益生菌发酵制备金针菇抑菌肽

为获得更高产率的金针菇抑菌肽，该文优化益生菌固态发酵金针菇制备抑菌肽的最佳工艺条件，并采用超滤法对抑菌肽进行分级分离和活性比较。以金针菇为发酵基质，以抑菌肽对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的抑菌活性作为指标，对枯草芽孢杆菌、酿酒酵母和黑曲霉3 种益生菌进行筛选，并优选出沉淀法分离抑菌肽的最适pH 值，然后采用单因素和响应面试验考察液料比、发酵时间、发酵温度和金针菇用量4 个因素对发酵制备金针菇抑菌肽产率的影响。结果显示：黑曲霉为固态发酵制备金针菇抑菌肽的最适菌种；沉淀抑菌肽的最适pH 值为4；最佳发酵条件为液料比3.5∶1（mL/g）、发酵时间109.6 h、发酵温度28 ℃、金针菇用量27.21 g，在此条件下得到金针菇抑菌肽的产率为（61.25±1.14）%。截留分子量小于3 kDa 的抑菌肽活性最强。     

液态发酵法制备菜籽ACE抑制肽培养基条件优化

以菜籽粕为原料,通过枯草芽孢杆菌液态发酵生产菜籽ACE 抑制肽。先以肽得率、ACE 抑制率为指标通过单因素试验得到液态发酵的培养基条件,再以响应面分析法,优化枯草芽孢杆菌液态发酵培养基中的3 种成分,确定枯草芽孢杆菌发酵生产菜籽肽的最佳培养基工艺条件为：磷酸二氢钾0.45g/100mL、葡萄糖0.8g/100mL、料液比1:23、初始pH7.0。优化后的ACE 抑制率可达69.79%。     

液态发酵法制备菜籽ACE抑制肽发酵条件优化

以菜籽粕为原料,通过枯草芽孢杆菌液态发酵生产菜籽ACE抑制肽。先以肽得率、ACE抑制率为指标通过单因素试验得到液态发酵的发酵条件,再以响应面法分析法,优化了枯草芽孢杆菌液态发酵的工艺条件,确定枯草芽孢杆菌液态发酵生产菜籽ACE抑制肽的最佳发酵工艺条件为发酵时间,发酵温度和接种量,最佳工艺条件分别为20 h、38℃和1×108个/mL。优化后的菜籽ACE抑制肽抑制率达到70.95%。     

微生物发酵法制备大豆ACE抑制肽菌种的筛选

以大豆分离蛋白为底物,以血管紧张素转化酶(ACE)抑制率和肽含量为检测指标,选择5株乳酸菌、3株霉菌和1株枯草芽孢杆菌为出发菌种,通过微生物发酵筛选出具有高ACE抑制活性的发酵菌株。结果表明:乳酸菌中具有强ACE抑制活性的菌株为保加利亚乳杆菌,ACE抑制率和肽含量分别为57.93%和3.27mg/mL;霉菌中具有强ACE抑制活性的菌株为米曲霉,ACE抑制率和肽含量分别为41.23%和2.17mg/mL;枯草芽孢杆菌ACE抑制率和肽含量分别为45.02%和2.25mg/mL。综合比较9种菌株的发酵特性,选用保加利亚乳杆菌作为制备大豆抗高血压活性肽优良菌株。     

响应面优化枯草芽孢杆菌发酵豆粕制备ACE抑制肽条件

以豆粕为原料,对枯草芽孢杆菌发酵制备血管紧张素转化酶(Angiotensin I-converting enzyme,ACE)抑制肽发酵条件进行研究。以多肽得率和ACE抑制率为指标,通过单因素试验研究起始物料含水率、接种量、发酵温度、发酵时间对枯草芽孢杆菌发酵豆粕制备ACE抑制肽的影响,通过响应面试验对发酵条件进行优化。结果表明:最佳发酵条件为起始物料含水率59.5%,接种量4.7%,发酵温度38℃,发酵时间48 h。在此条件下,ACE抑制率达到61.43%。     

