肝癌经肝动脉栓塞化疗后VEGF和CD44v6表达的意义

目的:探讨VEGF和CD44v6在肝癌经肝动脉栓塞化疗(TACE)术后复发和转移中的作用.方法:选取经TACE治疗后二期切除的肝癌标本29例,以同期单纯手术切除的30例标本作为对照,采用免疫组织化学和图像分析的方法检测VEGF和CD44v6的表达.结果:TACE治疗组与单纯手术组的VEGF吸光度A值分别为0.149±0.021和0.134±0.018,前者明显高于后者(P<0.05);TACE治疗组与单纯手术组的CD44v6表达阳性率分别为82.8%和66.7%,阳性细胞数分别为112.4±22.3/视野和102.4±21.2/视野,两者间差异均无显著性(P>0.05).结论:VEGF可能参与了TACE术后肝癌的复发和转移,而CD44v6可能并不是TACE术后肝癌复发和转移的主要因素.     

肝细胞生长因子对肝癌细胞系SMMC-7721失巢凋亡的影响

目的:探讨HGF对SMMC-7721失巢凋亡的影响以及P13K在该过程中的作用.方法:悬浮培养SMMC-772l,建立失巢凋亡模型.应用TUNEL染色观察凋亡率.分别悬浮培养SMMC-7721、HGF处理后SMMC-721及LY294002预处理后的HGF处理细胞,用台盼蓝染色观察细胞失巢凋亡后存活率,用MTT检测细胞的增殖能力的变化,流式细胞仪检测失巢凋亡细胞的早、晚期凋亡率,Hoechst染色观察不同处理细胞的凋亡情况.应用免疫印迹技术检测失巢凋亡后Akt、p-Akt、FAK、p-FAK的表达.结果:TUNEL染色显示,悬浮培养的SMMC-7721失巢凋亡率远大于贴壁培养的SMMC-7721(21.72%±6.85% vs 66.67%±7.66%,P<0.05);台盼蓝染色显示,HGF处理后的SMMC-7721存活率明显高于悬浮培养细胞(P<0.05),而HGF不能提高经LY294002预处理后细胞的存活率:MTT实验显示HGF处理细胞A值明显大于悬浮培养细胞(P<0.05),LY294002预处理细胞与悬浮培养细胞相似.流式细胞仪和Hoechst 33258染色均显示HGF处理后细胞的失巢凋亡明显低于悬浮培养细胞(P<0.05),而经LY294002处理后细胞的失巢凋亡率明显升高.蛋白印迹结果显示HGF处理后细胞Akt、FAK、p-Akt、p-FAK的表达均升高,而经LY294002预处理后,其表达与悬浮培养SMMC-7721一致.结论:在肝细胞癌SMMC-7721失巢凋亡过程中,HGF通过活化Akt和FAK来增强细胞的抗失巢凋亡能力,该作用受P13K的调节.     

CD44 V6和VEGF在肝癌组织中的表达及其预后价值的研究

目的探讨CD44 V6和VEGF在肝细胞癌(HCC)中的表达及其在临床预后中的价值。方法对随访的40例原发性肝癌临床病理学资料进行回顾性分析分类,并按照1年内有无复发和转移分组,然后进行常规HE染色及CD44 V6、VEGF的免疫组化染色(S_P法)。结果结果CD44 V6和VEGF主要定位于癌细胞的胞膜,部分胞质同时出现阳性表达;在40例肝癌组织中,CD44 V6和VEGF的阳性表达率分别为75%(30/40)和77.5%(31/40);CD44 V6、VEGF在复发和转移组的表达均高达88.9%(16/18,16/18),明显高于未复发和转移组,和肿瘤侵袭转移的发生有相关性(P<0.05),癌组织中的表达均明显高于癌旁组织,而在肿瘤大小及组织学分级间未见明显差异。结论资料提示肝癌组织中CD44 V6和VEGF过表达分析,有助于肝癌侵袭、转移预测和肝癌预后判断。     

