shRNA干扰SMYD3对肝癌细胞c-Myc表达及凋亡的影响

目的:观察SMYD3(SET and MYND-domain containing 3)基因沉默后c-Myc的表达及对HepG2细胞凋亡的影响.方法:构建针对SMYD3的shRNA干扰质粒Pgenesil-1-s1、Pgenesil-1-s2和阴性对照质粒Pgenesil-1-hk,同时设空白对照组,采用Lipofectamine2000脂质体介导转染法转染质粒.转染后24、48、72 h,RT-PCR检测HepG2细胞SMYD3和c-Myc的表达情况.流式细胞术法检测各组细胞的凋亡.结果:SMYD3、c-Myc基因在HepG2细胞中强表达.RT-PCR显示Pgenesil-1-s1、Pgenesil-1-s2转染组与阴性对照质粒转染组Pgenesil-1-hk转染24、48、72 h后相比,SMYD3基因表达均明显受到抑制 (F=67.46,P<0.01:F=176.79,P<0.01;F=175.28,P<0.01),同时c-Myc表达下调(三组之间:F=11.58,P=0.009; F=126.41,P<0.01;F=261.25,P<0.01).Pgenesil-1-s1、Pgenesil-1-s2转染组细胞早期凋亡率与Pgenesil-1-hk转染组 (LSD-t=-13.58,-12.62,均P<0.01)、空白组(LSD-t=-18.62,-17.67,均P<0.01)相比有显著性差异.结论:RNA干扰技术特异性沉默HepG2细胞SMYD3基因后,抑制了c-Myc的表达,促进了HepG2细胞的凋亡.     

短发夹状RNA抑制RhoA基因在HepG2细胞中的表达

目的构建针对人RhoA基因的短发夹状双链RNA(shRNA)真核表达载体,观察其对人肝癌细胞株HepG2 RhoA表达的特异性抑制效应。方法设计合成针对RhoA mRNA编码序列两个不同靶点的核苷酸片断,并定向克隆到真核表达载体Pgenesil-2的U6启动子下,构建重组质粒phsRNA-RhoA1和pshRNA-RhoA2,不针对任何基因组序列的重组质粒pshRNA-HK作为阴性对照。脂质体法转染到HepG2细胞后,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western-blot)分别检测RhoA基因表达的抑制效应。结果酶切鉴定和测序结果证实重组质粒均构建成功。转染HepG2后,pshRNA-RhoA2组RhoA基因mRNA和蛋白的表达水平均显著降低,与pshRNA-HK组和空白细胞组相比,差异有统计学意义(r=-19.28,t=-7.08,P<0.05)。而pshRNA-RhoA1组抑制效应不明显,差异无统计学意义(r=-0.16,t=-0.30,P>0.05)。结论构建的重组质粒pshRNA-RhoA2能特异有效地抑制RhoA基因在肝癌细胞HepG2中的表达,为进一步研究RhoA基因在肝癌中的作用提供了有效的分子工具。     

乙型肝炎病毒X蛋白上调HepG2细胞中SMYD3的表达

目的 探讨HBV是否通过调控组蛋白甲基化酶SMYD3的表达参与肝癌细胞的恶性生物学行为.方法 通过向肝癌细胞HepG2转染HBx筛选出表达HBx蛋白的细胞株HepG2-HBx.用激光共聚焦定位细胞内HBx蛋白和SMYD3蛋白的表达;实时逆转录PCR、Western blot检测转染HBx前后HepG2细胞中SMYD3 mRNA和蛋白质的表达水平;流式细胞仪检测转染HBx前后HepG2细胞增殖、凋亡的变化情况.对数据进行单因素方差分析. 结果 HBx转染后HepG2细胞中SMYD3 mRNA和蛋白质表达水平明显上调(SMYD3 mRNA:0.18±0.05与0.98±0.15,F=37.240,P<0.05;SMYD3蛋白:0.28±0.03与0.58±0.06,F=21.042,P<0.05).转染HBx后HepG2细胞凋亡率下降(7.90%±0.42%与2.23%±0.14%,P<0.01),细胞增殖能力增强(28.46%±4.33%与36.46%±0.17%,P<0.01).结论 乙型肝炎病毒X蛋白能够上调HepG2细胞中SMYD3 mRNA和蛋白质表达水平;HBx可能通过SMYD3-组蛋白甲基化途径抑制HepG2细胞凋亡、促进细胞增殖.     