液态发酵法制备燕麦ACE抑制肽的优化

采用枯草芽孢杆菌对裸燕麦进行发酵制备燕麦ACE抑制肽,以多肽得率和ACE抑制率为考察指标,在单因素设计的基础上,应用响应面分析法,优化了液态发酵的工艺条件,得出最优发酵工艺条件为:发酵时间39 h,发酵温度34℃,初始p H 9,在此条件下ACE抑制率可达64.05%,发酵液的ACE抑制活性提高了6%。     

液态发酵法制备菜籽ACE抑制肽菌种的筛选

采用枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、黑曲霉、白地霉、产朊假丝酵母、宇佐美曲霉、雅致放射毛霉对菜籽粕进行液态发酵,以氮溶解指数、SN-TCA、氨基酸态氮、肽得率和ACE 抑制活性为评价指标,对液态发酵生产菜籽ACE 抑制肽的菌种进行筛选。结果表明：在上述菌种中枯草芽孢杆菌液态发酵所得肽得率最高,并且具有最高的ACE 抑制活性,菌种优势明显,是液态发酵菜籽粕生产ACE 抑制肽的优势菌种。     

复合菌液态发酵米糠制备ACE抑制肽的预处理

探寻复合菌液态发酵米糠制备ACE抑制肽的原料预处理方法,以提高ACE抑制肽产率及产物ACE抑制活性。对米糠原料进行膨化预处理以及除淀粉预处理,以枯草芽孢杆菌1389与黑曲霉AS3.350按2∶1接种为发酵菌株,在接种量10.0%、发酵温度30℃、转速200 r/min发酵条件下,以发酵过程中的pH值、氨基酸态氮、还原糖含量、蛋白酶活性、肽转化率、ACE抑制活性为考察指标。结果表明:最佳原料预处理方法为膨化法,处理条件为米糠水分15.0%、挤压温度140℃、螺杆转速140 r/min。经膨化预处理后,复合菌液态发酵米糠制备ACE抑制肽,肽转化率可达38.86%;ACE抑制活性最高为64.48%,各项指标均好于除淀粉预处理。     

枯草芽孢杆菌发酵麦糟制备蛋白肽培养基研究

以麦糟为原料,对枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）固态发酵麦糟制备蛋白肽培养基条件进行研究。通过单因素试验考察碳源种类、碳源添加量、料液比、磷酸二氢钾添加量和拌料水pH值对肽得率的影响,通过Box-Behnken试验方案和响应面分析优化培养基。结果表明,枯草芽孢杆菌发酵生产麦糟蛋白肽的最优培养基为：pH 7.0,葡萄糖添加量4.2%,麦糟与水的料液比1.0∶2.1（g∶mL）,磷酸二氢钾添加量0.6%,在该条件下,发酵麦糟肽得率可达12.40%。     

混菌固态发酵榛仁粕制备降血压肽工艺优化研究

为探索固态发酵榛仁粕制备降血压肽的最佳工艺条件,以蛋白酶活力、水解度和粗多肽得率为指标,从枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、植物乳杆菌、米曲霉、酿酒酵母中筛选出3株蛋白酶产量较高的菌株,再将其分别两两组合以ACE抑制率、水解度和粗肽得率为指标进行混菌筛选,通过单因素实验和正交实验,优化降血压肽制备工艺条件。结果表明:枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、米曲霉更适合固态发酵榛仁粕制备降血压肽。枯草芽孢杆菌和米曲霉按2:3比例混合,接种量15%,含水量60%,发酵温度40℃,发酵时间72 h,在此条件下所得发酵产物的ACE抑制率、水解度及粗多肽得率分别为45.24%,30.13%和25.53%,ACE抑制率提高了104.61%。     

