富硒金针菇对自由基清除作用

采用现代分离技术从富硒金针菇中提取硒多糖和硒蛋白,采用苯酚- 硫酸法、ICP-MS 法和考马斯亮蓝染色法对硒多糖中多糖含量、硒含量及硒蛋白中蛋白和硒的含量进行测定;在Fenton 体系的最佳实验条件下,研究硒多糖和硒蛋白对羟自由基的清除作用。结果表明：硒多糖和硒蛋白清除羟自由基的效果比与之相同浓度的无机硒和相同浓度的多糖及蛋白都要明显;其中,硒多糖的最高清除率可达65.05%,而硒蛋白的最高清除率可达19.67%。     

虫草与富硒虫草多糖的体外抗氧化活性

采用Fenton法和邻苯三酚自氧化法测定虫草和富硒虫草多糖对.OH、O2-.和H2O2的清除率。结果表明:虫草多糖对O-2.和H2O2的清除能力依次为富硒虫草胞外多糖>富硒虫草胞内多糖>虫草胞外多糖>虫草胞内多糖,而对.OH的清除能力依次为:富硒虫草胞外多糖>虫草胞外多糖>富硒虫草胞内多糖>虫草胞内多糖;当100mg/L多糖溶液添加量分别高于80、40、90μL时,各组多糖对.OH、O2-.和H2O2 3种自由基的抑制率均可高于50%。     

蛹虫草胞外锌多糖抗氧化能力的研究

以蛹虫草为材料通过液体深层富锌培养获得胞外富锌多糖,测定了蛹虫草胞外富锌多糖的锌含量和抗氧化性能,即清除氧自由基、羟自由基和DPPH的能力。实验结果表明:蛹虫草富锌培养基内ZnSO4浓度在150μg/mL下,可以显著提高胞外锌多糖的有机锌含量(P<0.01),使有机锌含量达到0.87mg/g,比对照提高295%。有机锌对提高胞外锌多糖清除自由基的能力有显著的促进作用(P<0.01),清除氧自由基、羟自由基和DPPH的能力分别是对照的7.05%、23.5%和17.49%;胞外锌多糖对自由基的清除能力与多糖浓度呈明显的剂量-效应关系(P<0.01)。     

富硒食用菌硒蛋白清除氧自由基作用研究

研究富硒食用菌硒蛋白对羟自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O2-·)的清除和抑制作用,为富硒食用菌的开发利用提供依据。利用Fenton体系产生·OH,邻苯三酚自氧化体系产生O2-·。以缓冲溶液为提取剂从富硒食用菌中提取硒蛋白,ICP-MS法和考马斯亮蓝染色法测定硒蛋白含量。结果表明,随着硒蛋白浓度的增大,对羟自由基的清除率随之增加,空白蛋白和无机硒对·OH的清除率之和小于富硒食用菌蛋白对·OH的清除率,且存在极显著差异。无机硒、普通食用菌蛋白和硒蛋白对超氧阴离子(O2-·)均有清除作用,随着体积的增加,三者对O2-·的清除率呈上升趋势,在不同浓度下,富硒食用菌蛋白对O2-·的清除率均高于普通食用菌蛋白以及无机硒。硒与食用菌蛋白之间在清除自由基方面存在协同作用。硒蛋白对O2-·有一定的清除和抑制作用。硒蛋白对·OH的清除效果好于对O2-·的清除效果。     

蛹、米虫草多糖含量及抗氧化活性比较研究

旨在研究不同来源北虫草子实体多糖的含量差异以及分级醇沉各组分的抗氧化活性差异。通过热水浸提、分级醇沉法分别获得蛹虫草多糖(Cordyceps militaris polysaccharide,CMP)、米虫草多糖(Cordyceps oryzae polysaccharide,COP);以DPPH自由基清除率、羟基自由基(·OH)清除率和铁离子还原能力法(ferric reducing antioxidant power,FRAP)评价两种多糖的体外抗氧化活性;构建H_2O_2致PC12细胞氧化损伤模型,比较两种虫草多糖对氧化损伤的PC12细胞的保护作用。不同乙醇浓度沉淀获得的虫草多糖中,米虫草多糖提取率及含量高于蛹虫草多糖;米虫草多糖对DPPH自由基、·OH清除率分别可达66.43%、69.22%,蛹虫草多糖可达73.69%、73.50%;FRAP法测得蛹虫草多糖抗氧化能力较强。细胞试验结果表明,氧化损伤的PC12细胞经两种多糖处理后细胞存活率皆有不同程度的提升,呈浓度依赖性,蛹虫草多糖组细胞存活率最高可达90.45%,米虫草多糖组细胞存活率最高可达82.62%。以蚕蛹为培养基的蛹虫草在多糖提取率及含量方面低于以大米为培养基的米虫草,但其多糖对自由基清除能力及PC12细胞保护作用优于米虫草多糖,具有较好的抗氧化能力。     

