玉米须保健饮料中多糖含量的测定

测定玉米须保健饮料中多糖含量。采用蒽酮-硫酸法,以葡萄糖为对照品,于625 nm波长处测其吸光度,测定总多糖的含量。结果表明:葡萄糖质量浓度在0.02 mg/mL～0.14 mg/mL范围内与吸收度呈良好的线性关系;平均回收率为102.7%,RSD=1.24%;测得的总多糖平均含量为0.822 mg/mL。采用蒽酮-硫酸法可以测定玉米须保健饮料中总多糖含量。     

蒽酮-硫酸法测定榛花多糖含量条件的优化

探讨蒽酮-硫酸法测定多糖含量的影响因素,并优化榛花多糖含量测定的最佳条件。试验以吸光度值为评价指标,检测波长为625 nm,对蒽酮质量浓度、加热温度、蒽酮试剂用量和加热时间进行单因素试验,再用L_9(3~4)正交试验设计优选测定条件。结果表明,1 m L样液下,蒽酮质量浓度20 mg/m L、加热温度90℃、蒽酮试剂用量4.0 m L、加热时间10 min的条件最优。最佳工艺下,平均回收率为99.63%,相对标准偏差(RSD)为1.58%。     

蒽酮-硫酸比色法测定南瓜籽多糖含量

采用蒽酮-硫酸法测定南瓜籽多糖含量并对其测定条件进行研究。结果表明最佳条件为:蒽酮浓度2.0 mg/m L,体积分数80%的硫酸,样品溶液与蒽酮-硫酸试剂加入量的体积比为1∶4,加热时间15 min,冷却后放置10 min、625 nm比色。平均加标回收率为97.3%,RSD 3.98%。测得样品中多糖含量为18.14%。结果表明,该方法适用于南瓜籽多糖含量的测定。     

蛹虫草Cordyceps militaris JN168产虫草素液态发酵条件的优化

利用单因素筛选和响应面法对蛹虫草Cordyceps militaris JN168产虫草素的液态发酵培养基进行优化,以确定蛹虫草产虫草素的最佳发酵培养基配方。结果表明,蛹虫草产虫草素的最佳碳源为葡萄糖,最适质量浓度为40 g/L;最佳氮源为牛肉膏,最适质量浓度15 g/L;加入的无机盐及其添加量分别为MgSO40.76 g/L,K2HPO40.63 g/L,CaCl20.66 g/L,Na2HPO40.67 g/L。优化后发酵液中虫草素质量浓度达到633.47 mg/L,是优化前的6倍。     

蒽酮-硫酸比色法测定三角帆蚌软体组织多糖含量

目的 测定三角帆蚌动物多糖的含量,为三角帆蚌质量控制及资源开发提供科学依据.方法 以葡萄糖为对照品,采用硫酸-蒽酮比色法测定三角帆蚌多糖的含量.结果 在580 nm波长处有最大吸收峰,葡萄糖在0.02～0.10 mg/mL范围内线性关系良好,r=0.9997,回收率100.02％,RSD为0.29％.结论 该方法快速准确重现性好,可用于三角帆蚌多糖的含量测定.     

蛹虫草胞外多糖的制备、结构分析及其免疫活性

本实验选择蛹虫草菌株CICC 14014液态发酵培养，提取蛹虫草胞外多糖，测定其理化性质及结构，并对其免疫活性进行研究。采用DEAE-Sephacel阴离子交换柱联合Sephadex G-200葡聚糖凝胶柱纯化蛹虫草胞外多糖；利用高效液相色谱法测定多糖分子质量，利用傅里叶变换红外光谱鉴定多糖结构；选用BALB/c小鼠构建免疫损伤模型，考察其体质量及免疫器官指数变化情况，观察其脾脏组织切片形态，计算其T、B细胞增殖率，测定其血清细胞因子及免疫球蛋白质量浓度。结果表明，蛹虫草发酵液中多糖质量浓度为3.15 mg/mL，经分离纯化后所得单一多糖分子质量为3.67 kDa，纯度可达86.13%。动物实验结果表明，蛹虫草胞外多糖可明显提高免疫器官指数，能够有效促使T细胞（低剂量时）、B细胞增殖和免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）G、IgA、IgM、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素（interleukin，IL）-6、IL-2、干扰素（interferon，IFN）-γ的分泌，免疫调节效果显著。研究结果表明蛹虫草胞外多糖可修复环磷酰胺导致的BALB/c小鼠免疫功能损伤，为开发蛹虫草发酵液资源建立了部分理论支撑。     

