AT1受体胞外肽段AT12181主动免疫自发性高血压大鼠的肾脏保护作用

目的研究血管紧张素Ⅱ的受体1型(AT1)胞外的肽段ATR12181主动免疫自发性高血压大鼠(SHR)后是否对肾脏具有保护作用.方法根据大鼠AT1受体胞外肽段氨基酸序列设计合成多肽片段ATR12181,并作为抗原,主动免疫SHR和WISTAR大鼠,SHR用药组给予氯沙坦(10mg·kg-1·d-1)灌胃治疗,对照组皮下注射弗氏不完全佐剂,实验期间动态监测血清抗体滴度,用尾套法监测收缩压,以光镜和电镜观察肾脏的病理变化,并用RT-PCR方法半定量检测肾脏组织中AT1受体、C-fos、C-jun基因表达.结果ATR12181免疫SHR后产生高滴度的抗体,在免疫后第16周抗体滴度峰值达7100±280,并在免疫四周后开始降低血压,20周末收缩压为(145.42±8.46)mmHg,显著低于SHR对照组(197.00±7.70)mmHg,P＜0.05,与氯沙坦组无差异(139.28±17.19)mmHg,P＞0.05;WISTAR大鼠免疫组产生高滴度血清抗体,血压正常(116.57±5.50)mmHg.光镜下,AT12181免疫SHR组及氯沙坦治疗组肾小球大部分为轻度至中度硬化,少数肾小球形态正常,出入球小动脉管壁轻度至中度增厚;肾小管间质炎性细胞浸润显著减少;电镜下,在ATR12181免疫SHR组及氯沙坦治疗组中,肾小球血管袢排列轻度不规则,基底膜无明显增厚,少许足细胞肿胀,无明显的肾小管变性坏死;与SHR对照组相比,病理改变显著减轻;WISTAR大鼠免疫组与正常对照组相比无改变.并且ATR12181免疫SHR组肾脏AT1R、C-fos、C-jun基因表达水平下调,与氯沙坦治疗组无明显差异(P＞0.05),与SHR对照组相比,有显著性差异(P＜0.05).WISTAR大鼠免疫组与正常对照组相比无改变.结论用AT1胞外肽段ATR12181主动免疫SHR,可产生高滴度血清抗体,降低血压,延缓SHR肾脏病变进程,保护肾功能,其机制和效应与氯沙坦作用类似.正常大鼠免疫后可产生高滴度抗体,但血压和肾脏无异常改变.     

血管紧张素AT1受体短肽对自发性高血压大鼠血压、心脏及血管的影响

目的观察血管紧张素Ⅱ的Ⅰ型(AT1)受体细胞外的不同肽段对主动免疫自发性高血压大鼠(SHR)血压及靶器官的影响.方法4周龄SHR随机分成5组,每组7只.免疫组有3组,在SHR血压升高后,以合成的AT1受体细胞外的多肽片段ATR12185、ATR10014和ATR12181作为抗原,分别主动免疫,SHR用药组给予氯沙坦(10mg·kg-1·d-1)灌胃治疗,对照组饮水灌胃.同龄Wistar大鼠随机分成4组,每组7只,免疫干预组同SHR,对照组只用免疫佐剂.ELISA法检测免疫组动物的抗体滴度,用大鼠尾动脉血压计观察大鼠血压的变化.试验结束前,测定心脏及左心室重量、肠系膜三级动脉中层及内径,观察心肌及肠系膜三级动脉病理改变,以及心肌超微病理结构改变.结果SHR于6周龄血压开始升高;所有免疫组动物均产生了针对特定短肽的抗体.ATR12181免疫组SHR收缩压于免疫后一个月降低,并持续至实验结束[(145.42±8.46)mmHg,n=7],与SHR对照组[(197.0±7.7)mmHg,n=7,P＜0.05]相比,收缩压明显降低,与氯沙坦治疗组[(139.3±17.2)mmHg,n=7]相比,P＞0.05],而ATR12185免疫组[(183.42±19.26)mm Hg,n=7]和ATR10014免疫组(191.6±15.0)mm Hg,n=7]SHR收缩压无明显变化.Wistar大鼠免疫前后收缩压无明显变化,试验结束时,ATR12181收缩压[(116.6±5.5)mm Hg,n=7],ATR12185收缩压[(116.0±9.5)mm Hg,n=7],ATR10014收缩压[(121.57±4.79)mm Hg,n=7],与对照组[(113.14±9.52)mm Hg,n=7,P＞0.05]无差别.ATR12181免疫组SHR心脏/体重(4.66±0.50)mg/g以及左心室/体重(3.6±0.5)mg/g较SHR对照组心脏/体重(5.16±0.11)mg/g、左心室/体重(4.2±0.1)mg/g降低,P＜0.05,与氯沙坦心脏/体重(4.4±0.6)mg/g及左心室/体重(3.5±0.3)mg/g相比,无显著性差异,P＞0.05.同时肠系膜三级动脉中膜厚度/管腔半径及中膜面积/管腔面积降低.结论用ATR12181主动免疫SHR,可降低SHR血压,降低心脏重量,逆转心脏超微结构的损害,同时降低肠系膜三级动脉中膜厚度/管腔半径及中膜面积/管腔面积降低.     

