聚合酶链反应在乙型肝炎病毒感染诊断中的意义

用ＰＣＲ法检测１６６例乙型肝炎病毒感染者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ。结果显示：ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢｃ阳性，ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｅ、抗－ＨＢｃ阳性和ＨＥｂＡｇ阳性组，ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率分别为９６．２％、２８．６％、９３．５％、ＨＢｓＡｇ单项阳性者中，检出ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性７８例（孕妇占１９．２％），阳性率８１．３％。另外，在２０例血清标志物全部阴性对照组中发现ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性１例，阳性率５．     

晚期原发性肝癌患者血清PCR－HBV DNA的意义

目的：为进一步研究ＨＢＶ感染与原发性肝细胞癌的关系．方法：ＥＬＩＳＡ法检测血清中ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ，抗－ＨＢｅ，抗－ＨＢｃ和抗－ＨＢｓ；ＰＣＲ检测血清ＨＢＶＤＮＡ．结果：３７例晚期原发性肝癌患者血清ＨＢ－ｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ，抗－ＨＢｅ和抗－ＨＢｃ阳性者分别为１７例（４５．９５％），４例（１０．８１％），１６例（４３．２４％）和９例（２４．３２％），而抗－ＨＢｓ全部阴性．聚合酶链式反应检测ＨＢＶＤＮＡ，１８例（４８．６９％）阳性，非常显著地高于ＨＢｅＡｇ检出率（Ｐ＜０．０１）．抗－ＨＢｅ阳性中有７例ＰＣＲ－ＨＢＶＤＮＡ阳性．ＨＢＶ总感染率８９．１９％．结论：提示原发性肝癌发生与ＨＢＶ感染有关．     

乙肝病毒标志物阳性产妇母乳喂养的研究

目的：探讨乙型肝炎（ 乙肝） 病毒携带孕妇胎儿宫内感染率和乳汁中乙肝病毒（ Ｈ Ｂ Ｖ） 阳性率的相关性,分析研究乙肝血清学指标阳性产妇是否适于哺乳。方法：对５２ 例乙肝血清学指标阳性的产妇,应用酶联免疫吸附法和斑点杂交法分别检测脐血和初乳中的 Ｈ Ｂ Ｖ 标志物（ Ｈ Ｂ Ｖ Ｍ） 以及 Ｈ Ｂ Ｖ 脱氧核糖核酸（ Ｈ Ｂ Ｖ Ｄ Ｎ Ａ） ,并对比分析。结果：孕妇 Ｈ Ｂ Ｖ 阳性与相应的脐血和初乳中的 Ｈ Ｂ Ｖ Ｍ 阳性率以及 Ｈ Ｂ Ｖ Ｄ Ｎ Ａ 的检出率呈高度的一致性（ Ｐ ＞ ００５） 。５２ 例 Ｈ Ｂ Ｖ Ｍ 阳性的孕妇中,脐血和初乳中 Ｈ Ｂ Ｖ Ｄ Ｎ Ａ 的检出率均以乙肝表面抗原（ Ｈ Ｂｓ Ａｇ） 、乙肝ｅ 抗原（ Ｈ Ｂｅ Ａｇ） 及乙肝核心抗体（ Ａｎｔｉ Ｈ Ｂｃ）３ 项阳性者最高（８５７１ ％ 和９２８６ ％ ） , Ｈ Ｂｓ Ａｇ 、 Ｈ Ｂｅ Ａｇ 双项阳性者次之（８０ ％ ） , Ｈ Ｂｓ Ａｇ 单项阳性者最低（２０ ％ ） 。结论： Ｈ Ｂ Ｖ 宫内传播以及初乳排毒率与母亲的 Ｈ Ｂｓ Ａｇ 和 Ｈ Ｂｅ Ａｇ 状态密切相关。直接检测初乳中 Ｈ Ｂ Ｖ Ｄ Ｎ Ａ 为指导哺乳的最可靠方法。血中 Ｈ Ｂｓ Ａｇ 、 Ｈ Ｂｅ Ａｇ 和 Ａｎｔｉ Ｈ Ｂｃ３ 项阳性以及 Ｈ Ｂｓ     

