HBV-经胎盘感染胎儿的机理研究

目的 研究HBV经胎盘感染胎儿机理。方法 应用PCR技术检测59例HBsAg( )孕妇血清、胎盘及新生儿脐血清中HBV DNA。采用免疫组化ABC染色法检测胎盘中HBsAg及HBcAg。结果 新生儿宫内感染率为45．8％(27／59)；胎盘HBV DNA( )者宫内感染率达78．8％(26／33)，均显著高于其HBV DNA(-)者。免疫组化染色HBsAg阳性率为81．4％(48／59)，HBcAg阳性率达61．6％(36／59)。HBsAg及HBcAg在胎盘中分布由蜕膜细胞、滋养层细胞、绒毛间质细胞，绒毛毛细血管内皮细胞依次递减，羊膜上皮细胞中可检出HBsAg及HBcAg。结论 HBV经胎盘感染胎儿机理可能是HBV经母血和／或细胞直接蔓延感染胎儿，或HBV经母血和／或细胞蔓延至羊膜，经羊水感染胎儿。     

胎盘HBV感染的危险因素及与TLR3的关系研究

目的 探讨HBsAg阳性孕妇胎盘乙型肝炎病毒（HBV）感染状况及其危险因素，了解TLR3在胎盘HBV感染中的作用。方法 采用ELISA检测孕妇血清HBsAg和HBeAg；荧光定量PCR定量检测孕妇血清HBV DNA；免疫组织化学SABC法检测胎盘组织中TLR3和瑚BsAg；非条件Logistic回归模型分析胎盘HBV感染的危险因素。结果 102例胎盘中有33例存在不同程度的HBV感染，且蜕膜细胞（Dc）、滋养层细胞（TC）、绒毛间质细胞（VMC）和绒毛毛细血管内皮细胞（VCEC）阳性率呈逐层下降趋势（趋势χ^2=16．67，P〈0．001），阳性率分别为32．4％（33／102），20．6％（21／102），18．6％（19／102）和8．8％（9／102）；胎盘HBV感染的危险因素为母亲血清HBV DNA阳性和胎盘TLR3阳性，OR值分别为6．865和0．103。结论 HBV可感染胎盘各层细胞，HBV经胎盘及胎儿的主要途径是经血和（或）细胞传递方式实现；母亲血清HBV DNA阳性是胎盘感染的危险因素，胎盘TLR3阳性是胎盘感染的保护因素。     

HBV-DNA的含量与宫内感染的关联性

目的：探讨孕妇血清中HBV—DNA含量与胎儿宫内感染及造成宫内感染的相关因素．方法：用ELISA方法筛选HBsAg阳性孕妇228例,并用定量PCR技术检测HBsAg阳性孕妇血清以及脐血中HBV—DNA．新生儿根据有无HBV感染分为胎儿感染组及非感染组（对照组）,调查宫内感染的相关因素,结果：HBsAg,HBeAg、抗HBc阳性孕妇的新生儿脐血HBV—DNA捡出率21％（14／68）;HBsAg．抗HBe,抗HBc阳性者为1．7％（2／117）;HBsAg和HBeAg双阳性者为20％（3／15）;HBsAg和抗HBc阳性者为11％（2／19）;HBsAg单一抗原阳性者脐血中未捡出HBV—DNA．胎儿总感染率为9,2％（21／228）．胎儿宫内感染率随孕妇血清中HBV—DNA含量增加而升高,宫内感染的危险性越大．胎儿感染组与非感染组在多种临床相关因素中先兆早产孕妇胎儿感染者多于非感染组（P〈0．05）．结论：孕妇不同的感染状态影响宫内HBV感染率,HBeAg与HBV—DNA高滴度是胎儿宫内感染的高危因素．孕妇出现先兆早产使胎儿的感染率增加．     