主动免疫AT1受体对自发性高血压大鼠血管重构的影响

目的观察血管紧张素Ⅱ的Ⅰ型(AT1)受体细胞外不同肽段主动免疫自发性高血压大鼠(SHR)对血压及血管重构的影响.方法2月龄SHR在血压升高后,以合成的AT1受体细胞外的多肽片段ATR12185、ATR10014和ATR12181作为抗原,分别主动免疫,用药组给予氯沙坦(10 mg/(kg·d))灌胃.同龄Wistar大鼠免疫干预组同SHR,对照组只用免疫佐剂.ELISA法检测抗体滴度,大鼠尾动脉血压计测量血压.试验结束前,测定肠系膜三级动脉中层及内径,观察肠系膜动脉病理改变,以及胸主动脉超微病理结构改变.结果SHR于2月龄血压开始升高;所有免疫组动物均产生了针对特定短肽的抗体.ATR12181免疫组SHR收缩压于免疫后1月降低,并持续至实验结束[(145.4±8.5)mm Hg,n=7],与SHR对照组[(197.0±7.7)mm Hg,n=7,P＜0.05]相比,收缩压降低,与氯沙坦治疗组[(139.3±17.2)mm Hg,n=7,P＞0.05]相比,无显著性差异,而ATR12185和ATR10014免疫组SHR收缩压无明显变化.Wistar大鼠免疫前后收缩压无明显变化.ATR12181免疫组SHR肠系膜三级动脉中膜厚度/管腔半径(1.10±0.18)及中膜面积/管腔面积(3.21±0.98),分别较SHR对照组(1.39±0.21)及(4.62±1.21)降低.结论用ATR12181主动免疫SHR,可降低SHR血压,降低肠系膜三级动脉中膜厚度/管腔半径及中膜面积/管腔面积,逆转主动脉超微结构的损害.     