VEGF促进肝癌SMMC-7721细胞侵袭性的自分泌机制

目的:探讨促血管内皮生长因子(VEGF)对人肝癌细胞SMMC-7721侵袭力以及对该细胞中基质金属蛋白酶9(MMP-9)的影响,初步研究VEGF对肿瘤侵袭和转移的影响及可能的作用机制.方法:使用VEGF体外培养人肝癌SMMC-7721细胞,通过细胞体外侵袭实验检测细胞侵袭能力的改变,再分别使用30μg/L、10μg/LVEGF培养人肝癌SMMC-7721细胞,以正常培养人肝癌SMMC-7721细胞为空白对照组.使用半定量RT-PCR和Western blot法对3组细胞中MMP-9的mRNA和蛋白表达水平进行分析.结果:细胞体外侵袭实验显示,外加VEGF培养后,细胞侵袭力明显增强(P0.01);MMP-9mRNA和蛋白的表达在外加VEGF组中要明显高于空白对照组(0.479±0.025,0.665±0.024vs 0.315±0.022;0.521±0.026,0.662±0.026vs 0.366±0.025,均P<0.01),且高浓度和低浓度组之间也有明显差别.结论:肝癌SMMC-7721细胞系中存在有自分泌机制,VEGF可通过自分泌机制上调肝癌细胞的MMP-9表达,进而促进肿瘤的浸润转移.     

共轭三烯酸抑制肝癌细胞体外增殖和凋亡诱导的作用

目的: 探讨共轭三烯酸抑制肝癌细胞体外增殖的作用机制.方法:采用细胞增殖试验(MTT法)、克隆形成试验、Brdu掺入实验(20 g/L, 12 h)研究共轭三烯酸对人正常肝细胞L-02, 人肝癌细胞系SMMC-7721和鼠肝癌细胞系Hepa1-6的体外增殖抑制作用;Hoechst33342荧光染色, 流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布.结果: 共轭三烯酸处理后, 肿瘤细胞增殖活性降低(SMMC-7721: 1.5±2.6 vs 1.9±12.3, P<0.05;Hepa1-6: 1.0±1.5 vs 1.2±9.7, P<0.05), 克隆形成下降(SMMC-7721: 149.3±3.1 vs 191.7±5.8, P<0.05;Hepa1-6: 32.7±3.1 vs 61.3±4.2, P<0.05), Brdu标记指数降低(SMMC-7721: 42.3%±1.5% vs 63.6%±0.7%, P<0.05;Hepa1-6: 59.5%±0.7% vs 79.6%±1.6%, P<0.05), 凋亡细胞增多(SMMC-7721: 48.9%±0.7% vs 9.9%±0.4%, P<0.05;Hepa1-6: 65.1%±1.1% vs 15.9%±0.7%, P<0.05);凋亡指数升高(SMMC-7721: 16.3%±0.7% vs 3.3%±0.4%, P<0.05;Hepa1-6: 21.7%±1.1% vs 5.3%±0.4%, P<0.05), G0/G1期细胞数增加(SMMC-7721: 48.4%±1.8% vs 38.0%±2.1%, P<0.01;Hepa1-6: 53.4%±2.1% vs 41.1%±0.7%, P<0.01), S期细胞数减少(SMMC-7721: 32.2%±2.9% vs 37.2%±1.9%, P<0.05;Hepa1-6: 28.3%±0.9% vs 39.9%±0.9%, P<0.01).结论:共轭三烯酸对肿瘤细胞的增殖有显著抑制作用, 其作用机制可能为抑制肿瘤细胞DNA合成, 诱导肿瘤细胞凋亡及细胞周期阻滞.     

磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路对CD40介导胃癌细胞侵袭与转移的研究

目的 探讨可溶性CD40配体(sCD40L)联合磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(P13K/Akt)信号通路特异性阻断剂LY294002对胃癌AGS细胞体外增殖及侵袭、转移的影响;初步探讨其可能的作用机制.方法 将细胞分成对照组(仅加入含10%胎牛血清的RPMI 1640培养液)、LY294002组(20μmol/L)、sCD40L组(2μg/ml)和LY294002+sCD40L组.四甲基偶氮唑盐法检测不同浓度sCD401,及联合LY294002对细胞增殖的影响;Transwell实验和划痕实验分析细胞侵袭、转移能力的改变;Western印迹检测细胞P13K、p-Akt、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达的变化.结果 LY294002作用后细胞生存率为65.7%,sCD40L作用后为70.1%,LY294002+sCD40L组生存率为41.3 0A,差异有统计学意义(P<0.05).LY294002+sCD40L组细胞的划痕愈合速度较sCD40L和LY294002组明显减慢.LY294002+sCD40L组平均每个视野的细胞数较sCD40L和LY294002组明显减少.与对照组相比,sCD40L使P13K、p-Akt、VEGF蛋白表达升高,与LY294002联合作用后,P13K,p-Akt、VEGF蛋白表达明显降低.结论 阻断P13K/Akt信号途径可显著增强sCD40L对人胃癌AGS细胞增殖及侵袭、转移的抑制作用,为胃癌的生物治疗提供一种新的方法.     

