流式细胞仪快速检测酸奶中乳酸菌含量

目的建立一种使用流式细胞仪检测酸奶中乳酸菌含量的快速检测方法。方法吸取稀释后样品匀液100μL加入20 mL试管中,30 min内使用流式细胞仪检测。经过光电倍增器过滤和检测,荧光脉冲的密度和高度被记录下来并被换算为细菌的个数。结果与国标法相比,仪器检测时间约缩短了3 d,试验结果表明流式细胞仪检测结果与国标结果 R值均在1以下。结论流流式细胞仪法与国标平皿菌落计数法的结果具有很高的一致性。采用流式细胞仪对酸奶中的乳酸菌进行快速检测,培养时间为由48 h缩短至13 min,大大提高了检测速度,对于乳制品生产企业来说,意义重大。     

基于流式细胞术的保加利亚乳杆菌活性检测方法应用研究

【背景】对于发酵乳、饮料中的乳酸菌数量,国家的规范性文件GB 19302-2010《食品安全国家标准 发酵乳》对乳酸菌数做了明确的限量,即乳酸菌数要≥106CFU/mL(g),以此来控制其产品质量。其中活的乳酸菌的活性更强,在人体消化系统环境中生存能力更强,人体在摄入后,到达肠道的数量会更多。【目的】基于流式细胞术的保加利亚乳杆菌活性检测方法,对现今售卖模式下的含保加利亚乳杆菌饮料中活性菌进行实时监测。【方法】 利用SYTO?24与PI双染色法对发酵乳饮料中的保加利亚乳杆菌的活性检测,并模拟现有售卖模式下发酵乳制品在其验货或销售等常温保存阶段保加利亚乳杆菌活性的变化进行监测。【结果】 在商超验货等常温放置时间在五个小时内,活性乳酸菌的数量级不会有显著性变化。【结论】 流式细胞术法能够对保加利亚乳杆菌活性有效检测,且能够单样品检测时间短,适合商品的快速检测和放行。由此可见,该方法对于需要快速放行的液体产品具有广阔的应用前景。     

基于流式细胞术的保加利亚乳杆菌活性检测方法的应用研究

目的采用流式细胞术对现今售卖模式下的含保加利亚乳杆菌饮料中活性菌进行实时监测。方法利用SYTO~?24与碘化丙锭(propidium iodide,PI)双染色法对发酵乳饮料中的保加利亚乳杆菌的活性检测,并对模拟现有售卖模式下发酵乳制品在其验货或销售等常温保存阶段保加利亚乳杆菌活性的变化进行检测。结果同一样品,流式细胞术检测活性保加利亚乳杆菌结果与平板计数法结果在同一数量级内。在商超验货等常温放置时间在5h内,活性保加利亚乳杆菌的数量级不会有显著性变化(P0.5)。结论该方法能够对保加利亚乳杆菌活性有效检测,且能够缩短单样品的检测时间,适用于商品的快速检测和放行。     

流式分析技术快速定量检测牛乳中大肠杆菌O157:H7

建立一种基于流式分析技术的快速定量检测牛乳中大肠杆菌O157:H7的方法。用偶联有异硫氰酸荧光素的大肠杆菌O157单克隆抗体对大肠杆菌O157:H7进行特异性标记,通过优化抗体反应条件,建立流式检测方法,然后对磷酸盐缓冲溶液（phosphate buffer saline,PBS）和人工污染牛乳样品中不同浓度的大肠杆菌O157:H7进行定量检测。本研究建立的流式检测方法的在PBS中的检测范围为2.57×103～1.12×108?CFU/mL,灵敏度达到2.57×103?CFU/mL。将所建立的流式检测方法应用于牛乳样品检测,当人工污染牛乳样品中大肠杆菌O157:H7的浓度在2.31×104～1.48×108?CFU/mL之间时,流式检测方法与平板计数方法检测结果基本一致,方法的灵敏度为2.31×104?CFU/mL,检测时间为35?min。该方法能快速、定量地检测出牛乳样品中的大肠杆菌O157:H7,在食源性致病菌的快速筛查和监控中具有重要的应用价值。     