主动免疫AT1受体对自发性高血压大鼠血管重构的影响

目的观察血管紧张素Ⅱ的Ⅰ型(AT1)受体细胞外不同肽段主动免疫自发性高血压大鼠(SHR)对血压及血管重构的影响。方法2月龄SHR在血压升高后,以合成的AT1受体细胞外的多肽片段ATR12185、ATR10014和ATR12181作为抗原,分别主动免疫,用药组给予氯沙坦(10mg/(kg·d))灌胃。同龄Wistar大鼠免疫干预组同SHR,对照组只用免疫佐剂。ELISA法检测抗体滴度,大鼠尾动脉血压计测量血压。试验结束前,测定肠系膜三级动脉中层及内径,观察肠系膜动脉病理改变,以及胸主动脉超微病理结构改变。结果SHR于2月龄血压开始升高;所有免疫组动物均产生了针对特定短肽的抗体。ATR12181免疫组SHR收缩压于免疫后1月降低,并持续至实验结束[(145.4±8.5)mmHg,n=7],与SHR对照组[(197.0±7.7)mmHg,n=7,P<0.05]相比,收缩压降低,与氯沙坦治疗组[(139.3±17.2)mmHg,n=7,P>0.05]相比,无显著性差异,而ATR12185和ATR10014免疫组SHR收缩压无明显变化。Wistar大鼠免疫前后收缩压无明显变化。ATR12181免疫组SHR肠系膜三级动脉中膜厚度/管腔半径(1.10±0.18)及中膜面积/管腔面积(3.21±0.98),分别较SHR对照组(1.39±0.21)及(4.62±1.21)降低。结论用ATR12181主动免疫SHR,可降低SHR血压,降低肠系膜三级动脉中膜厚度/管腔半径及中膜面积/管腔面积,逆转主动脉超微结构的损害。     

福辛普利和氯沙坦对SHR血管紧张素Ⅱ受体1基因表达的影响

目的研究福辛普利和氯沙坦对自发性高血压大鼠(SHR)血管紧张素Ⅱ受体1(AT1-R)的基因表达水平及心血管细胞增殖的影响,探讨高血压病的病理机制.方法 48只10周龄SHR随机分3组,1组服福辛普利5 mg*kg-1*d-1;2组服氯沙坦20 mg*kg-1*d-1;3组(对照组) 服安慰剂.3组分别灌胃持续9 周,实验前及实验中每2周测尾动脉血压,9周后,抽血并处死动物取材,放免法测血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ),用半定量RT-PCR 测量心肌AT1-R的 mRNA水平,光、电镜观察心肌及主动脉组织学改变. 结果血压对照组随增龄上升,两治疗组实验第2周起各次均较治疗前低,差异多具显著性,实验第8周福辛普利组为(165.1±4.9)mmHg、氯沙坦组为(156.3±4.2)mmHg,均较对照组(179.1±10.4)mmHg低,差异显著,P<0.01.血浆Ang Ⅱ浓度对照组为(440.0±190.3)pg/mL,福辛普利组为(566.0±149.3)pg/mL和氯沙坦组(529.3±200.9)pg/mL均较对照组高,但均无显著性差异,P>0.05.心肌AT1-R的mRNA水平福辛普利组为(72.0±35.0)%,对照组为(102.4±21.9)%,显著高于前者,P<0.05;氯沙坦组为(101.9±27.3)%,与对照组差异无显著性,P>0.05,但较福辛普利组高,差异显著,P<0.05;AT1-R的mRNA水平与治疗后血压不相关,与对照组Ang Ⅱ浓度正相关,r=0.596,P<0.05,而与两治疗组无相关性;心血管病变光、电镜下两治疗组心血管细胞增殖明显减轻,氯沙坦组减轻更显著. 结论福辛普利可下调SHR心肌AT1-R基因表达水平,氯沙坦则对其无影响;福辛普利和氯沙坦均可抑制SHR心血管细胞增殖,但不伴有Ang Ⅱ浓度的显著性改变.     