人Notch1受体胞内段重组腺病毒构建及转染

目的构建人Notch1受体胞内段重组腺病毒并转染人肝癌细胞株HepG2,为Notch信号对肝癌侵袭转移的影响研究奠定实验基础。方法构建Notch1受体胞内段(notch intracellular domain,NICD)基因的重组质粒pDC316-CMV-EGFP-CMV-Notch1-Myc,采用AdMax腺病毒包装系统将重组质粒与骨架质粒pBHGlox_E1,3Cre共转染293细胞,同源重组产生重组腺病毒Ad-EGFP-NICD-Myc,RTPCR鉴定重组腺病毒EGFP及NICD基因表达。重组腺病毒转染人肝癌细胞株HepG2,荧光显微镜观察EGFP及NICD蛋白的表达。结果重组腺病毒Ad-EGFP-NICD-Myc经鉴定基因表达正确,此病毒转染人肝癌细胞株HepG2后阳性表达EGFP及NICD蛋白。结论人Notch1受体胞内段重组腺病毒成功构建,为进一步Notch信号对肝癌侵袭转移的影响研究奠定了实验基础。     

人ZEB1基因真核表达载体的构建及其对肝癌细胞株HepG2增殖凋亡的影响

目的：探讨ZEB1基因与肝癌的关系,进一步揭示ZEBl基因在肝癌发生发展过程中的作用。方法：利用基因重组技术构建pCI-neo-ZEB1真核表达载体：脂质体介导转染技术转染肝癌细胞系HepG2。采用WesternBlot技术检测重组质粒的转染效率,CCK8比色法测定重组质粒转染对HepG2细胞体外增殖能力的影响,流式细胞术检测重组质粒转染后HepG2细胞凋亡率。结果：重组质粒经Nhel和Xbal双酶切、测序与ZEBl基因序列一致;利用脂质体介导将pCI-neo-ZEB1重组质粒转染HepG2细胞株,经WesternBlot技术检测ZEB1基因在蛋白水平稳定高表达;与对照组比较,人HepG2细胞株转染pCI-neo-ZEB1真核表达载体后细胞增殖能力增强,细胞凋亡率明显降低。结论：成功构建重组质粒Pci-neo-ZEB1并转入肝癌细胞株HepG2后,细胞增殖能力增强,凋亡减少。     

携带融合基因穿梭质粒的构建及在人肝癌细胞中的表达

构建携带胸苷激酶(tk)与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合基因穿梭质粒,并观察其在肝癌细胞系HepG2细胞中的表达。应用基因重组技术,构建EGFP与tk的融合表达穿梭质粒载体,经限制酶切鉴定和测序分析,脂质体转染将其导入HepG2中,48h后用荧光显微镜观察荧光的表达,RT-PCR法检测融合蛋白tk和EGFP的mRNA表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验检测转染融合蛋白载体后不同浓度的更昔洛韦(GCV)对HepG2细胞的细胞毒作用。酶切鉴定和测序分析证实重组质粒中插入融合目的基因片断及载体DNA大小、方向和插入位点正确,在转染此穿梭质粒的HepG2细胞中检测到绿色荧光蛋白的表达,RT-PCR检测到融合蛋白tk和EGFP的mRNA表达;GCV对转染了携带tk与EGFP融合基因穿梭质粒载体有明显的细胞毒作用。成功构建携带tk与EGFP融合基因穿梭质粒载体,转染人肝癌细胞株HepG2中tk和EGFP的独立表达没有受到影响,该载体可利用绿色荧光蛋白作为报告基因监测tk的表达并可用于肝癌的自杀基因治疗。     