血管紧张素转化酶抑制剂产生菌的筛选及发酵条件优化

以大豆分离蛋白为基质,以血管紧张素转化酶（ACE）抑制活性和多肽含量为评价指标,筛选高产ACE抑制剂的菌株,并以 ACE和蛋白水解度（DH）为考察指标对其产ACE抑制剂的发酵条件进行单因素优化。 通过微生物发酵法筛选出一株具有高ACE抑制 活性的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）BS90。 经单因素试验确定最优发酵条件为：采用液态发酵,大豆蛋白含量5%,初始pH值9.0,培 养温度35 ℃,培养时间40 h。 在此发酵条件下,DH和ACE抑制活性分别达到89.1%和81.8%,较优化前分别提高69.5%、13.4%。 为后续 ACE抑制肽的分离制备奠定了基础。     

发酵大豆豆粕水提物分离纯化ACE抑制活性小肽

本文开发了一种利用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)发酵大豆豆粕并结合多级超滤、纳滤配合凝胶渗透色谱(GFC)和液相色谱(HPLC)分离纯化具有血管紧张素转换酶(ACE)抑制活性的小肽的方法。利用色谱法从发酵豆粕超滤提取液中分离纯化大豆小肽,用氨基酸序列分析仪PPSQ-21和基质辅助激光解吸/电离串联飞行时间质谱基质(MALDI-TOF-TOF/MS)定性,再用标准固相肽合成法(SPPS)合成小肽,用HPLC法测定其ACE 抑制活性,并对小肽进行Sprague-Dawley Rat大鼠的心血管离体实验。结果表明,超滤后得到不同分子量滤液F1(1000~10000 Da)、F2(500~1000 Da)、F3(<500 Da)均具有不同程度的ACE 抑制活性且分子量最小的F3(<500 Da)组分最强。从F3组分中分离纯化了两个ACE 抑制活性小肽,HAGR和CGAAP,在相同浓度(2 mg/mL)下其抑制率分别为34.99%和77.79%,后者抑制活性高于F3组分。离体实验的结论同样证实,大豆提取小肽具有舒张已被收缩的血管环的活性,但活性强度与ACE抑制活性不直接相关。实验证明,枯草芽孢杆菌配合超滤的方式可以从大豆发酵物中制备具有血管生物活性的组分,其生物活性可能来源于这种组分中的部分小肽。     

中国根霉12菌株抗生物质产生条件和性质

中国根霉（ＲｈｉｚｏｐｕｓＣｈｉｎｅｓｉｓ）１２能产生一种对芽孢菌属细菌有独特抑制作用的抗生物质。其发酵条件研究结果表明：在以正交实验确定的最佳培养基（豆饼粉酶解液８０ｍｌ、玉米粉水解液２０ｍｌ、葡萄糖２ｇ、ｐＨ自然）和最适发酵工艺条件（种龄１８ｈ、接种量１％、发酵培养基初始ｐＨ６．０～６．５、装液量５０ｍｌ／２５０ｍｌ三角瓶，摇床转速１６０ｒ／ｍｉｎ、２８～３０℃培养４８ｈ）下，Ｒ．ｃｈｉｎｅｓｉｓ１２菌株产生的抗生物质的抑菌圈直径为２１．５ｍｍ，抑菌面积３０９．３６ｍｍ２，是对照少孢根霉（Ｒ．ｏｌｉｇｏｓｐｏｒｕｓ）ＩＦＯ８６３１菌株的６倍。该物质可被胰蛋白酶所破坏，由纸电泳和茚三酮反应等实验结果判定该抗生物质为碱性多肽或蛋白质性质的物质。     

响应面法优化益生菌发酵香蕉金针菇饮料的工艺研究

以香蕉和金针菇为原料,植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）和副干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei）为发酵菌种,在单因 素试验的基础上,采用Box-Behnken响应面法对香蕉金针菇饮料的工艺进行优化。 结果表明,最佳发酵工艺条件为香蕉汁∶金针菇汁 为4∶1（mL/mL）,发酵剂接种量4%,蔗糖添加量5.5%,发酵时间20 h,发酵温度37 ℃,在此工艺条件下得到的香蕉金针菇饮料的感官评 分为93分,乳酸含量为7.21 g/L。稳定剂羧甲基纤维素钠（CMC-Na）、黄原胶和卡拉胶的添加量分别为0.20%、0.04%和0.4%。     