辛伐他汀逆转左室肥厚的作用与抑癌基因PTEN表达的关系

目的观察辛伐他汀逆转自发性高血压大鼠(SHR)左心室肥厚(LVH)的作用及其与抑癌基因-第10号染色体缺失的张力蛋白同源区(PTEN)表达的关系.方法16只雄性8周龄SHR测量体重和收缩压后,随机分为SHR治疗组和SHR对照组,分别给予辛伐他汀和安慰剂灌胃治疗,性别、年龄、数量匹配的Wistar大鼠给予安慰剂治疗作为正常对照组,疗程10周,观察辛伐他汀对大鼠收缩压和左心室重量/体重比值(LVW/BW)的影响,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Westernblot)检测辛伐他汀对心肌组织PTEN表达的影响.结果(1)治疗前两组SHR收缩压无显著差异(P＞0.05),均高于Wistar正常对照组大鼠(P＜0.01);给予辛伐他汀后,SHR治疗组收缩压(217.3±8.5)mmHg较SHR对照组(220.8±9.9)mm Hg略有降低,但无统计学意义(P＞0.05),且两组SHR收缩压仍高于Wistar正常对照组大鼠(126.0±5.8)mm Hg,差异非常显著(P＜0.01).(2)SHR对照组大鼠的LVM/BW(4.10±0.13)mg/g明显高于Wistar正常对照组(3.04±0.12)mg/g,并有统计学意义(P＜0.01),而SHR辛伐他汀治疗组的LVM/BW(3.73±0.08)mg/g较SHR对照组明显下降(P＜0.01).(3)SHR对照组大鼠心肌组织PTEN的mRNA表达水平(0.36±0.04)低于Wistar正常对照组(0.87±0.05),差异非常显著(P＜0.01),SHR治疗组大鼠的PTEN mRNA表达水平(0.60±0.05)较SHR对照组显著升高,并有统计学意义(P＜0.01).(4)Wistar正常对照组、SHR对照组和SHR治疗组大鼠心肌组织PTEN蛋白表达水平分别为50.53±2.92、24.65±3.89和40.32±4.04,其中SHR对照组明显低于Wistar正常对照组(P＜0.01),SHR治疗组则较SHR对照组显著升高(P＜0.01).结论辛伐他汀能够逆转SHR的LVH,其机制可能与PTEN表达水平增加有关.     

依那普利对自发性高血压大鼠心脏局部血管紧张素Ⅱ浓度和左心室结构的影响

目的观察自发性高血压大鼠(SHR)心脏局部血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)浓度、左心室结构以及依那普利对其影响.方法12周龄SHR 40只,随机分为依那普利[30 mg/(kg·d)]治疗组(SHR-d组)和对照组(SHR组)两组,另设同周龄的正常血压大鼠20只(WKY组)作为对照,共观察12周.第1周和第12周测血压和体重,处死后分别测量左心室重量、左心室室壁厚度,放免法检定心肌AngⅡ浓度,应用病理学图像分析法对各组大鼠左室心肌细胞的长、短径、截面积和心肌胶原体积比例(CVF)、心肌血管周围胶原面积和管腔面积比例(PVCA)进行测量.结果1)SHR-d组血压、AngⅡ浓度显著低于SHR组而接近WKY组(P＜0.05).2)SHR-d组CVF(1.98%±1.57%vs 5.11%±2.25%)、PVCA(0.68%±0.19%vs 1.20%±0.19%)、LV/BW比值(3.14±0.31 vs4.09±0.21)mg/g,左心室室壁厚度(0.32±0.05 vs 0.43±0.03)cm均明显低于SHR组(P＜0.05).3)SHR-d组的心肌细胞长、短径和截面积数值均较SHR组下降,但未降到正常.结论应用依那普利能有效抑制SHR心脏局部AngⅡ生成,能部分逆转SHR的左室肥厚.     

依那普利或氯沙坦对SHR左室肥厚和心肌纤维化的影响

目的:观察自发性高血压大鼠(SHR)左室肥厚和心肌纤维化各指标的改变,以及依那普利和氯沙坦的保护作用.方法:雄性SHR(n=30)自第10周始服用依那普利(20mg@kg-1@d-1),或氯沙坦(25mg@kg-1@d-1),或二者合用(依那普利10mg@kg-1@d-1,氯沙坦12.5mg@kg-1@d-1)至第16周,并以年龄、性别、数量配对的未治疗SHR和Wistar-kyoto(WKY)大鼠作对照.测定收缩压(SBP)、左室重量(LVM)以及左室重量指数(LVMI)和左室心肌胶原含量;计算机图象分析心肌细胞大小、心肌胶原容积分数(CVF)和血管周围胶原面积(PVCA).结果:SHR的SBP、LVM、LVMI、心肌胶原含量、心肌细胞的横截面积、CVF和PVCA均显著高于WKY对照组(P＜0.001).SHR治疗组上述指标显著低于SHR未治疗组(P＜0.01),依那普利与氯沙坦之间无显著差别(P＜0.05).二者合用比单用依那普利或氯沙坦更有效(P＜0.05).结论:依那普利和氯沙坦可显著的降低血压、逆转SHR早期左室肥厚和心肌纤维化,而且二者合用在逆转左室肥厚和心肌纤维化方面效果更明显.     