苯酚硫酸法测定萌发菌HL-003多糖方法的研究

为确定苯酚硫酸法测定萌发菌HL-003多糖的最佳参数。选取苯酚浓度和浓硫酸量为自变量,检测不同苯酚浓度和浓硫酸量下的最大吸收波长和吸光值,从而确定最佳的苯酚浓度和浓硫酸量,在此基础上检验方法的显色时间、精密度、线性范围和回收率。结果表明:最佳苯酚浓度为5%,浓硫酸量为3.5 m L,最大吸收波长为488 nm,显色时间15 min;葡萄糖浓度在0~200 mg/m L范围内线性良好;在优化方法下进行精密度实验,葡萄糖、胞内多糖和发酵液多糖测定结果的相对标准偏差(RSD)分别为0.474%、1.015%和0.712%,测定结果稳定可靠;本方法对葡萄糖和葡聚糖的回收率均在99.10%以上,回收率高,与真实值吻合;通过测定,萌发菌HL-003胞内和发酵液多糖的含量分别为2.028%和2.998 g/L。     

4种藤茶多糖的检测方法比较

该研究对比探讨了苯酚-硫酸法、蒽酮-硫酸法、硫酸-紫外法、二硝基水杨酸法测定藤茶中多糖含量的准确性,利用单因素试验对4种方法的关键检测条件进行了优化,并对方法学的精密度、重复性、稳定性、加标回收率进行了比较,再用最佳实验条件检测藤茶样品中多糖的含量。结果表明,用于藤茶多糖测定的最佳方法为苯酚-硫酸法,其最适紫外检测波长为485.5 nm,以葡萄糖为标准在0.1~0.6 mg/mL范围内吸光度具有良好的线性关系。在0.5 mL藤茶粗多糖溶液（质量浓度为0.5 mg/mL）反应体系中,在500 μL浓硫酸、600 μL 5wt%苯酚溶液、60 ℃水浴温度和20 min水浴时间的最佳实验条件下,测得其多糖含量为59.43%,其精密度最高（RSD 0.18%）,稳定性最好（RSD 0.30%）。最后测得藤茶中幼嫩茎叶和粗老茎叶的多糖含量为9.87~10.47 mg/g和29.77~30.47 mg/g。     

蛹虫草液态深层发酵的研究

采用二次饱和D 最优试验设计方法 ,在 3 0L生物反应器中进行了蛹虫草液态深层发酵。当初始温度为 2 2℃ ,pH 6 3～ 6 5 ,搅拌速度 1 80r/min ,通风量 1 2 1m3/h ,发酵 72h和 96h ,蛹虫草菌丝体 (干 )产率分别为 3 8 6g/L和 42 3g/L。用HPLC法检测腺苷和蛹虫草菌素的含量 ,72h时分别为湿菌丝体中 0 3 5 2 μg/g和 0 1 3 4μg/g ,发酵液中 0 1 79μg/mL和 0 1 0 2 μg/mL ;用比色法在41 2nm处检测虫草酸的含量 ,湿菌丝体中为 2 3 40 6mg/g,发酵液中为 6 61mg/mL。     

蛹虫草多糖提取工艺优化及其抗菌、抗氧化活性

为研究蛹虫草多糖的提取工艺及其抗菌、抗氧化活性,以蛹虫草为原料,采用双频逆流聚能式超声波辅助法提取蛹虫草多糖。以蛹虫草多糖提取率为指标,在单因素试验基础上,通过响应面试验优化其提取工艺。结果表明,蛹虫草多糖最佳提取工艺条件为超声波功率420 W、超声温度60℃、提取时间50 min,该条件下蛹虫草多糖提取率为7.17% 。体外抗氧化试验结果表明,蛹虫草多糖对DPPH自由基、羟基自由基的半数抑制浓度（IC50）分别为36.05 μg/mL和0.33 mg/mL,具有较强的清除能力。体外抗菌试验结果表明,蛹虫草多糖对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均具有一定的抑制作用,最低抑菌浓度分别为0.4 mg/mL和0.8 mg/mL,且随着质量浓度的增加而不断增强。     

蒽酮-硫酸法测定出芽短梗霉发酵液残糖和总糖含量的研究

目的研究色素和不同比例乙醇对蒽酮-硫酸法测定出芽短梗霉发酵液残糖、总糖含量的影响。方法配制不同比例的乙醇蔗糖溶液,以蒽酮-硫酸法测定蔗糖含量;发酵液稀释300倍620nm处测A值;2倍乙醇沉淀发酵液,沉淀上清稀释100倍,620n m处测A值。结果纯化水∶乙醇为1∶1和1∶2时可用蒽酮-硫酸法测其中蔗糖含量;发酵液稀释300倍,乙醇沉淀上清液稀释100倍后,620 nm处A值均接近0。结论蒽酮-硫酸法可用于出芽短梗霉发酵液残糖、总糖测定。     