应用多聚酶反应技术检测HBV宫内感染

采用多聚酶反应技术对218例孕妇－引产胎儿进行HBV宫内感染的检测。结果表明,（1）HBsAg阳性孕妇HBV DNA宫内感染率为66．67％。说明HBV宫内感染率较高。（2）HBsAg阴性孕妇静脉血中6．2％检出HBV DNA,提示HBsAg阴性孕妇也可能发生HBV宫内感染,应引起人们的重视。（3）母血中HBsAg、HBeAg、抗－HBc同时阳性其相应胎儿HBV DNA感染率为92．5％。进一步说明了乙肝大三阳是HBV宫内感染的危险因素。     

乙型肝炎病毒宫内传播的危险因素

目的 研究乙型肝炎病毒宫内传播的危险因素。方法 对87例乙型表面 抗原阳必孕妇采集脐血行乙肝标志物、PCR－HBV－DNA检测,孕妇产后1－4d内取静脉血进行乙肝标记物检测。结果 脐血PCR－HBV－DNA阳性1例占1．2％（1／86）。母血HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb的宫内感染的危险度（OR)分别为0．697（0．586－0．786）、50．792（13．082－197．204）、0．103（0．032－0．338）、2．261（0．587－8．712）。母血HBeAg阳性（含HBcAb阳性）组的脐血HBsAg阳性百分数（31．0％）、HBeAg阳性百分数（72．4％）显高于HBsAg阳性组（分别3．92％,3．92％）。性别与是否宫内感染无显相关,母血HBeAg与脐血HBsAg阳性是胎儿宫内感染的危险因素;新生儿性别与宫内感染无关。     

孕妇及其新生儿乙肝病毒标志物与胎儿宫内感染的关系

目的 探讨乙型肝炎表面抗原（HBsAg）阳性孕妇及其新生儿乙肝标志物与胎儿宫内感染的关系,以对高危人群采取适当的预防措施,降低宫内感染的发生率。方法 对437例HBsAg阳性孕妇及其新生儿进行乙型肝炎病毒（HBV）DNA含量和HBV标志物的定量检测。结果 孕妇与其分娩新生儿HBV DNA含量比较差异有显著统计学意义（P〈0.001）;孕妇HBeAg滴度与其新生儿HBeAg滴度有一定的伴随关系（P〈0.01）。结论 对HBsAg及HBV DNA阳性的孕妇产前给予多次注射乙肝高效价免疫球蛋白,可以有效降低胎儿宫内HBV感染的发生率。     

孕母乙肝标志物及HBV—DNA含量与新生儿宫内感染关系的探讨

目的探讨HBsAg阳性孕妇血清乙肝标志物及HBV—DNA含量与其新生儿宫内感染的关系。方法选择HBsAg阳性的孕妇1237例,采用双抗体夹心酶联免疫吸附（ELISA）法检测其分娩前血清乙肝标志物含量,荧光定量聚合酶链反应法（PCR）定量检测HBV—DNA,并同时检测其新生儿血清乙肝标志物及HBV—DNA水平。结果（1）在1237名孕妇中,其新生儿发生宫内感染者39例,感染率为3．15％（39／1237）,其中PIBeAg阳性孕妇其新生儿宫内感染率为11．4％（37／324）,较HbeAg阴性孕妇的新生儿宫内感染率[0．2％（2／913）]明显升高,差异有统计学意义（P〈0．01）。血清HBV高复制状态（HBV—DNA≥10^6copy·ml^-1）的孕妇其新生儿宫内感染率为23．4％（33／141）,较血清HBV低复制状态（HBV—DNA〈10^6copy·ml^-1）孕妇的新生儿宫内感染率[1．9％（6／316）]明显升高,差异有统计学意义（P〈0．01）。（2）发生宫内感染的39例新生儿血清HBV—DNA水平显著低于其母血HBV—DNA水平,但两组数值之间无相关（r=-0．03,tr=0．18,P=0．86）。结论孕妇分娩前HBeAg阳性和HBV—DNA高滴度是发生新生儿HBV宫内感染的危险因素,但孕妇分娩前血清HBV—DNA滴度与新生儿血清HBV—DNA滴度之间无相关性。     