HBV DNA在HBsAg阴性的原发性胆管细胞性肝癌石蜡包埋肝组织中的检出

对２４例酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）ＨＢｓＡｇ阴性的原发性胆管细胞性肝癌的石蜡包埋肝组织，应用ＰＣＲ－ＥＢ法检测了乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ，并与ＥＬＩＳＡ法检测的血清免疫学标志物（乙肝５项：ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｓ、ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢｅ、抗－ＨＢｃ）结果进行对比。结果显示血清学乙肝５项均阴性的及ＨＢｓＡｇ阴性但其它４项中至少有１项阳性的胆管细胞性肝癌石蜡包埋肝组织中，ＨＢＶＤＮＡ阳性检出率分别为３８．９％和４５．８％，证实ＨＢｓＡｇ血清学阴性者肝组织中仍有ＨＢＶＤＮＡ存在     

1343例孕妇乙肝病毒感染情况分析

对１３４３例孕妇进行乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）标志物检测。结果显示，ＨＢｓＡｇ阳性者１８０例，占１３．４０％，其中来自农村的孕妇ＨＢｓＡｇ阳性率（１５．９９％）明显高于城市（１１．３９％）的孕妇（Ｐ＜０．０５）。而在ＨＢｓＡｇ阳性的１８０例孕妇中，有３５例伴有ＨＢｅＡｇ阳性，表明本地区孕妇ＨＢＶ感染率是相当高的。因此，对孕妇常规进行产前ＨＢＶ检测有助于阻断ＨＢＶ的母婴传播。     

乙型肝炎血清学指标阳性母亲母乳HBV—DNA检测

随机取５０例乙肝血清学指标阳性母亲产后２－３ｄ人的初乳，采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测初乳中ＨＢＶ－ＤＮＡ。结果：抗原阳性组乙肝病毒（ＨＢＶ－ＤＮＡ）的检出率为５０％，抗体阳性组ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率为７．７％。抗原阳性组中，ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ及抗－ＨＢｃ３项阳性乾和ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ２基阳性者乳汁中ＨＢＶ－－ＤＮＡ检出率为１００％，说明该类乳汁具有极强传染性，抗体阳性组中单纯抗－ＨＢｓ     

PCR与ELISA在检测乙型肝炎病毒标志物中的应用比较

目的：观察ＰＣＲ与ＥＬＩＳＡ法在检测乙肝病毒标志物中的差异。方法：用ＰＣＲ和ＥＬＩＳＡ法对８０３例疑似乙肝者做了ＨＢＶＤＮＡ和乙肝五项指标检查，并进行比较。结果：在ＨＢｓＡｇ（＋）的７３６例中ＨＢＶＤＮＡ阳性率５８．７７％。ＨＢｅＡｇ（＋）的３５３例中ＨＢＤＮＡ阳性率为９６．３％。ＨＢｅＡｇ（－）的４０８例中ＨＢＶＤＮＡ阳性率为２３．０％。ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ均（－）的２５例中ＨＢＶＤＮＡ阳性率     

慢性乙型肝炎患者血清HBVDNA与HBV标志的关系

目的：探讨慢性乙肝患者血清乙肝病毒脱氧核糖核酸（ＨＢＶＤＮＡ）与ＨＢＶ标志的关系。方法：应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对１２６例慢性乙肝患者的血清ＨＢＶＤＮＡ进行检测。结果：ＨＢｅＡｇ阳性患者血血清ＨＢＶＤＮＡ检出率为７３．３％,ＨＢｓＡｇ阳性和抗－ＨＢｅ阳性患者血清ＨＢＶＤＮＡ检出率分别为５５．０％和４０．８％。结论：ＨＢＶＤＮＡ反映乙肝病毒复制方面比ｅ系统更敏感,是反映乙肝病毒复制的重要指标之一。     

HBV垂直传播检测指标的探讨

探讨最敏感的ＨＢＶ垂直传播的检测指标,方法,本文应用ＥＬＩＳＡ法和ＰＣＲ技术检测了５８例任娠孕妇及其新生儿血清ＨＢＶ标志物与ＨＢＶＤＮＡ。结果ＨＢｓＡｇ阳性与阴性孕妇的新生儿ＨＢＶＤＮＡ检出率分别为５５．８％和５．０％。     