pEGFP-prohibitin真核表达重组质粒的构建及其在人肝癌细胞系HepG2中的表达

目的构建pEGFP-prohibitin真核表达质粒,并鉴定其在pEGFP-prohibitin转染的人肝癌细胞系HepG2中的表达。方法采用高保真PCR扩增获得prohibitin的全长编码序列,构建真核表达载体pEGFP-prohibitin,并通过基因测序和BLAST比对鉴定重组质粒;提取pEGFP-prohibitin和pEGFP-N1质粒,并通过TurboFect转染试剂转染HepG2细胞;采用实时PCR和Western印迹方法分别在mRNA水平和蛋白质水平检测prohibitin蛋白在转染后HepG2细胞中的表达。结果成功构建pEGFP-prohibitin真核表达重组质粒,并将其成功转染HepG2细胞;pEGFP-prohibitin转染组细胞prohibitin的表达量比空载转染组和未转染组细胞明显增加。结论成功构建真核表达载体pEGFP-prohibitin,并证明抗增殖蛋白prohibitin在pEGFP-prohibitin转染人肝癌细胞系HepG2中高表达。     

siRNA对脂多糖诱导下HepG2细胞caspase-8基因的干扰及对凋亡的影响

目的:研究针对人caspase-8基因mRNA的siRNA(small interfering RNA)表达载体,观察其转染人肝癌细胞HepG2后,细胞caspase-8基因表达的变化,及其对细胞凋亡的影响。方法:采用针对人caspase-8基因mRNA的siRNA表达质粒,由脂质体介导瞬时转染HepG2细胞株,并采用脂多糖(LPS)诱导HepG2细胞凋亡,RT-PCR、Westernblot测定caspase-8表达。结果:针对人caspase-8基因mRNA的siRNA表达质粒能抑制caspase-8mRNA和蛋白表达;转染后HepG2细胞体外生长明显受到抑制。结论:siRNA表达质粒能有效地抑制HepG2细胞中caspase-8的表达,抑制细胞凋亡并促进生长。为进一步探究肝衰竭基因治疗提供了实验依据。     

Survivin启动子驱动Trail诱导肝癌细胞凋亡的实验研究

目的了解Survivin启动子在HepG2肝癌细胞与3T3细胞中诱导Trail蛋白表达能力的差异,并评价其驱动Trail诱导肝癌细胞凋亡的能力。方法以pGL3-surp340质粒为模板,扩增Survivin340启动子,构建重组质粒pcDNA3.1/SurP/Trail。将重组质粒分别转染HepG2肝癌细胞和3T3细胞,通过Western Blot检测两种细胞中Trail蛋白表达的差异。利用流式细胞术检测HepG2肝癌细胞及3T3细胞转染重组质粒pcDNA3.1/SurP/Trail后细胞凋亡的情况。结果成功构建了重组质粒pcDNA3.1/SurP/Trail,转染HepG2和3T3两种细胞后,通过Western Blot检测,HepG2肝癌细胞Trail蛋白表达的相对灰度值为0.49±0.43,较3T3细胞Trail蛋白表达(0.15±0.37)明显增强(P0.05)。利用流式细胞术检测,HepG2肝癌细胞转染重组质粒组的凋亡率(%)为11.59±0.74,空白质粒组为3.45±0.52,未转染组为2.67±0.34;3T3细胞重组质粒组的凋亡率(%)为3.26±0.24,空白质粒组3.16±0.15,未转染组2.83±0.27。HepG2细胞转染重组质粒组凋亡率明显高于其他对照组(P0.05)。结论含Survivin基因启动子的重组质粒pcDNA3.1/SurP/Trail在肿瘤细胞中能增强Trail蛋白的表达,并能诱导HepG2肝癌细胞凋亡。     

组蛋白甲基转移酶SMYD3在不同HBV表达水平肝癌细胞中的差异表达

目的:探讨HBV组蛋白甲基转移酶SMYD3在肝癌细胞中的表达与HBV感染状态相关性.方法:选取HBV阴性和HBV阳性的肝癌细胞株HepG2、HepG2.2.15,利用实时逆转录聚合酶链反应(real time RT-PCR)方法检测 SMYD3mRNA表达水平,Western blot检测细胞中SMYD3蛋白表达差异.结果:SMYD3 mRNA及蛋白在HepG2.2.15的表达水平显著高于HepG2(0.92±0.12 vs 0.18±0.05,0.28±0.03 VS 0.54±0.05,均P<0.01),有统计学差异.结论:HBV可能通过上调SMYD3途径促进肝癌的恶性生物学行为.     