富硒蛹虫草抗氧化作用研究

从富硒蛹虫草中提取硒多糖和硒蛋白。分别采用ICP-MS 法和苯酚硫酸法及考马斯亮蓝法对硒多糖和硒蛋白中硒、多糖及蛋白含量进行测定;在Fenton 体系中,以510nm 波长处的吸光度研究硒多糖和硒蛋白对羟自由基的清除作用。结果表明：硒多糖和硒蛋白清除羟自由基的效果强于相同浓度的无机硒、多糖及蛋白;其中,富硒蛹虫草硒多糖的对羟自由基最高清除率为38.02%,而硒蛋白的最高清除率可达75.00%。     

响应面分析优化蒽酮-硫酸法测定桑叶中多糖的含量

采用水提取醇沉淀法提取桑叶中的水溶性多糖,通过响应面分析法优化桑叶中多糖含量测定的蒽酮-硫酸显色方法。在单因素实验的基础上,根据Box-Behnken中心组合实验设计原理,考察了显色时间、显色温度和蒽酮试剂用量各因素间的交互作用及其对吸光度的影响。最佳显色条件为:显色时间10min、显色温度100℃、蒽酮试剂用量4mL。在该显色条件下,以620nm为检测波长,葡萄糖质量在0～0.2mg/mL的范围内与吸光度呈良好的线性关系,R2=0.9973。所建立的方法简单可行,可用于桑叶中多糖含量的测定。     

不同谷物培养基质对蛹虫草有效成分的影响

以蛹虫草菌种为材料,高粱、糜子、油莎豆3 种谷物为培养基质,测定谷物蛹虫草菌丝共生体和蛹虫草子实体的主要活性成分,研究不同培养基质对蛹虫草有效成分含量的影响。结果表明,油莎豆培养的蛹虫草菌丝共生体产纤溶酶酶活最高,为312.26 U/g;油莎豆培养的蛹虫草子实体产虫草素含量最高,为7.34 mg/g。高粱培养的蛹虫草子实体麦角甾醇含量最高,为6.10 mg/g;糜子蛹虫草菌丝共生体粗多糖含量最高,为72.5 mg/g。高粱适合作为培养高产麦角甾醇的蛹虫草子实体的培养基质,糜子适合作为培养高产粗多糖的菌丝共生体的培养基质,油莎豆适合作为培养高产虫草素的蛹虫草子实体和高产纤溶酶的菌丝共生体的培养基质。     

蛹虫草基质多糖纳米硒复合物的制备研究

以多糖为软模板,可以制备高效低毒的纳米硒-多糖复合物。本文以废弃的蛹虫草培养基质中提取的水溶性多糖为原料,研究了蛹虫草基质多糖纳米硒复合物的制备工艺及抗肿瘤活性。实验结果表明,在多糖浓度为10 mg/m L、亚硒酸浓度为0.4 mol/L、混合时间为4 h、滴加速度为1.5 r/min的条件下,可以制备出形貌理想、粒径适宜、稳定性良好的蛹虫草基质多糖纳米硒复合物。该复合物对Caco-2肿瘤细胞的生长具有一定抑制效果,且对细胞毒作用呈现出剂量依赖效应。     

水提醇沉法提取蛹虫草多糖的工艺优化及体外抗氧化效果研究

目的优化蛹虫草多糖的提取工艺,研究蛹虫草多糖的体外抗氧化效果。方法以水提醇沉法提取蛹虫草中的多糖,采用正交试验优化提取工艺,并通过1, 1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH)和羟自由基清除能力测定评价虫草多糖体外抗氧化效果。结果蛹虫草多糖的最佳提取条件为菌粉粒度80目,料液比1:20,提取温度65℃,提取时间2 h,提取次数3次,在此条件下,提取率达10.42%。随着浓度的增加,多糖的体外抗氧化活性呈上升趋势,当浓度为1.2 mg/ml时,多糖对DPPH自由基、羟自由基的清除率分别为同浓度下抗坏血酸的54.29%,65.69%。结论优化后工艺提高了蛹虫草多糖的提取率,并保留了其抗氧化活性,可为蛹虫草多糖的开发利用奠定基础。     

