液相色谱法.方法 采用Agilent Zorbax SB-Aq柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水为流动柱(梯度洗脱),流速为0.8 mL/min,检测波长为260 nm.结果 尿苷和腺苷质量浓度分别在2.44 ～ 195.6 μg/mL(r=1.000 0)和2.64 ～ 105.6μg/mL(r=1.000 0)范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率分别为102.0％和101.2％,RSD分别为0.2％和1.0％(n=6).不同产地的灵芝提取物中尿苷及腺苷的含量及二者总量差异较大,且同一产地不同批次尿苷及腺苷的含量及二者总量也存在一定差异.结论 该法简便、准确、重复性好,可用于灵芝提取物中尿苷和腺苷的测定,试验结果为灵芝提取物的质量评价提供了参考依据.     

赤芝子实体中一个新的三萜化合物(英文)

赤芝 (Ganoderma lucidum) 是我国及东亚地区常用的民间草药, 具有良好的治疗及保健作用。本文对赤芝子实体的化学成分进行了研究, 从中分离并鉴定了两个羊毛甾烷型三萜类化合物, 其中化合物1为新化合物, 鉴定为 (24S)-羊毛甾-7-氧-8-烯-3β, 24, 25-三醇, 并命名为灵芝三醇 M (1); 化合物2为灵芝酸ε 。     

灵芝菌-玄七通痹胶囊药渣双向发酵工艺的研究

目的：优化灵芝菌?玄七通痹胶囊药渣双向发酵工艺,初步探讨其主要活性组分的物质差异。方法以多糖、灵芝酸和皂苷作为检测指标,考察药渣浓度、固液比、药渣粒径等因素对灵芝菌发酵玄七通痹胶囊药渣的影响,并利用高效液相色谱（ HPLC）技术分析添加药渣发酵后主要活性组分的物质差异。结果以多糖为目标产物,最佳的药渣添加量25％,固液比1∶1．5,药渣粒径60目过筛,发酵时间25 d;以灵芝酸为目标产物,最佳的药渣添加量40％,固液比1∶1．8,药渣粒径60目过筛,发酵时间30 d。并且添加药渣发酵后,在多糖组分和灵芝酸组分中都产生了新的物质。结论本研究不仅将为解决中药渣直接排向环境造成的污染等问题提供参考,而且还为实现中药渣再利用、新药及功能饲料添加剂的开发提供依据。     

Ganoderic acid T inhibits tumor invasion in vitro and in vivo through inhibition of MMP expression

The traditional Chinese medicinal mushroom, Ganoderma lucidum, has been used in Asia for several thousand years for the prevention and treatment of a variety of diseases, including cancer. In previous work, we purified ganoderic acid T (GA-T) from G. lucidum [28]. In the present study, we investigate the functions of GA-T in terms of its effects on invasion in vitro and metastasis in vivo. A trypan blue dye exclusion assay indicates that GA-T inhibits proliferation of HCT-116 cells, a human colon carcinoma cell line. Cell aggregation and adhesion assays show that GA-T promotes homotypic aggregation and simultaneously inhibits the adhesion of HCT-116 cells to the extracellular matrix (ECM) in a dose-dependent manner. Wound healing assays indicate that GA-T also inhibits the migration of HCT-116 cells in a dose-dependent manner, and it suppresses the migration of 95-D cells, a highly metastatic human lung tumor cell line, in a dose- and time-dependent manner. In addition, GA-T inhibits the nuclear translocation of nuclear factor-κB (NF-κB) and the degradation of inhibitor of κB-α (IκBα), which leads to down-regulated expression of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9), inducible nitric oxide synthase (iNOS), and urokinase-type plasminogen activator (uPA). Animal and Lewis Lung Carcinoma (LLC) model experiments demonstrate that GA-T suppresses tumor growth and LLC metastasis and down-regulates MMP-2 and MMP-9 mRNA expression in vivo. Taken together, these results demonstrate that GA-T effectively inhibits cancer cell invasion in vitro and metastasis in vivo, and thus it may act as a potential drug for treating cancer.     

赤芝子实体中灵芝酸类成分的研究

自赤芝［Ｇａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｄｕｍ（Ｆｒ．）Ｋａｒｓｔ．］子实体的二氯甲烷提取物中分离得到一个新的四环三萜化合物，命名为灵芝酸ＤＭ（ｇａｎｏｄｅｒｉｃａｃｉｄＤＭ，Ｉ）。根据光谱（ＵＶ，ＩＲ，１ＨＮＭＲ，１３ＣＮＭＲ，ＭＳ２ＤＮＭＲ）分析，确定其结构为Ｉ式。同时还分离得到二个已知的灵芝酸类化合物，即灵芝酸Ａ（ｇａｎｏｄｅｒｉｃａｃｉｄＡ，Ｉ）和灵芝酸Ｃ（ｇａｎｏｄｅｒｉｃａｃｉｄＣ，ＩＩ）。     

丽水地产灵芝子实体与灵芝孢子粉中灵芝烯酸D、多糖及重金属元素的测定

摘 要 目的： 丽水地产灵芝子实体和灵芝孢子粉中三萜类化合物、多糖及重金属元素的含量测定。方法: 采用HPLC法测定样品中灵芝烯酸D含量及分析其他三萜类化合物,用蒽铜 硫酸比色法测定多糖含量,用原子吸收分光光度法测定2种重金属含量。结果: 灵芝子实体与灵芝孢子粉中三萜类化合物的HPLC特征图谱差异明显;灵芝孢子粉中多糖含量高于子实体;灵芝菌柄重金属含量较菌盖高,菌盖与孢子粉中重金属含量无明显差异。结论:本试验可为评价丽水地产灵芝子实体的质量及比较灵芝子实体与灵芝孢子粉的药效提供理论依据。     

灵芝酸抗癌机制的分子模拟研究

目的分析灵芝酸与肿瘤靶酶的相互作用模式,研究灵芝酸的抗肿瘤机制。方法根据灵芝酸结构寻找可能的肿瘤靶点,并基于靶点结构,利用分子对接,探讨灵芝酸与靶酶的相互作用模式以及作用强度。结果与结论预测了灵芝酸与肿瘤靶标的结合方式,有助于理解灵芝酸的抗肿瘤机制。     

灵芝孢子油指纹图谱研究及其混淆品鉴别

目的 建立灵芝孢子油HPLC指纹图谱并鉴别其油类混淆品。方法 采用ACCHROM Unitary-C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,乙腈-异丙醇(51：49)为流动相,流速为1.0 mL.min-1,柱温为30℃,蒸发光散射检测器的HPLC方法。结果 建立了灵芝孢子油脂肪酸酯类成分HPLC指纹图谱,确定了8个共有峰,分别为三亚油酸甘油酯、1,2-二亚油酸-3-油酸甘油酯、1,2-二亚油酸-3-棕榈酸甘油酯、1,2-二油酸-3-亚油酸甘油酯、1-棕榈酸-2-油酸-3-亚油酸甘油酯、三油酸甘油酯、1,2-二油酸-3-棕榈酸甘油酯、1,2-二油酸-3-硬脂酸甘油酯。灵芝孢子油混淆品的图谱与灵芝孢子油指纹图谱有明显区别。结论 建立的灵芝孢子油脂肪酸酯类成分指纹图谱能很好地区别灵芝孢子油和其混淆品。