Silencing SMYD3 in hepatoma demethylates RIZI promoter induces apoptosis and inhibits cell proliferation and migration

AIM： To investigate the role of SMYD3 in hepatocellular carcinoma （HCC） development and progression and to verify whether its regulation activity was through RIZ1 inactivation. METHODS： Expression of SMYD3 in HCC cell lines and tissues were measured; silencing of SMYD3 by RNA interference （RNAi） was effectuated, hepatoma cell proliferation, migration and apoptosis were tested, with RIZl CpG promoter methylation, and corresponding mRNA expression were investigated. RESULTS： SMYD3 over-expression in HCC was associated with RIZl hypermethylation and mRNA down-expression. Suppression of SMYD3 expression de- methylated RIZl CpG promoter （P 〈 0.01） and increased RIZl mRNA expression （P 〈 0.01）. Consequently, SMYD3 down-expression with RIZl de-methylation strongly inhibited hepatoma cell growth （MTT inhibitory rates： Pgenesil-1-s1 60.95%± 7.97%, Pgenesil-1-s2 72.14% ± 9.68% vs Pgenesil-1-hk 6.89% ± 4.12%, P 〈 0.01） and migration （Pgenesil-1-s1 4.24% ± 1.58%, Pgenesil- 1-s1 4.87% ± 0.73% vs Pgenesil-1 19.03% ± 4.63%, Pgenesil-1-hk 19.95% ±5.21%, P 〈 0.01） and induced apoptosis （FCM subG1 phase Pgenesil-1-s1 19.07% ＋ 1.78%, Pgenesil-1-s2 17.68% ± 2.36% vs Pgenesil-1 0.47% ± 0.12%, Pgenesil-1-hk 1.46% ± 0.28%, P 〈 0.01. TUNEL-positive cells： Pgenesil-1-s1 40.24%± 5.18%, Pgenesil-1-s2 38.48% ± 4.65% vs Pgenesil-1 2.1B% - 1.34%, Pgenesil-1-hk 2.84%± 1.22%, P 〈 0.01） in HepG2 cells. CONCLUSION： These results demonstrate that SMYD3plays a critical role in the carcinogenesis and progression of HCC, The proliferation, migration induction and apoptosis inhibition activities of SMYD3 may be mediated through RIZl CpG promoter hypermethylation.     

Silencing SMYD3 in hepatoma demethylates RIZI promoter induces appoptosis and inhibits cell proliferation and migration

AIM: To investigate the role of SMYD3 in hepatocellular carcinoma (HCC) development and progression and to verify whether its regulation activity was through RIZ1 inactivation.METHODS: Expression of SMYD3 in HCC cell lines and tissues were measured; silencing of SMYD3 by RNA interference (RNAi) was effectuated, hepatoma cell proliferation, migration and apoptosis were tested, with RIZ1 CpG promoter methylation, and corresponding mRNA expression were investigated.RESULTS: SMYD3 over-expression in HCC was associated with RIZ1 hypermethylation and mRNA down-expression. Suppression of SMYD3 expression demethylated RIZ1 CpG promoter (P ＜ 0.01) and increased RIZ1 mRNA expression (P ＜ 0.01). Consequently, SMYD3down-expression with RIZ1 de-methylation strongly inhibited hepatoma cell growth (MTT inhibitory rates:Pgenesil-1-s1 60.95% ± 7.97%, Pgenesil-1-s2 72.14%± 9.68% vs Pgenesil-1-hk 6.89% ± 4.12%, P ＜ 0.01)and migration (Pgenesil-1-s1 4.24% ± 1.58%, Pgenesil-1-s1 4.87% ± 0.73% vs Pgenesil-1 19.03% ± 4.63%,Pgenesil-1-hk 19.95% ± 5.21%, P ＜ 0.01) and induced apoptosis (FCM subG1 phase Pgenesil-1-s1 19.07% ±1.78%, Pgenesil-1-s2 17.68% ± 2.36% vs Pgenesil-1 0.47% ± 0.12%, Pgenesil-1-hk 1.46% ± 0.28%,P ＜ 0.01. TUNEL-positive cells: Pgenesil-1-s1 40.24%± 5.18%, Pgenesil-1-s2 38.48% ± 4.65% vs Pgenesil-1 2.18% ± 1.34%, Pgenesil-1-hk 2.84% ± 1.22%,P ＜ 0.01) in HepG2 cells.CONCLUSION: These results demonstrate that SMYD3plays a critical role in the carcinogenesis and progression of HCC. The proliferation, migration induction and apoptosis inhibition activities of SMYD3 may be mediated through RZ1 CpG promoter hypermethylation.     