全因子试验设计优化产ACE抑制肽羊乳发酵工艺及其冷藏研究

以山羊乳为原料,产ACE抑制肽菌株保加利亚乳杆菌（Lactobacillus bulgaricus）LB6和嗜热链球菌（Streptococcus thermophilus）ST为发酵菌株,采用全因子试验设计对其发酵羊乳产ACE抑制肽的发酵工艺进行优化,并研究冷藏对其理化性质及质构的影响。结果表明,最优发酵工艺为菌株比例LB6∶ST=1∶1,发酵温度42 ℃,发酵时间3.5 h。在此优化条件下,发酵羊乳ACE抑制率、OD600 nm值和感官评分分别为78.37%、0.22、7.35分;随着冷藏时间的延长,发酵羊乳的pH值逐渐减小,酸度逐渐增大;ACE抑制率、活菌数、硬度、稠度、凝聚性和黏度指数呈现先上升后下降的趋势。     

玉米ACE抑制肽水解酶的筛选及酶解条件的优化

酶解玉米蛋白粉(蛋白含量为70%)制备血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽,通过酶的筛选实验确定了AS.1398中性蛋白酶作为最佳水解酶,在此基础上,进行pH、温度、底物浓度、加酶量[E]∶[S]的单因素实验,并且确定4种因素的参数值进行L9(34)正交实验,采用体外检测ACE抑制率和肽得率为指标来确定最佳工艺条件。研究结果表明,选用AS.1398中性蛋白酶作为水解酶,水解时间在2h时,pH7.0,温度50℃,底物浓度5%,加酶量[E]∶[S]为1.5∶100,得到的最大ACE抑制率为85.65%,肽得率为58.64%。     

设施蔬菜生防用枯草芽孢杆菌M6发酵条件的优化研究

研究了设施蔬菜生防用枯草芽孢杆菌M6的发酵工艺,通过单因素试验和正交试验确定了M6的发酵培养基及条件.结果表明,枯草芽孢杆菌M6的的最优化工艺条件:玉米淀粉10g/L、大豆蛋白粉8g/L、NaCl 5g/L、K2HPO40.6g/L、培养基初始pH值7.0、培养温度35℃、接种量8％、摇床转速180r/min、培养时间42h.在此条件下发酵液活菌数达到95.8×108cfu/mL,芽孢形成率达到92％以上.此发酵条件比优化前枯草芽孢杆菌M6活菌数(85× 108cfu/mL)提高了12.7％.     

鼠李糖乳杆菌及枯草芽孢杆菌发酵对饲料品质的影响

该研究通过测定发酵饲料pH值、活菌数、乳酸含量及中性蛋白酶活性,筛选出适宜基础饲料发酵的鼠李糖乳杆菌（Lactobacillus rhamnosus）BLCC2-0038和枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）BLCC1-0281,并对筛选出的鼠李糖乳杆菌和枯草芽孢杆菌进行单菌及混菌发酵方式进行了研究。结果表明,BLCC2-0038单独发酵72 h时pH值降至3.73,活菌数达到7.05×109 CFU/g,乳酸含量为48.67 mg/g;BLCC1-0281单独发酵72 h时,活菌数达到2.28×1010 CFU/g,中性蛋白酶活性达到3 207 U/g;BLCC2-0038和BLCC1-0281混菌发酵时,以鼠李糖乳杆菌/枯草芽孢杆菌配比为3∶1,2%接种量,有氧发酵方式最优,发酵72 h时鼠李糖乳杆菌活菌数为5.35×109 CFU/g,枯草芽孢杆菌活菌数为7.80×109 CFU/g,中性蛋白酶活性为1 407.83 U/g。