基于PI荧光图像计数的乳制品荧光性质分析

为分析添加PI染料时乳制品中不同的荧光成分如酪蛋白、黄油、维生素B1、维生素B2、维生素C等对荧光图像观察的影响,探究了不同乳制品及其成分在PI染色观察条件下的荧光性质,并以酿酒酵母为目标菌,研究了10种乳制品中酿酒酵母PI荧光图像计数结果。结果表明,酪蛋白、黄油、维生素B1、维生素B2、维生素C等成分及10种乳制品在发射光615 nm均可产生荧光,但不影响PI染色的酿酒酵母荧光计数的观察结果。使用荧光显微镜对添加105~107 CFU/mL酿酒酵母菌液的10种乳制品进行PI染色计数,并将荧光图像计数结果与平板计数结果进行比较。其中经荧光图像计数后得到的菌液浓度对数值分别在5.69~5.93、6.18~6.28、7.13~7.21之间,对应平板计数结果的对数值分别5.49~5.63、6.02~6.06、7.02~7.06之间,二者结果一致。使用 PI 进行荧光图像计数时,乳制品荧光虽然存在但不会对酿酒酵母荧光图像观察与计数造成影响。     

荧光定量技术快速检测生乳中磺胺类药物残留

目的 利用荧光定量技术分析检测生乳中磺胺类药物残留。方法 取生乳空白样品进行加标回收试验(磺胺噁唑13.5 μg/L、27 μg/L;磺胺喹噁啉5 μg/L、10 μg/L;磺胺嘧啶0.82 μg/L、1.64 μg/L),样品经过简单的处理后15 min就可以得到实时分析结果。结果 分析结果显示回收率均在82.18%～118.40%;批内、批间变异系数均低于15%,最低检测限为5 μg/L,与国标方法(GB/T 22966-2008)相对比,结果完全符合。结论 该方法具有操作简单、价格低廉、检测时间短、良好的检测效果和结果准确的优点,具有对大批量乳制品的快速检验和质量验收的推广潜力, 能为生乳的检测工作和品质评价提供科学参考。     

流式细胞术快速检测生乳中细菌总数

研究了应用流式细胞术检测生乳中细菌总数的方法。实验对生乳采用酶法消化蛋白质颗粒、高速离心脱脂的方式来消除大颗粒物质对流式检测的影响。并对菌体进行热处理,使其能被荧光性染料碘化丙锭染色。经过前处理的乳液进入流式细胞仪分析、计数。结果表明,流式细胞术与平皿菌落计数法呈正的直线相关(P<0.01),相关程度为显著相关(r=0.9360)。该方法极大的缩短了检测时间,检出限为104/mL。     

基于RT-PCR与平板计数法对比分析发酵香肠发酵过程中的乳酸菌数

为快速、准确检测发酵香肠发酵过程中乳酸菌数的动态变化，以自然发酵为对照组，植物乳杆菌F16为发酵剂制作发酵香肠，同时以植物乳杆菌CICC：6238为标准菌株进行标准品的制作，采用实时荧光定量PCR（RT-PCR）技术定量分析发酵香肠发酵过程中的乳酸菌数，并与传统计数方法作对比。结果表明：本方法所建立的标准曲线相关系数R2≧0.99，扩增效率为90%～100%，符合RT-PCR的检测要求；乳酸菌数呈先上升后下降趋势，定量结果与平板计数变化趋势相同，且在各取样点，因存在死亡细胞的DNA，故荧光定量所得结果高于平板计数1lg（CFU/g）左右。利用平板计数和荧光定量数值得出两者间的线性方程y = 0.8116x + 0.4254。任取1批发酵香肠做验证试验，根据线性方程所得活菌数与平板计数值之间的相似度达94%以上，说明可用线性方程预测乳酸菌活菌数。本试验所建立的RT-PCR技术为定量监测发酵香肠发酵过程中乳酸菌的动态变化提供一条快捷途径。     