220例适龄心肝炎患者血清HBV—DNA和HBVM的对比分析

本文对２２０例疑似肝炎患者进行了ＨＢＶ－ＤＮＡ和ＨＢＶＭ检测，并与２０例健康人作对照。结果ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及ＨＢｃＡｂ均阳性７２例中，ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者有６９例（９５．８％）；２５例ＨＢｅＡｇ阴性、ＨＢｅＡｂ阳性９例单纯ＨＢ阳性，６例ＨＢｓＡｂ一及１０８例ＨＢＶＭ均阴性中ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性阳性率分别为５２．０％、６６．７％、３３．３％和２５．０％，结果还表明，两各方法不可替代。     

HBV-DNA的含量与宫内感染的关联性

目的：探讨孕妇血清中HBV—DNA含量与胎儿宫内感染及造成宫内感染的相关因素．方法：用ELISA方法筛选HBsAg阳性孕妇228例,并用定量PCR技术检测HBsAg阳性孕妇血清以及脐血中HBV—DNA．新生儿根据有无HBV感染分为胎儿感染组及非感染组（对照组）,调查宫内感染的相关因素,结果：HBsAg,HBeAg、抗HBc阳性孕妇的新生儿脐血HBV—DNA捡出率21％（14／68）;HBsAg．抗HBe,抗HBc阳性者为1．7％（2／117）;HBsAg和HBeAg双阳性者为20％（3／15）;HBsAg和抗HBc阳性者为11％（2／19）;HBsAg单一抗原阳性者脐血中未捡出HBV—DNA．胎儿总感染率为9,2％（21／228）．胎儿宫内感染率随孕妇血清中HBV—DNA含量增加而升高,宫内感染的危险性越大．胎儿感染组与非感染组在多种临床相关因素中先兆早产孕妇胎儿感染者多于非感染组（P〈0．05）．结论：孕妇不同的感染状态影响宫内HBV感染率,HBeAg与HBV—DNA高滴度是胎儿宫内感染的高危因素．孕妇出现先兆早产使胎儿的感染率增加．     

HBV宫内感染的危险因素及与HBV DNA的关系

目的 探讨乙型肝炎病毒（HBV）宫内感染的危险因素及HBV DNA含量对HBV宫内感染的影响。方法 分别用酶联免疫吸附法及荧光定量PCR法检测230例HBsAg阳性孕妇及其新生儿外周血HBV血清标志物和HBV DNA含量，发生宫内感染的为病例组，余为对照组，运用非条件Logistic回归模型对宫内感染的危险因素进行分析。结果 （1）230例HBsAg阳性孕妇分娩的新生儿中，有22例发生宫内感染。其中HBsAg阳性7例，HBV DNA阳性18例，HBsAg和HBV DNA均阳性的3例，总的HBV宫内感染率为9．6％（22／230）。（2）非条件Logistic多元回归分析表明，仅HBV DNA浓度分级有统计学意义，OR为1．57（1．12．2．21）。（3）230例HBsAg阳性孕妇中HBV DNA阳性者119例，发生宫内感染18例，感染率为15．1％（18／119），并且当孕妇血清HBV DNA浓度≥10^7copies／ml时，HBV宫内感染率显著增加，（χ^2=-7．92，P〈0．05）。结论 孕妇血清HBV DNA浓度分级是HBV宫内感染的危险因素，并且当HBV DNA浓度≥10^7copies／ml时，其宫内感染率显著增加。     

乙型肝炎病毒宫内感染相关因素的探讨

目的探讨孕妇乙型肝炎病毒感染状态及胎盘感染与宫内感染关系，进而分析乙型肝炎病毒宫内感染的危险因素。方法采用荧光定量PCR技术及酶联免疫吸附试验，对92例HBsAg阳性孕妇及其新生儿的外周血行HBV DNA及乙肝血清标志物检测。采用免疫组化S-P法，对92例HBsAg阳性孕妇分娩时胎盘组织行HBsAg及HBcAg的检测。结果（1）HBeAg阳性孕妇与HBeAg阴性孕妇HBV宫内感染率分别为21．2％（11／52）和0（0／40），差异有显著性（P〈0．01）；HBV DNA阳性孕妇与HBV DNA阴性孕妇HBV宫内感染率分别为18．64％（11／59）和0（0／33），差异有显著性（P〈0．025）。（2）92例HBsAg阳性孕妇的胎盘中共检测出43例HBsAg和（或）HBcAg阳性，阳性率由胎盘的母面至胎儿面有逐渐下降的趋势。由胎盘屏障的蜕膜细胞（DC）、滋养层细胞（TC）、绒毛间质细胞（VSC）和绒毛毛细血管内皮细胞（VCEC）感染而致的宫内传播的相对危险度比值比（0R）分别为4．53、7．15、9．33和24．33，0R值从胎盘的母面至胎儿面有逐渐上升的趋势。结论新生儿宫内感染与孕妇乙肝感染状态有关，HBV宫内感染以经胎盘感染为主，感染胎儿的途径可能是通过细胞转移方式实现的，胎盘屏障对胎儿有一定的保护作用。HBeAg阳性、HBV DNA阳性及绒毛毛细血管内皮细胞（VCEC）感染是新生儿宫内HBV感染的危险因素。     