HBV宫内感染的危险因素及与HBV DNA的关系

目的 探讨乙型肝炎病毒（HBV）宫内感染的危险因素及HBV DNA含量对HBV宫内感染的影响。方法 分别用酶联免疫吸附法及荧光定量PCR法检测230例HBsAg阳性孕妇及其新生儿外周血HBV血清标志物和HBV DNA含量，发生宫内感染的为病例组，余为对照组，运用非条件Logistic回归模型对宫内感染的危险因素进行分析。结果 （1）230例HBsAg阳性孕妇分娩的新生儿中，有22例发生宫内感染。其中HBsAg阳性7例，HBV DNA阳性18例，HBsAg和HBV DNA均阳性的3例，总的HBV宫内感染率为9．6％（22／230）。（2）非条件Logistic多元回归分析表明，仅HBV DNA浓度分级有统计学意义，OR为1．57（1．12．2．21）。（3）230例HBsAg阳性孕妇中HBV DNA阳性者119例，发生宫内感染18例，感染率为15．1％（18／119），并且当孕妇血清HBV DNA浓度≥10^7copies／ml时，HBV宫内感染率显著增加，（χ^2=-7．92，P〈0．05）。结论 孕妇血清HBV DNA浓度分级是HBV宫内感染的危险因素，并且当HBV DNA浓度≥10^7copies／ml时，其宫内感染率显著增加。     

乙肝表面抗原阳性孕妇胎盘组织中bcl-2、bax和HBcAg的表达

目的 通过检测乙肝表面抗原（HBsAg）阳性孕妇胎盘组织细胞中bcl-2、bax基因及HBcAg的表达，探讨bcl-2、bax与HBcAg之间的关系。方法 46例HBsAg阳性孕妇足月产胎盘（排除其他疾病）为HBV组，25例HBsAg阴性（HBV-DNA阴性）足月产妇胎盘做为对照组。HBV组中根据HBcAg结果分为阳性组和阴性组。采用免疫组化法测定两组孕妇胎盘组织细胞中bcl-2、bax、HBcAg的表达。结果 （1）HBV组和对照组比较bcl02基因表达无统计学意义（P〉0．05），bax基斟表达阳性率明显高于对照组，两者比较有统计学意义（P〈0．05）；（2）胎盘组织细胞中HBcAg的表达：HBcAg阳性信号表达于胎盘各层细胞中，滋养层细胞感染率为41．3％，绒毛问质细胞感染率为15．2％，绒毛毛细血管内皮细胞感染率为6．5％；（3）HBcAg阳性组与HBcAg阴性组中bcl-2基因表达比较无统计学意义（P〉0．05），bax基因表达在HBcAg阳性组明显高于HBcAg阴性组，有统计学意义（P〈0．05）。结论 HBV感染孕妇胎盘组织中bax表达明显升高，提示bax可能参与了胎盘组织细胞凋亡的过程；HBsAg阳性孕妇胎盘中HBcAg可能是逐层感染胎盘各型细胞，且胎盘组织中HBcAg阳性者bax表达与HBcAg关系密切。     

HBsAg与HBeAg阴性孕妇乙肝垂直传播的临床观察

目的观察HBsAg与HBeAg阴性孕妇的新生儿乙型肝炎病毒（HBV）宫内感染状况。方法选择HBsAg和HBeAg阴性、其他HBV血清标志物阳性孕妇的新生儿作为观察组,同期HBV血清标志物全部阴性孕妇的新生儿作为对照组。采用套式PCR方法检测两组新生儿血清及外周血单个核细胞（PBMC）中的HBV—DNA。结果观察组32例新生儿中,血清HBV—DNA阳性4例,阳性率12．5％（4／32）,PBMC中HBV—DNA阳性8例,阳性率25％（8／32）,其中血清与PBMC均阳性1例,宫内感染率34．3％（11／32）。对照组21例新生儿血清HBV—DNA和PBMC中HBV—DNA均为阴性。结论HBsAg及HBeAg阴性而其他HBV血清标志物阳性的孕妇也可能发生HBV的垂直传播。     