蛹、米虫草多糖含量及抗氧化活性比较研究

旨在研究不同来源北虫草子实体多糖的含量差异以及分级醇沉各组分的抗氧化活性差异。通过热水浸提、分级醇沉法分别获得蛹虫草多糖(Cordyceps militaris polysaccharide,CMP)、米虫草多糖(Cordyceps oryzae polysaccharide,COP);以DPPH自由基清除率、羟基自由基(·OH)清除率和铁离子还原能力法(ferric reducing antioxidant power,FRAP)评价两种多糖的体外抗氧化活性;构建H_2O_2致PC12细胞氧化损伤模型,比较两种虫草多糖对氧化损伤的PC12细胞的保护作用。不同乙醇浓度沉淀获得的虫草多糖中,米虫草多糖提取率及含量高于蛹虫草多糖;米虫草多糖对DPPH自由基、·OH清除率分别可达66.43%、69.22%,蛹虫草多糖可达73.69%、73.50%;FRAP法测得蛹虫草多糖抗氧化能力较强。细胞试验结果表明,氧化损伤的PC12细胞经两种多糖处理后细胞存活率皆有不同程度的提升,呈浓度依赖性,蛹虫草多糖组细胞存活率最高可达90.45%,米虫草多糖组细胞存活率最高可达82.62%。以蚕蛹为培养基的蛹虫草在多糖提取率及含量方面低于以大米为培养基的米虫草,但其多糖对自由基清除能力及PC12细胞保护作用优于米虫草多糖,具有较好的抗氧化能力。     

硒对蛹虫草菌丝代谢和总抗氧化能力的影响

采用在培养基中添加亚硒酸钠的方法来研究硒对蛹虫草菌丝代谢和总抗氧化能力的影响.结果表明:培养基加硒浓度为1mg/L范围内,对蛹虫草菌丝生长有促进作用,加硒浓度为5mg/L～20mg/L时,对蛹虫草菌丝胞外多糖的分泌有促进作用,当培养基加硒浓度为20mg/L时胞外多糖产量最高:培养基加硒浓度为0mg,L～30mg/L,时,对蛹虫草菌丝提取物总抗氧化能力均有显著的增强作用,当加硒浓度为15mg/L时,蛹虫草菌丝提取物总抗氧化能力达到最大.     

蛹虫草发酵大米的成分分析及体外抗氧化活性研究

以大米为培养基,对蛹虫草菌发酵前后的营养和功能成分变化进行研究,通过测定总还原能力,对超氧阴离子自由基(O-2·)、羟自由基(·OH)及二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)的清除能力来探究虫草米体外抗氧化活性。结果表明:经蛹虫草发酵大米后得到的虫草米不仅含有虫草酸和虫草素等功能性成分,而且与发酵前的大米相比,水溶性非淀粉多糖(Water soluble non starch polysaccharides,SNSP)含量提高,其中SNSP、虫草酸、虫草素含量分别为8.39%、18.07 mg/g、8.76 mg/g;抗氧化结果显示,与普通大米提取液相比,虫草米提取液具有明显的清除自由基作用和总抗氧化能力,浓度为5 mg/m L的虫草米提取液,对O_2~-·、·OH及DPPH·的清除率分别为40%、38%、79.1%,在提取液浓度为0~5 mg/m L范围内和剂量呈正比。由此说明虫草米具有一定的抗氧化能力,可为功能性虫草产品的研发提供理论依据。     

蛹虫草子实体中类胡萝卜素的提取及抗氧化活性

在比较蛹虫草子实体类胡萝卜素的溶剂提取法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法、酸热提取法的基础上,对蛹虫草子实体中类胡萝卜素的提取工艺进行了优化,并分析了类胡萝卜素的体外抗氧化活性。实验结果表明:酸热提取法是几种常见提取方法中类胡萝卜素提取得率最高的一种方法;酸热法最优提取工艺为:盐酸浓度为1 mol/L,盐酸用量为20 m L/g,酸浸时间为30 min,热处理时间为5 min,蛹虫草中类胡萝卜素的得率达到1387μg/g。抗氧化实验结果显示:蛹虫草子实体中类胡萝卜素具有较好的体外抗氧化活性,在0~10 mg/m L的浓度范围内抗氧化能力随着类胡萝卜素浓度的提高而增加。4 mg/m L类胡萝卜素的DPPH自由基清除率达到96.57%,类胡萝卜素对铁离子螯合能力的EC50值为3.26 mg/m L,且还显示出了较好的还原能力。