胎盘HBV-DNA定量检测与宫内感染关系的研究

目的 探讨胎盘HBV—DNA含量与官内感染的关系及作为胎盘传染性和病毒复制的直接指标的可靠性。方法 采用FQ～PCR（荧光探针定量聚合酶链反应）检测344例HBV标志物阳性孕妇足月分娩后的胎盘的HBV—DNA含量，并分别检测同一孕妇分娩前的外周血及脐血的HBV—DNA含量，比较其测定值范围及相互关系。结果 344例孕妇按乙肝标志物组合，分为三组，分别检测分娩前外周血HBV—DNA、胎盘HBV—DNA及脐血HBV—DNA，检出率分别为：（1）HbsAg携带组90例，22．2％（20／90）、33．3％（30／90）和5．6％（5／90）；（2）大三阳组134例，70．9％（95／134）、85．8％（115／134）和11．9％（16／134）；（3）小三阳组120例，20.8％（25／120）、20．8％（25／120）和3．3％（4／120）。孕妇乙肝标志物阳性以大三阳组HBV—DNA阳性率最高，胎盘组织HBV—DNA含量与母血HBV—DNA含量有一致性和相关性。结论 外周血HBV—DNA阳性孕妇更易发生胎盘感染。官内感染的程度可随胎盘组织HBV—DNA含量增加而程度加重。胎盘HBV—DNA含量可作为一个宫内感染的判断指标。     

HBV宫内感染危险因素的病例对照研究

目的 探索乙型肝炎病毒(HBV)宫内感染的危险因素,为预防HBV宫内感染提供科学依据.方法 将2013年4月至2015年5月妊娠后经筛选HBsAg阳性312例孕妇作为研究对象,观察至婴儿出生后6个月,以HBsAg和(或)HBV DNA检测阳性婴儿的母亲为宫内感染病例组,其余婴儿的母亲为对照组,采用Logistic回归分析法对HBV宫内感染危险因素进行分析.采用问卷调查法收集基本资料,时间分辨免疫荧光分析法检测HBsAg,PCR方法检测HBV DNA的水平,自动生化分析仪检测ALT、AST、三酰甘油、胆固醇等肝功能指标.结果 单因素分析结果显示HBeAg、HBV DNA、羊水污染、孕期性行为与HBV宫内感染有关(P＜0.05).多因素Logistic回归结果显示:孕妇HBeAg阳性(OR=2.76,95％CI=1.19～7.94)、孕妇HBVDNA阳性(OR=9.62,95％CI=2.58～35.33)、孕期性行为(OR=1.53,95％CI=1.07～6.40)是宫内感染的危险因素.结论 孕妇HBeAg和HBV DNA阳性、孕期性行为可能是新生儿HBV宫内感染的高危因素.     

乙型肝炎病毒母婴垂直传播与乙肝抗原及乙肝DNA载量的关系研究

目的研究妊娠合并乙型肝炎病毒感染孕妇母婴垂直传播相关因素。方法选择妊娠合并乙型肝炎病毒感染孕妇100例作为研究对象,对患者病病历资料作回顾性分析。结果 HBsAg单阳性孕妇母婴垂直传播几率1.75%较HBsAg、HBeAg双阳性母婴垂直传播几率46.51%低,差异有统计学意义（P〈0.05）。外周血HBV DNA≥106copies/mL的产孕妇分娩后胎儿HBV DNA阳性率50.0%较HBV DNA≤105copies/mL和105copies/mL。     