一种快速检测乳与乳制品中单核细胞增生李斯特氏菌的方法

研究一种可以快速富集乳与乳制品中单核细胞增生李斯特氏菌的方法,用于缩短乳与乳制品中单核细胞增生李斯特氏菌的检测时间,提高方法检出限。通过对样品缓冲液种类及浓度的选择,微孔滤膜材质和孔径的选择,样品中大分子干扰物质方式的去除方法选择,洗脱液种类及浓度的选择,敏感性和特异性试验,确定乳与乳制品快速富集单核细胞增生李斯特氏菌条件,并将该方法与国标方法进行对比验证实验,确定其准确性和灵敏性。结果表明,用5 mL洗脱液(7 mL 0.02 mol/L PBS+3 mL李氏增菌肉汤LB_3),得到样品富集待测液,用于乳与乳制品中单核细胞增生李斯特氏菌的快速检测效果最佳。建立了最佳的乳与乳制品中单核细胞增生李斯特氏菌的快速检测方法,使单核细胞增生李斯特氏菌检测时间从4～7 d缩短至60 min,敏感性和特异性较好。     

HPLO法测定发酵乳中Y-氨基丁酸条件的优化

本文优化了乳酸菌发酵乳中7-氨基丁酸（GABA）的HPLC检测方法。以三氟乙酸．水溶液为提取液,通过60℃水浴、10000r／min离心10min等方法去除样品中的杂质,对乳酸菌发酵乳制品中的GABA进行提取。通过调整流动相的洗脱方式、流动相比例与pH、柱温等条件,使用专用氨基酸分析柱、恒温柱温箱、自动进样器和仪器自动衍生程序,建立了一种高效快速检测发酵乳制品中GABA的方法。该方法对GABA的检出限LOD（S／N=3）为0．005gg／mL（质量浓度）,定量限LOQ（S／N=10）为0．02gg／mL（质量浓度）。线性范围是0．005-500lag／mL（质量浓度）,相关系数R2=l。该方法具有准确度高、快速、环保、经济等特点。采用该方法对功能食品样品、红曲米样品、乳酸菌发酵液样品中的GABA进行检测,均能得到满意的效果,证明该法具有较广泛的适用性。     

125th Anniversary Review: Bacteria in brewing: The good,the bad and the ugly

Beer is a beverage that is produced in a multistage process, where some stages of that process are intentionally influenced by microorganisms, while at other stages of the production process microorganisms are actively discouraged. Most of the intentional microbial activity is facilitated by yeast; however bacteria also play an influential role in beer production. This paper will describe the beneficial role of bacteria in the beer production process (the Good), but will also pay due attention to the negative influences bacteria might have on the quality of beer as a commodity (the Bad), and the properties of beer that have given it the status of an inherently safe food for human consumption with regards to disease‐causing bacteria (the Ugly). Copyright © 2013 The Institute of Brewing & Distilling     

SBR生物脱氮反应器中活性污泥菌相变化研究

对20LSBR生物反应器处理高氨氮废水的活性污泥菌相进行了初步研究,成功地分离出了硝化菌、反硝化菌和异养菌,测定了工艺过程中各种成分和活性污泥细菌浓度的变化,为进一步研究活性污泥的活性,提高SBR生物脱氮效率奠定了基础。     

菌落总数检测技术研究进展

菌落总数作为判定食品被污染程度标志,具有重要卫生学意义。该文详述菌落总数国家标准检测方法及近年来菌落总数快速检测方法进展,并对今后检测方向进行展望。     

啤酒酿造中腐败细菌的研究

通过对较快有效的检测方法的比较以及模拟染菌实验对啤酒酿造炽的腐败菌进行总结。建立了快速有效的腐败细菌培养与检测的方法,尤其是改进了厌氧菌的检测方法,研究中还发现污染细菌后的发酵过程中的ＰＨ下降迅速,降糖加快,最终得到的啤酒中双乙酰、乙醛、异戊醇、异丁醇和总酸偏高,而正丙醇,丁酸乙酯含量偏低。     

Interactions among lactic acid starter and probiotic bacteria used for fermented dairy products