富硒灵芝中高抗氧化活力、高硒含量的水溶性硒蛋白的纯化

在富硒灵芝蛋白的各种溶剂提取物中,水溶性蛋白是其中结合硒含量最高的。本文以高硒(Se)含量、高自由基清除能力为考查指标,通过优化的柱层析等方法对富硒灵芝中的水溶性硒蛋白进行了提取、分离和纯化。通过电感偶合等离子体发射光谱法(ICP-AES)测定蛋白质结合的硒元素(se)含量,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)进行纯度鉴定。通过电子自旋共振捕捉(EPR)技术测定样品对羟自由基和超氧自由基的清除能力。研究结果表明,纯化后的硒蛋白显示出很强的羟自由基和超氧自由基的清除能力,并且这种抗氧化能力随着硒蛋白中硒含量的增加而增强,从而反映了硒元素在富硒灵芝蛋白抗氧化活力提高方面的重要作用。     

硒蛋白和过氧化氢酶清除羟自由基作用的研究

在甲基紫-Fe~(2+)-H_2O_2体系中,试验得到最佳测定条件:缓冲溶液用量为1.0 mL、甲基紫用量为3.5 mL、Fe~(2+)用量为3.0 mL和H_2O_2加样量为2.5 mL。采用紫外可见分光光度法研究富硒食用菌中硒蛋白和过氧化氢酶对羟自由基的清除作用。结果表明:硒蛋白清除羟自由基的能力明显高于相同浓度的无机硒和蛋白质,且清除率随着各自加入量的增加而相应增加;硒蛋白和过氧化氢酶对清除羟自由基具有一定的协同作用,为富硒食品的合理开发和利用提供了一定的参考依据。     

富硒蛹虫草多糖对鱼藤酮诱导伤害果蝇的保护功效

目的：探讨蛹虫草多糖和富硒蛹虫草多糖在鱼藤酮诱导的果蝇伤害模型中缓解氧化压力和神经毒保护功效。方法：采用鱼藤酮诱导伤害模型,评估饲喂含多糖与不含培养基果蝇的氧化指标和神经伤害。分别测定丙二醛(MDA)、蛋白质羧基化(PC)、谷胱甘肽(GSH和GSSG)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过-S-转移酶(GST)指标;同时测定逆重力爬行、乙酰胆碱酯酶(Ache)和丁酰胆碱酯酶(Bche)活力,对多糖的神经保护作用进行评估。结果：蛹虫草多糖和富硒蛹虫草多糖对降低果蝇体内氧化压力和神经伤害效果显著,相同质量浓度条件下富硒多糖保护效果好于普通蛹虫草多糖,其中1%富硒蛹虫草多糖溶液添加组逆重力爬行能力可回复到对照组的85%,部分氧化压力指标和酶活力也基本恢复至对照组水平。     

水提醇沉法提取蛹虫草多糖的工艺优化及体外抗氧化效果研究

目的优化蛹虫草多糖的提取工艺,研究蛹虫草多糖的体外抗氧化效果。方法以水提醇沉法提取蛹虫草中的多糖,采用正交试验优化提取工艺,并通过1, 1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH)和羟自由基清除能力测定评价虫草多糖体外抗氧化效果。结果蛹虫草多糖的最佳提取条件为菌粉粒度80目,料液比1:20,提取温度65℃,提取时间2 h,提取次数3次,在此条件下,提取率达10.42%。随着浓度的增加,多糖的体外抗氧化活性呈上升趋势,当浓度为1.2 mg/ml时,多糖对DPPH自由基、羟自由基的清除率分别为同浓度下抗坏血酸的54.29%,65.69%。结论优化后工艺提高了蛹虫草多糖的提取率,并保留了其抗氧化活性,可为蛹虫草多糖的开发利用奠定基础。     