Silencing SMYD3 in hepatoma demethylates RIZI promoter induces apoptosis and inhibits cell proliferation and migration

AIM: To investigate the role of SMYD3 in hepatocellular carcinoma (HCC) development and progression and to verify whether its regulation activity was through RIZ1 inactivation. METHODS: Expression of SMYD3 in HCC cell lines and tissues were measured; silencing of SMYD3 by RNA interference (RNAi) was effectuated, hepatoma cell proliferation, migration and apoptosis were tested, with RIZ1 CpG promoter methylation, and corresponding mRNA expression were investigated. RESULTS: SMYD3 over-expression in HCC was associated with RIZ1 hypermethylation and mRNA down-expression. Suppression of SMYD3 expression de-methylated RIZ1 CpG promoter (P < 0.01) and increased RIZ1 mRNA expression (P < 0.01). Consequently, SMYD3 down-expression with RIZ1 de-methylation strongly inhibited hepatoma cell growth (MTT inhibitory rates: Pgenesil-1-s1 60.95% ± 7.97%, Pgenesil-1-s2 72.14% ± 9.68% vs Pgenesil-1-hk 6.89% ± 4.12%, P < 0.01) and migration (Pgenesil-1-s1 4.24% ± 1.58%, Pgenesil-1-s1 4.87% ± 0.73% vs Pgenesil-1 19.03% ± 4.63%, Pgenesil-1-hk 19.95% ± 5.21%, P < 0.01) and induced apoptosis (FCM subG1 phase Pgenesil-1-s1 19.07% ± 1.78%, Pgenesil-1-s2 17.68% ± 2.36% vs Pgenesil-1 0.47% ± 0.12%, Pgenesil-1-hk 1.46% ± 0.28%, P < 0.01. TUNEL-positive cells: Pgenesil-1-s1 40.24% ± 5.18%, Pgenesil-1-s2 38.48% ± 4.65% vs Pgenesil-1 2.18% ± 1.34%, Pgenesil-1-hk 2.84% ± 1.22%, P < 0.01) in HepG2 cells. CONCLUSION: These results demonstrate that SMYD3 plays a critical role in the carcinogenesis and progression of HCC. The proliferation, migration induction and apoptosis inhibition activities of SMYD3 may be mediated through RIZ1 CpG promoter hypermethylation.     

shRNA沉默Kir6.2基因表达载体的构建及其对HepG2细胞增殖和侵袭的影响

目的 构建shRNA体内表达载体pGenesil-3-shRNA,研究抑制Kir6.2基因表达对HepG2细胞增殖和侵袭的影响. 方法 以Kir6.2基因为目的 基因,以产生shRNA质粒载体pGenesil-3为表达模板,细胞内转录合成2条shRNA.重组质粒经BamH Ⅰ和Hind Ⅲ酶切鉴定和测序后,使用Lipofectamine 2000转染HepG2细胞.实验分为SK组(未转染)、SK-HK组(阴性对照),SK-K1(转染干扰序列1)组和SK-K2(转染干扰序列2)组.G418筛选出荧光单克隆进行培养.Westernblot检测Kir6.2蛋白在各组细胞中的表达.MTT法和Transwell系统分别检测各组细胞的增殖和侵袭能力. 结果 经酶切、测序鉴定,重组质粒符合设计要求.Western blot检测结果显示SK组,SK-HK组、SK-K1组和SK-K2组Kir6.2蛋白质相对表达量分别为0.9349±0.0443,0.9098±0.0195,0.2869±0.0295,0.3256±0.0341;和对照组相比,实验组Kir6.2蛋白减少.MTT法检测SK组、SK-HK组、SK-K1组、SK-K2组细胞的增殖分数分别为0.7523±0.0681,0.7351±0.0589,0.2494±0.0485,0.2261±0.0298,F=0.2401,P=0.000.Transwell实验结果显示,SK组、SK-HK组,SK-K1组、SK-K2组细胞的穿膜数分别为47.0±7.1,40.7±8.0,14.3±5.1,15.0±3.7,F=-30.74,P=0.000.和对照组相比,实验组HepG2细胞增殖和侵袭能力均明显降低.结论 抑制HepG2细胞Kir6.2基因的表达可降低HepG2细胞的增殖和侵袭能力.     