福辛普利和氯沙坦对SHR血管紧张素Ⅱ受体1基因表达的影响

目的　研究福辛普利和氯沙坦对自发性高血压大鼠 (SHR)血管紧张素Ⅱ受体 1(AT1 R)的基因表达水平及心血管细胞增殖的影响 ,探讨高血压病的病理机制。方法　 48只 10周龄SHR随机分 3组 ,1组 :服福辛普利 5mg·kg-1·d-1;2组 :服氯沙坦 2 0mg·kg-1·d-1;3组 (对照组 ) :服安慰剂。 3组分别灌胃持续 9周 ,实验前及实验中每 2周测尾动脉血压 ,9周后 ,抽血并处死动物取材 ,放免法测血管紧张素Ⅱ (AngⅡ ) ,用半定量RT PCR测量心肌AT1 R的mRNA水平 ,光、电镜观察心肌及主动脉组织学改变。　结果　血压 :对照组随增龄上升 ,两治疗组实验第 2周起各次均较治疗前低 ,差异多具显著性 ,实验第 8周福辛普利组为 (16 5 .1± 4 9)mmHg、氯沙坦组为 (15 6 3± 4 2 )mmHg ,均较对照组 (179 1± 10 4 )mmHg低 ,差异显著 ,P <0 0 1。血浆AngⅡ浓度 :对照组为 (4 40 0± 190 3) pg/mL ,福辛普利组为 (5 6 6 0± 149 3) pg/mL和氯沙坦组 (5 2 9 3± 2 0 0 9)pg/mL均较对照组高 ,但均无显著性差异 ,P >0 0 5。心肌AT1 R的mRNA水平 :福辛普利组为 (72 0± 35 0 ) %,对照组为 (10 2 4± 2 1 9) %,显著高于前者 ,P <0 0 5 ;氯沙坦组为 (10 1 9± 2 7 3) %,与对照组差异无显著性 ,P >0 0 5 ,但较福辛普利组高 ,差异     

缬沙坦和螺内酯对自发性高血压大鼠心肌胰岛素样生长因子-1的影响

目的观察自发性高血压大鼠(SHR)和WKY大鼠心肌胰岛素样生长因子-1(IGF-1)及其受体(IGF-1R)的表达和缬沙坦与螺内酯对SHR的IGF-1的影响,探讨IGF-1与心肌肥厚的病理机制.方法将18只6周龄SHR随机分成3组,每组6只.其中2组分别灌喂缬沙坦30 mg/kg·d和螺内酯20 mg/kg·d,另一对照组给正常饮水,并与雄性同周龄WKY 6只比较.实验期14周,免疫组化法检测四组大鼠心肌IGF-1及IGF-1R的表达.结果两治疗组血压、LVM/BW均显著低于SHR组(P＜0.01).SHR对照组IGF-1和IGF-1R的表达明显高于WKY组(IGF-1180.4±12.3比97.6±10.1;IGF-1R203.3±14.4比92.4±10.3;P＜0.01),缬沙坦组和螺内酯组的IGF-1和IGF-1R均比SHR对照组下降(IGF-1122.2±14.8比139.8±7.9比180.4±12.3;IGF-1R130.9±11.7比149.9±8.9比203.3±14.4;P＜0.01).而且缬沙坦比螺内酯的作用更为明显(P＜0.05).结论IGF-1及IGF-1R在肥厚心肌中表达明显增加,而缬沙坦和螺内酯在降压的同时可以抑制IGF-1及IGF-1R的表达,结果提示IGF-1和IGf-1R在心肌肥厚发展中起一定作用.