富硒花生中硒的主要赋存形态及其抗氧化性

通过超声、离心、透析的方法将富硒花生中的有机硒和无机硒分离开,有机态硒以蛋白质和多糖为主要分离对象,采用火焰原子吸收光谱法对硒水平进行测定。结果表明:富硒花生中硒含量为0.165 3μg/g,蛋白提取率为23.39%,多糖提取率为11.32%,硒蛋白是硒的主要赋存形态,其结合的硒量达到富硒花生有机硒总量的73.39%,总硒量的59.89%。抗氧化性分析结果表明,粗多糖相对于纯化多糖和蛋白提取物,具有更长的诱导时间、更高的DPPH自由基清除能力和更高的还原力。     

营养元素硒在南瓜中赋存形态及分布研究

本文研究了营养元素硒在南瓜中赋存形态、分布及含硒大分子的提取分离技术;采用蒸馏水、稀盐、乙醇、稀碱分别依次提取不同种类的蛋白质,热水浸提法提取多糖,原子吸收分光光度法测定硒的含量;结果表明：南瓜中的含硒组分主要有蛋白硒和多糖硒,分别占样品含硒量的45.76%和27.47%,在硒蛋白组分中又以碱溶性蛋白结合硒含量最高,占样品含硒量的46.34%.     

硒化皂荚仁多糖胶的制备及抗氧化性研究

以水提醇沉法从皂荚仁中提取多糖胶,利用亚硒酸钠对皂荚仁多糖胶改性得到水溶性硒化皂荚仁多糖胶。UV、IR结果表明硒多糖与普通多糖结构相似为以糖苷键连接的吡喃多糖,且硒以Se=O形式存在。ICP测得硒含量为38.4mg/g。DSC结果表明,硒化皂荚仁多糖胶有良好的热稳定性。抗氧化性测定结果表明,硒化皂荚仁多糖胶对羟自由基及DPPH有一定的清除作用,清除率随浓度的增大而增大,抗氧化性与浓度之间有一定的构效关系。浓度为3.02mg.mL-1时对DPPH清除率达46.4%,浓度为2.02mg.mL-1时对羟自由基的清除率达到77.7%。     

富硒葡萄中硒多糖的分离纯化及抗氧化活性

本文以克瑞森(小粒)富硒葡萄为原料，通过提取、分离纯化得到硒多糖提取物(selenium polysaccharide,sKGP)，并对其理化性质、结构特征及抗氧化活性进行了研究。采用超声波辅助酶法提取，用二乙氨基乙基交联葡聚糖凝胶A-25(DEAE-SephadexA-25)层析柱分离纯化得到高纯度硒多糖组分，通过紫外光谱、液质、傅里叶红外、扫描电镜等对其活性官能团及其结构进行鉴定，并对其抗氧化活性指标进行了分析。结果表明：sKGP硒含量为(0.642±0.038)mg/kg；纯化后sKGP-3几乎不含核酸、蛋白质等；sKGP-3由鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和果糖组成，摩尔比为0.172:0.743:0.718:0.082:4.540:0.093;sKGP-3具有Se=O、SeH结构和多糖的典型特征峰；sKGP-3主要呈片状和丝状，属于非晶态。体外抗氧化活性评估表明，纯化前sKGP具有比同质量浓度多糖(grape polysaccharide,KGP)更高的抗氧化活性，sKGP的总抗氧化能力为8.499μmol/mL,DPPH自由基、羟自由基、ABTS⁺     

南瓜硒多糖的制备表征及活性分析

对南瓜多糖进行硒化修饰,并对南瓜硒多糖的体外抗氧化和抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-231生长等活性进行研究。以提取、分离、纯化的南瓜多糖为前体物,用Na2SeO3硒化修饰制备南瓜硒多糖,并用紫外光谱、红外光谱、原子荧光光谱、热重分析对产物结构进行表征,采用邻苯三酚自氧化法、水杨酸法、四甲基偶氮唑蓝比色法测定其清除超氧阴离子自由基（O2－•）、羟自由基（•OH）的能力以及对人乳腺癌细胞MDA-MB-231生长的抑制作用。结果表明：制备产物结构中含有Se＝O键和Se-C键,即实现了南瓜多糖的硒化。南瓜硒多糖对O2 － ·、·OH的清除作用显著强于南瓜多糖,与样品量呈正相关;南瓜硒多糖对人乳腺癌细胞MDA-MB-231生长有抑制作用,比南瓜多糖具有更好的抑制效果。     