乙肝病毒宫内传播与胎盘感染的关系

目的：母亲乙肝病毒（ＨＢＶ）感染在宫内即可造成其胎儿感染，但其机理尚不清楚，作者试图了解胎盘细胞中ＨＢＶ的感染情况，宫内传播的危险因素和母胎传播的可能途径。     

乙型肝炎病毒宫内感染的机制

目的 探索乙型肝炎病毒（HBV）宫内传播的机制和时间。方法 孕妇和新生儿血清HBsAg和HBVDNA检测采用ELISA和PCR法,引产胎儿肝组织和胎盘的HBsAg,HＢt HBVDNA检测采用ＡＢＣ免疫组化染色和原位杂交。结果 母亲外周血HBV高浓度（≥0.02ug.L^-1)、先光早产和胎盘毛毛细血管内皮细胞HBV感染导致宫内感染发生的危险性比值比（OR）分别为7.06,13.08和16.15,胎盘HBV感染从孕早期、孕中期至足月分娩愈来愈严重且广泛,在足月分娩胎盘中,从母面蜕膜细胞至胎儿面绒毛毛细血管内皮细胞HBV感染率呈逐渐下降趋势,但胎儿宫内感染的OR值却越来越大,1例孕19wk引产胎儿肝组织中检出HBVDNA和抗原。结论 胎儿宫内感染的发生可经2条途径,即血源性和细胞性,宫内感染可发生孕9wk前,但主要时期是在孕晚期。     

HBsAg阳性孕妇足月分娩胎盘HBV感染状态的免疫组织化学研究

目的：拟从观察胎盘乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染状态，探讨ＨＢＶ宫内传播发生的机制，以期为进一步预防ＨＢＶ宫内传播提供科学依据．方法：采用ＡＢＣ免疫组织化学染色检测ＨＢｓＡｇ阳性孕妇足月分娩胎盘ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ感染和分布状态．结果：在６２例足月分娩胎盘中，２１例检出了ＨＢｓＡｇ，８例检出ＨＢｃＡｇ．ＨＢｓＡｇ主要分布于蜕膜血管内皮细胞（１８例）、蜕膜细胞（２１例）、滋养层细胞（８例）、绒毛间质细胞（８例）和绒毛血管内皮细胞（５例）的胞浆和绒毛间隙（２１例）中．ＨＢｃＡｇ分布于蜕膜细胞（５例）、蜕膜血管内皮细胞（８例）和绒毛间质细胞（８例）的胞核内．结论：结果提示，ＨＢＶ可在胎盘组织中复制．ＨＢＶ经胎盘感染胎儿的主要途径可能是经血和（或）细胞传递方式实现的．即ＨＢＶ经蜕膜细胞和（或）绒毛间感染滋养层细胞，然后感染绒毛间质细胞，最终感染胎儿毛细血管内皮细胞     

乙型肝炎病毒宫内传播因素和机制的分子流行病学研究

目的应用分子流行病学方法研究乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）经胎盘引起宫内感染的危险因素与机制,方法 收集连续性入院的４０２例乙型肝炎表面抗原阳性孕妇及其新生儿作为研究对象,其中,发生宫内感染的１５例作为病例组,余为对照组,进行病例对照研究,同时分别检测１８２份与１８５份母血的ＨＢｓＡｇ滴度和ＨＢＶＤＮＡ浓度,筛选危险因素;另外收集胎盘标本进行免疫组化染色与原位杂交,确定ＨＢＶ感染状状;最后进行综合分析。结     