孕妇无症状HBsAg阳性胎儿宫内感染

目的:探讨乙型肝炎病毒宫内传播的危险因素和干预措施。 方法 :对在我院分娩的无症状 HBs Ag阳性产妇抽取静脉血和其新生儿脐血 ,检测乙型肝炎病毒标志物及乙肝 DNA。对部分大三阳孕妇孕晚期注射 HBIG,观察干预效果。结果 :大三阳孕妇乙肝 DNA阳性检出率明显高于小三阳孕妇 (P <0 .0 0 1) ,其新生儿脐血 HBs Ag阳性率也明显高于小三阳孕妇 (P<0 .0 5 ) ,大三阳孕妇孕晚期注射 HBIG可降低宫内传播。 结论 :患有大三阳的母亲对胎儿威胁最大 ,应在孕前进行治疗 ,孕晚期注射 HBIG可能有利于阻断母婴间垂直传播     

用荧光探针定量多聚酶链反应技术检测乙肝病毒宫内传播的研究

目的探讨孕妇血中乙肝病毒(HBV)DNA数量与宫内传播的关系.方法用荧光探针定量多聚酶链反应(FQ-PCR)方法,检测76例乙肝病毒表面抗原(HBsAg)阳性孕妇血清中HBV DNA数量.26例HBV DNA阳性者肌注乙肝免疫球蛋白,新生儿出生后24h内取末梢静脉血检测HBV DNA.结果孕妇血中HBV DNA阳性者其宫内感染率为33.3%,宫内感染与孕妇血中HBV DNA数量有关,HBV DNA数量高易导致胎儿宫内感染,乙肝免疫球蛋白免疫注射后可降低HBV宫内感染率.结论孕妇血中HBV DNA数量高易导致胎儿宫内感染,孕期应用乙肝免疫球蛋白可减少宫内传播.     

TLR2在慢性乙肝孕妇胎盘中的表达及与宫内感染的关系

目的：探讨Toll样受体2（ TLR2）在慢性乙肝孕妇胎盘中的表达及与宫内感染的关系。方法选择HBsAg阳性的慢性乙肝孕妇80例,其中HBeAg阳性组40例,HBeAg阴性组40例,选择同期在我院分娩的正常孕妇20例为对照组,采用ELISA法检测孕妇外周血HBV血清标志物,采用蛋白印迹法检测TLR2分别在3组胎盘中的表达水平,荧光定量PCR法检测3组胎盘中HBV-DNA含量,同时采用ELISA法检测其分娩的新生儿外周血HBsAg,记录新生儿宫内感染率。结果 TLR2在对照组、HBeAg阴性组、HBeAg阳性组孕妇胎盘中表达逐渐降低,组间比较差异均有统计学意义（P＜0．05）,胎盘HBV感染率在对照组、HBeAg阴性组、HBeAg阳性组逐渐升高,组间比较差异均有统计学意义（P＜0．05）,新生儿HBV宫内感染率在对照组、HBeAg阴性组、HBeAg阳性组逐渐升高,组间比较差异均有统计学意义（P＜0．05）。结论TLR2可能参与了胎盘感染HBV过程,并与HBV宫内感染有着密切的联系。     

乙型肝炎病毒宫内感染对胎儿生长发育的影响.

目的：探讨乙型肝炎病毒宫内感染对胎儿生长发育的影响。方法：回顾性分析194例HBsAg阳性的孕妇及其新生儿的临床资料,并随机选取296例HBsAg阴性的孕妇及其新生儿作为对照组,分析这两组的妊娠并发症,围产儿结局及胎儿发育指标。结果：1. HBsAg阳性孕妇所生新生儿出生体重和胎盘体积较HBsAg阴性孕妇小。孕妇HBV感染状态与胎儿出生体重,身长及FGR发生率无明显关系;孕妇HBV-DNA阳性组的胎盘体积较阴性组小,ALT异常组的胎盘体积大于ALT正常组。2. 新生儿HBsAg阳性组的出生体重、身长,胎盘体积均较阴性组低,FGR发生率较阴性组高。3.新生儿HBeAg阳性组FGR发生率较阴性组高,胎盘体积较阴性组小。4.新生儿HBsAb阳性组胎盘体积较阴性组大。结论：乙型肝炎病毒感染可导致胎盘体积缩小,出生体重降低,新生儿HBsAb对胎盘有一定的保护作用。