LXRα-shRNA真核表达质粒的构建及抑制LXRα表达的有效序列筛选

目的构建和筛选对肝X受体α(LXRα)mRNA和蛋白有抑制作用的LXRα质粒。方法从NCBI网站获得人的LXRαcDNA序列,根据RNA干扰设计原则,设计三条理论上最佳的siRNA序列,相应的双链DNA插入pGenesil-1.1载体中,经酶切和测序鉴定符合设计要求后,用转染试剂PolyJetTM将三条质粒转染至HepG2.2.15细胞中并观察转染效果。然后用RT-PCR和Western印迹方法分析各组LXRα的表达,筛选出干扰效率最佳的质粒。结果三个质粒经测序分析与设计的序列完全一致,酶切凝胶电泳证实质粒构建成功。三个质粒均能抑制LXRαmRNA和蛋白的表达,与shRNA-LXRα2和shRNA-LXRα3质粒比较shRNA-LXRα1质粒表达更低。结论成功构建了LXRαRNAi表达载体,且三条质粒均能高效抑制转染细胞中LXRα的表达,其中第一条质粒shRNA-LXRα1干扰效率最好,从而为脂肪肝的治疗提供了新的方法和材料。     

靶向XIAP的shRNA重组质粒的构建

目的:设计以X染色体连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)为靶向的shRNA,构建携带此shRNA的重组质粒,检测其抑制XIAP表达的效应,筛选RNA干扰作用最强的shRNA片段.方法:设计4对针对XIAP基因不同位点的shRNA片段,构建携带此shRNA片段的真核表达载体psiRNA-Hhneo-XIAP,通过脂质体介导的方法将重组质粒转染到肝癌细胞株HepG2细胞中.采用逆转录酶链式反应(RT-PCR)及蛋白印迹(Western blotting)方法检测XIAP的mRNA及蛋白表达情况,比较转染前后其表达差异,以判断各shRNA的干扰效应.结果:成功构建含shRNA片段的重组质粒.经质粒测序证实,插入的DNA片段的序列与设计序列完全一致.重组质粒转染HepG2细胞后,XIAP基因的mRNA水平及蛋白表达水平明显下调,其中以1号重组质粒效应最强.shRNA作用48h后,对HepG2细胞中XIAP mRNA和蛋白的抑制率与3,4号重组质粒相比,均具有显著性差异(mRNA:94.5% vs 81.5%,82.6%,均P<0.01:蛋白:92.6% vs 80.7%,82.9%,均P<0.01).结论:成功构建了携带以XIAP为靶向的shRNA的重组质粒,其对肝癌细胞内XIAP的表达具有显著抑制效应.X染色体连锁凋亡抑制蛋白;;短发夹状RNA;;肝癌;;逆转录聚合酶链式反应;;免疫蛋白印迹     

非诺贝特与过氧化体增殖物激活型受体α对人肝瘤细胞1型纤溶酶原激活物抑制剂表达的影响

目的探讨非诺贝特对人肝瘤细胞株(HepG2)细胞1型纤维酶原激活物抑制剂(PAI-1)表达的影响及机制。方法用不同浓度非诺贝特刺激HepG2细胞,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测PAI-1mRNA水平,发色底物法检测PAI-1的活性变化。构建4个荧光素酶报告基因质粒,分别由PAI-1启动子序列从-804至+17间不同长度片段驱动,体外转染HepG2细胞,检测荧光素酶的活性。结果非诺贝特能使HepG2细胞PAI-1mRNA表达及蛋白活性显著降低,且呈一定剂量依赖性;还可使PAI-1转录活性显著降低;当转染质粒含有PAI-1启动子序列-636~+17、-449~+17-、276~+17 bp 3个片段时,荧光素酶活性显著增高;共转染过氧化体增殖物激活型受体α(PPARα)表达质粒(PPAR-αpSG5)的细胞在非诺贝特诱导下PAI-1转录活性显著降低。结论非诺贝特可以抑制HepG2细胞PAI-1mRNA表达及其活性,调节PAI-1的基因转录,PPARα参与非诺贝特对PAI-1基因的表达调控。