姜黄素对缺氧条件下HepG2细胞VEGF表达的影响

目的:研究姜黄素对缺氧条件下人肝癌细胞HepG2中血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法:姜黄素(0、1、2、5、10.mol/L)处理缺氧条件下的HepG2细胞6 h后,采用四唑盐(MTT)法观察HepG2细胞活性的变化,Western blot观察VEGF的蛋白水平变化,RT-PCR检测VEGF mRNA表达水平变化.结果:HqaG2细胞经1、2、5、10 μmol/L的姜黄素处理后,VEGF蛋白和mRNA水平与对照组(0μmol/L姜黄素处理)比较明显降低(蛋白:2.12±0.23,1.59±0.13,0.82±0.11,0.33±0.05 vs 2.85±0.37,P<0.05或P<0.01:mRNA:0.60±0.05,0.54±0.04,0.16±0.02,0.06±0.01 vs 0.81±0.07,均P<0.01),且降低程度随着姜黄素处理浓度的增加而变大.结论:姜黄素可抑制HepG2细胞中VEGF的基因表达.     

LY294002对人肺腺癌A549细胞p-Akt、VEGF表达的影响

目的 探讨PI3K抑制剂LY294002对肺腺癌A549细胞p-Akt及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法 不同浓度LY294002(5μmol/L、10 μmol/L、20μmol/L、40 μnol/L)处理肺腺癌A549细胞24h后,分别用免疫细胞化学法和Western印迹法检测p-Akt、VEGF蛋白表达.结果 P13K抑制剂LY294002可抑制肺腺癌A549细胞株细胞中p-Akt蛋白的表达,而且其表达呈浓度依赖型降低(r=-0.913,P＜0.05).LY294002也可抑制该细胞株中VEGF蛋白的表达,其表达也呈浓度依赖型降低(r=-0.969,P＜0.01).结论 LY294002可抑制p-Akt活性及下调VEGF蛋白的表达,该作用可能是PI3K抑制剂LY294002发挥抗癌作用及抗血管生成的机制之一.     

p38MAPK信号传导通路调控VEGF诱导肝癌细胞黏附作用

目的:观察血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)通过p38信号传导通路诱导肝癌HepG2细胞转移及其对黏附作用的影响．方法:以p38MAPK信号通路特异性阻断剂SB203580预处理肝癌HepG2细胞,采用 3H-TdR掺入及鼠尾胶黏附实验测定不同浓度 VEGF对肝癌HepG2细胞同质性和异质性黏附作用,流式细胞术检测VEGF诱导肝癌细胞 CD44v6表达．结果:1 μg／L和5 μg／L VEGF诱导HepG2细胞60 min 3H-TdR掺入实验结果(dpm／min)分别为1 758．67±289．46、1 380．03±328．55; 90 min分别为3 124．30±2 262．14、2 245．60 ±273．24;10 μg／L VEGF诱导HepG2细胞60, 90,120 min 3H-TdR掺入实验分别为1 232．32 ±201．04、2 337．50±333．04、2 236.99± 237．07,显著低于对照组的2 184．49±336．03、 3 560．00±255．17、4 337．40±377．35(P<0．05 或0．01);经SB203580预处理的HepG2细胞,60, 90,120 min后的结果为2 634．23±375．21、 3 834．82±535．79、4 398．40±564．76,VEGF 诱导肝癌细胞同质性黏附作用降低．5 μg／L和 10 μg／L VEGF诱导HepG2细胞60 min鼠尾胶黏附实验吸光度A值为0．263±0．021、0．238 ±0．034,1,5和10 μg／L VEGF诱导HepG2细胞90 min A值分别为0．269±O．023、0．373± 0．083、0．393±0．081;120 min分别为0．371± 0．061、0．390±0．074、0．433±0．122,分别高于对照组的0．130±0．025、0．143±0．036、 0．210±0．028(P<0．05或0．01);经SB203580预处理的HepG2细胞,60,90,120 min鼠尾胶黏附实验吸光度A值分别为0．201±0．035、0．347± 0．112、0．479±0．217,VEGF诱导的肝癌细胞异质性黏附作用降低．5μg／L VEGF诱导肝癌细胞2 h后CD44v6表达阳性细胞数为32．6％± 4．2％,用SB203580阻断p384信号传导通路后, CD44v6阳性细胞数(4．3％±0．54％)显著下降 (P<0．01)．结论:VEGF可以通过p384信号传导通路增加肝癌细胞异质性黏附作用以及降低肝癌细胞的同质性黏附作用,促进肝癌HepG2细胞侵袭与转移．     