Interactions among lactic acid starter and probiotic bacteria were investigated to establish adequate combinations of strains to manufacture probiotic dairy products. For this aim, a total of 48 strains of Streptococcus thermophilus, Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, Lactococcus lactis, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei, and Bifidobacterium spp. (eight of each) were used. The detection of bacterial interactions was carried out using the well-diffusion agar assay, and the interactions found were further characterized by growth kinetics. A variety of interactions was demonstrated. Lb. delbrueckii subsp. bulgaricus was found to be able to inhibit S. thermophilus strains. Among probiotic cultures, Lb. acidophilus was the sole species that was inhibited by the others (Lb. casei and Bifidobacterium). In general, probiotic bacteria proved to be more inhibitory towards lactic acid bacteria than vice versa since the latter did not exert any effect on the growth of the former, with some exceptions. The study of interactions by growth kinetics allowed the setting of four different kinds of behaviors between species of lactic acid starter and probiotic bacteria (stimulation, delay, complete inhibition of growth, and no effects among them). The possible interactions among the strains selected to manufacture a probiotic fermented dairy product should be taken into account when choosing the best combination/s to optimize their performance in the process and their survival in the products during cold storage.     

产酸菌的分离纯化

着重研究粮食酒发酵中4类产酸菌的分离 ,其中己酸菌与丁酸菌同属梭状芽孢杆菌 ,为厌氧菌 ,醋酸菌为好氧菌 ,乳酸菌则微好氧 ,因此各自有不同的分离鉴定方法 ,其中己酸菌与丁酸菌分离方法相似 ,丁酸菌与乳酸菌的性能鉴定方法相似 ,其他则各有特色     

新疆传统香肠中抗李斯特菌乳酸菌的分离

香肠在贮藏末期,乳酸菌检出量很高,其中还有一些具有抑制其他微生物的乳酸菌。在北疆市场上抽到8批样品,真空包装后,将其贮藏在4℃条件下,分别在贮藏前后检测其理化指标。各样品的pH值、水分活度和盐分基本一致;香肠中微生物的生长也比较一致,初期乳酸菌水平比较低(102CFU/g),贮藏末期,乳杆菌占多数(107CFU/g),肠杆菌相对较低(105CFU/g)。这表明,乳酸菌具有相对的竞争优势。其中,贮藏前后,样品中均没有检出李斯特菌。抑菌圈试验发现,分离出的乳酸菌中有41%对李斯特菌有抑菌特性,经过进一步试验,发现大部分的乳酸菌不具有产细菌素能力,但这些乳酸菌仍然具有竞争优势,对于香肠的贮藏仍有积极的作用。     

分子印迹技术在致病菌检测中的应用进展

分子印迹技术是一种模拟酶-底物或抗体-抗原之间的相互作用,以目标物为模板,合成具有专一识别性能的人工受体的技术。前期研究对象多为农药、兽药等有机小分子及蛋白质类生物大分子。近年来,研究已拓展到超大“分子”——细胞,特别是细菌印迹在致病菌快速检测领域应用前景广阔。本文介绍了分子印迹技术的原理、细菌印迹模板的选择及印迹聚合物的制备方法,并总结了分子印迹技术在致病菌检测中的应用,并对其应用前景做出了展望。     

降胆固醇的乳酸菌筛选研究

采用半选择性培养基MRS,从发酵白菜、芹菜、酸辣椒、莴笋四种蔬菜中筛选出四株细菌,鉴定为乳酸菌,在MRS-CHOL培养基中对这些菌进行体外胆固醇降解效果的研究,在38℃培养条件下,培养5d后,测定胆固醇的降解率。本研究从四种菌株不同接种量、基质中不同的胆固醇的含量对胆固醇降解量的影响,得到不同的变化趋势图;并同时研究了培养基中pH值的变化及菌数的变化。     

己酸菌、窖泥与浓香型白酒之间的关系

己酸菌和窖泥与浓香型白酒关系密切,在一定程度上说,是它们在决定着浓香型白酒的质量及风格。就己酸菌与窖泥、己酸菌与甲烷菌、窖泥与清香、浓香、凤香等白酒之间的关系作了详细阐述,分析了浓香型白酒生产中窖泥退化的原因及防治措施,并就人工窖泥培养的配方、原料选择、工艺操作及管理等方面作了介绍。