荸荠中硒的赋存形态及分布研究

研究了湖北恩施所购买的荸荠中硒的赋存形态、分布及含硒大分子的提取分离技术。采用不同的浸提液提取荸荠中的蛋白质,水提取荸荠中的多糖,并测定它们的含量,用微波消化法消化,原子吸收分光法测各组分中的含硒量。结果表明,蛋白硒是荸荠中硒的主要赋存形态,其占总硒含量的50.45%;蛋白质组分中,以醇溶性蛋白质结合的硒量最多,占总硒含量的38.66%;也有部分硒和多糖结合。     

双孢菇蛋白粉废料中多糖的分离纯化及抗氧化活性研究

目的:分析双孢菇蛋白粉废料中多糖组分及抗氧化活性。方法:以双孢菇子实体提蛋白后残渣为材料,采用超声波热水浸提,Sevage法去蛋白,D101大孔树脂除色素和醇沉的方法制备粗多糖,通过DEAE-52层析柱对粗多糖进行分离纯化。通过扫描电镜(SEM)、红外光谱(IR)等方法对纯化后多糖进行理化特性鉴定;采用清除DPPH、超氧阴离子、ABTS自由基实验,以及对H₂O₂处理的酵母细胞的保护作用实验评价其抗氧化活性,并对H₂O₂氧化损伤的酵母细胞上清液中的T-SOD、MDA、GSH-Px三种酶活性进行检测。结果:从双孢菇粗多糖中分离纯化到三种组分,分别命名为ABPS-Ⅰ、ABPS-Ⅱ和ABPS-Ⅲ。研究显示,ABPS-Ⅲ清除DPPH自由基能力最强。ABPS-Ⅲ多糖的含量为89.12%,SEM特征呈现六面体结构,IR分析结果显示其具有明显的糖类化合物的特征。ABPS-Ⅲ清除DPPH自由基、超氧阴离子、ABTS自由基的EC₅₀值分别为1.85、1.48、1.30 mg/mL。对氧化损伤酵母细胞保护实验结果显示,ABPS-Ⅲ可显著提高氧化损伤酵母细胞的存活率,在浓度为25 mg/mL时,保护率达到了42.58%;酶活性检测结果显示,添加ABPS-Ⅲ后,与氧化损伤组相比,酵母细胞上清液中T-SOD和GSH-Px的活力分别显著提高了337%和102%(p<0.01),MDA含量则显著降低了35.17%(p<0.05)。结论:双孢菇多糖ABPS-Ⅲ具有较强的抗氧化活性。     

拟目乌贼肌肉多糖酶法脱蛋白工艺优化及体外清除自由基能力

以加酶量、酶解温度、pH值、酶解时间为影响因素,以蛋白脱除率和多糖损失率为评价指标,通过正交试验优化拟目乌贼肌肉多糖酶法脱蛋白工艺,并与三氯乙酸法、等电点法脱蛋白效果进行比较。同时对脱蛋白多糖的体外清除自由基能力进行研究。结果表明,拟目乌贼肌肉多糖脱蛋白最佳工艺条件为:加酶量3.0 g/100 m L、酶解温度53℃、p H 8.2、酶解时间1.5 h。此条件下蛋白脱除率为89.43%,多糖损失率为1.78%,优于三氯乙酸法和等电点法。清除自由基结果显示,多糖质量浓度为10 mg/m L时,酶法、三氯乙酸法和等电点法得到的脱蛋白多糖对羟自由基清除率分别为45.72%、38.72%和25.18%,相应的IC_(50)值分别为12.44、16.37、34.64 mg/m L;对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基的清除率分别为68.00%、30.08%和23.10%,相应的IC50值分别为7.62、16.71、28.96 mg/m L。3种脱蛋白方法所得拟目乌贼肌肉多糖清除自由基效果依次为:酶法三氯乙酸法等电点法。     

马尾松花粉多糖硫酸酯化前后清除活性氧自由基能力的比较

目的：对松花粉多糖硫酸酯化前后清除超氧阴离子自由基（O2^-·）和羟自由基（·OH）的作用进行比较。方法：用荧光分光光度法检测松花粉多糖及其硫酸酯体外清除O2^-·和·OH的作用。结果：松花粉多糖硫酸酯化前后对活性氧自由基均有一定的清除作用,酯化后对O2^-·的清除能力增强（P〈0．01）,对·OH的清除能力降低（P〈0．01）。