姜黄素调节miR-133a表达对肝癌细胞迁移和侵袭的影响

背景姜黄素对包括肝癌在内的多种肿瘤的发生发展表现出较好的抑制作用,但其抗肝癌的作用机制尚不完全清晰.有研究发现,姜黄素可通过调控miR-133a表达抑制胃癌细胞增殖和转移; miR-133a在肝癌中低表达的结果已有数据证实,但姜黄素是否介导miR-133a表达发挥抗肝癌的作用并不清楚.目的探讨姜黄素调节miR-133a表达对肝癌细胞迁移和侵袭的影响.方法以姜黄素(0、10、20μmol/L)处理肝癌SMMC-7721细胞48 h后, MTT法检测细胞活力, Transwell小室检测细胞的迁移和侵袭; RT-PCR检测细胞中miR-133a表达.采用RT-PCR检测正常肝LO2细胞和肝癌SMMC-7721细胞中miR-133a表达;将miR-133a模拟物转染至SMMC-7721细胞后, Transwell小室检测miR-133a对姜黄素作用前后细胞迁移和侵袭的影响.结果姜黄素能够有效抑制SMMC-7721细胞活力(10μmol/L姜黄素存活率:0.71±0.07 vs 1.02±0.09; 20μmol/L姜黄素存活率:0.45±0.05 vs 1.02±0.09)、迁移(52.32±5.48 vs121.43±12.35)和侵袭(46.33±5.38 vs109.25±10.75),上调miR-133a表达(10μmol/L姜黄素:1.62±0.11 vs 1.00±0.09; 20μmol/L姜黄素:2.96±0.25vs1.00±0.09);与LO2细胞相比,SMCC-7721细胞中miR-133a的表达水平明显降低(0.32±0.03 vs1.03±0.08);上调miR-133a表达后,SMCC-7721细胞的迁移(32.84±3.95 vs 96.35±9.08)和侵袭(42.75±5.06vs119.32±11.71)能力均明显减弱,同时姜黄素对SMCC-7721细胞迁移(29.6±3.32 vs134.62±13.41)和侵袭(31.86±4.05 vs 129.73±12.74)的抑制作用增强.结论姜黄素可通过上调miR-133a表达抑制肝癌细胞的迁移和侵袭.     

高血压降压治疗目标的再认识

根据传统的高血压水平的定义,1993年WHO高血压治疗指南提出血压控制目标为<140/90mm Hg(1mm Hg=0.133kPa),但是并非所有患者都必须将血压降至同一水平,而应根据患者情况进行个体化治疗。Framingham进行的一项长达10～12年的心血管事件研究发现,第5年后,正常上限血压[收缩压(SBP     

State of knowledge of helminth fauna of freshwater fishes of Poland

A total 89 fish and lamprey species has been recorded from Polish freshwater habitats. Twenty-seven of them (30.3%) have not been surveyed for parasitic helminthes. Some of the latter fishes are either rare or not easily accessible. Other live only in specific habitats in scattered localities. An important obstacle for studying parasite faunas of some fishes may be their status on an endangered species. Among the non-surveyed fishes, are those which have been relatively recently introduced to Poland or migrated there on their own. The present paper attempts to review all hitherto not studied helminthologically fish species, their habitats, localities and current protection status.     

Evaluation of criterion validity of CHF-quality of life scale of integrative medicine

正Objective To evaluate the criterion validity of Chronic Heart Failure(CHF)-Quality of Life(QOL)Scale of Integrative Medicine(abbreviated as Scale).Methods Clinical data of 249 CHF in-patients were collected.