胎儿宫内感染乙型肝炎病毒的实验研究

目的探讨胎儿宫内乙型肝炎病毒(HBV DNA)感染的实验诊断方法及其临床意义.方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)对156例乙肝表面抗原(HBsAg)阳性孕妇的母血和产后婴儿脐血及婴儿外周血的乙型肝炎血清学标志物(HBV-M)和HBV DNA进行检测.结果156例HDsag阳性孕妇所生婴儿脐血和婴儿外周血HBsAg的检出率为8 3%(13/156)、6.4(10/156),HBeAg检出率分别为7.1%(11/156)、5.1%(8/156),母血、脐血、婴儿外周血HBV DNA阳性检出率分别为36.5%(57/156)、28.2%(44/156)、23.7%(37/156);57例HBV DNA阳性孕妇血病毒含量(拷贝数/ml的对数值)为7.34±2.28,37例阳性婴儿外周血HBV DNA含量为6.08±0.96;与婴儿外周血检测结果相比较,脐血中HBsag、HBeAg的阳性率不仅存在23.1%和37.5%的假阳性,HBV DNA也存在16.7%(7/42)的假阳性;在HBeAg或HBV DNA阳性孕妇中,婴儿外周血HBV DNA的检出率分别为73.8%(31/42)、64.9%(37/57),显著高于HBeAg或HBV DNA阴性者5.3%(6/114),(P＜0.01):婴儿外周血中HBV DNA阳性率随孕妇HBVDNA含量增加而显著增加(P＜0.005),其HBV DNA的含量与母血呈正相关,(r=0.39).结论婴儿脐血HBV检测是诊断胎儿宫内HBV感染的筛选指标,而婴儿外周血的检测才具有确诊意义;HBV DNA定量检测是胎儿宫内HBV感染和感染程度最为直接、敏感的诊断方法;孕妇HBeAg、HBV DNA阳性是胎儿宫内感染HBV的高危因素.     

HBV 宫内感染预测指标的探讨

 【目的】 探讨HBsAg阳性孕妇的新生儿乙肝联合免疫前的HBV-M和HBV DNA预测HBV宫内感染的实用价值&;#65377; 【方法】 对我院2006年6月至2008年2月间分娩的HBsAg阳性孕妇的420例婴儿,其中新生儿HBsAg或HBV DNA阳性为33例,HBsAg和HBV DNA双阳性共6例,对其满6月龄时进行随访,复查HBV-M以确诊HBV宫内感染&;#65377;【结果】 HBV宫内感染率为0.95%(4/420),新生儿HBsAg或HBV DNA阳性诊断HBV宫内感染的阳性似然比为14.3,而HBsAg和HBV DNA双阳性时诊断宫内感染的阳性似然比为208.3&;#65377; 【结论】 HBsAg阳性孕妇的新生儿乙肝联合免疫前的HBsAg和HBV DNA双阳性对HBV宫内感染具有较准确的预测作用,可以作为HBV宫内感染的初步临床诊断&;#65377;     

乙型肝炎病毒宫内感染及其相关因素的研究

追踪随访８１例乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）阳性母亲所生婴儿，乙肝病毒宫内感染率为１３．６％，对国产血源性疫苗阳性反应率为８６．４％，通过分析母血ＨＢＶ标志，发现；（１）母血中ＨＢｓＡｇ高滴度，ｅ抗原阳性是宫内感染的重要危险因素；（２）宫内感染与婴儿免疫无应答有关。     

HBsAg、抗-HBe和抗-HBc阳性孕妇胎盘及其子代HBV感染状况的研究

目的探讨HBsAg、抗-HBe和抗-HBc阳性孕妇胎盘及其子代HBV感染状况。方法选取220例HBsAg、抗-HBe和抗HBc阳性孕妇作为研究对象,研究组100例,在孕28、32、36周肌注HBIG200U;对照组120例,未予用药。采用荧光定量PCR及ELISA法,分别检测2组孕妇和新生儿出生后主被动免疫预防前以及1岁时的静脉血HBV DNA水平及乙肝标志物（HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc）。采用免疫组化SP法检测研究组和对照组各40例胎盘组织各层细胞HBsAg及HBcAg的表达。结果（1）研究组与对照组40例孕妇胎盘各层细胞HBV感染率比较差异均无显著性（P均〉0.05）。（2）研究组宫内感染率1%,对照组3.33%,2组比较差异无显著性（P〉0.05）;（3）研究组婴儿HBV慢性感染率为0,对照组0.83%,2组比较差异无显著性（P〉0.05）。结论（1）HBsAg、抗-HBe和抗HBc阳性孕妇胎盘有一定感染率,但子代宫内感染率以及出生后HBIG联合乙肝疫苗免疫后慢性感染率极低。（2）HBsAg、抗-HBe和抗HBc阳性孕妇产前注射HBIG并未明显降低子代HBV感染率。提示对HBsAg、抗-HBe和抗HBc阳性孕妇可以考虑不进行宫内阻断。