C57BL/6小鼠胆结石形成中固醇载体蛋白2的mRNA水平和胆固醇饱和指数增高

目的观察C57BL/6鼠胆囊结石形成过程中肝固醇载体蛋白2(SCP2)mRNA水平及胆囊胆汁中胆固醇饱和指数的变化。方法C57BL/6鼠20只,分为结石组和对照组。对照组喂普通饲料,结石组采用1%的胆固醇饮食4周;RT-PCR方法检测肝SCP2 mRNA水平的变化;全自动生化仪检测胆脂,并计算胆固醇饱和指数。结果胆囊结石组肝SCP2 mRNA水平显著升高,胆汁胆固醇饱和指数亦显著增加。结论肝SCP2的表达及胆汁CSI的增高呈正相关。     

孕期胆固醇和氧化固醇与子代认知发育

胆固醇是大脑发育的重要物质基础,胚胎和胎儿发育需要母体持续转运胆固醇,氧化固醇是胆固醇的代谢物,包括胆固醇合成途径中的前体物和分结代谢过程中产生的代谢产物,可能与大脑功能密切相关。人群研究发现,孕妇血清/浆胆固醇水平与子代多动症、孤独症谱系障碍发病风险有关,但尚需进一步确证。     

固醇调节元件结合蛋白研究进展

脊椎动物细胞的脂代谢平衡受到一类重要的膜结合转录因子家族-固醇调节元件结合蛋白（sterol regulatory elementbinding proteins，SREBPs）的调控。SREBPs直接激活胆固醇、脂肪酸、甘油三酯合成和摄取的相关基因达30个以上。     

PCSK9及IDOL在姜黄素促进HepG2细胞摄取LDL-C中的作用

目的从分子水平探讨姜黄素的降脂机制,为姜黄素作为降脂药物的临床开发提供科学依据。方法本研究运用油红O染色、酶法测定细胞内胆固醇含量,荧光染色检测细胞胆固醇摄取,RT-Q-PCR及Western blot检测姜黄素对HepG2细胞内胆固醇代谢相关因子在RNA和蛋白水平的表达。结果姜黄素组的HepG2细胞内红色脂滴明显增多,且TC及FC含量增高。Di I标记LDL,姜黄素组HepG2细胞橙红色荧光高于对照组。姜黄素能升高SREBP2和LDLR的mRNA和蛋白水平的表达;降低PCSK9蛋白成熟体及IDOL蛋白表达。结论姜黄素可能通过下调PCSK9及IDOL的表达,进而减少LDLR降解,促进HepG2细胞摄取LDL-C。     

有氧运动及其联合饮食干预影响非酒精性脂肪肝患者血浆SREBP-1c、RBP4水平的研究

目的:探讨有氧运动、饮食控制对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者血清SREBP-1c、RBP4水平的影响。方法:将NAFLD患者共53例随机分为对照组(C)、运动组(E)、饮食控制组(D)和运动+饮食控制组(ED);另有12例健康自愿者组成健康对照组(N)。E组运动处方干预,D组饮食干预,ED组运动联合饮食干预。实验前后分别检测身体形态(BMI;WHR)和血液生化指标(SREBP-1c;RBP4;TNF-a等)。结果:1WHR指数实验后E组、DE组较实验前显著下降(P0.05);实验后DE组较C、E组显著下降(P0.05)。2血浆TG及LDL/HDL实验后E组、DE组较实验前显著下降(P0.05);实验后DE组血浆TG、E组和DE组LDL/HDL较C组显著降低(P0.05)。3血浆FINS水平及HOMA-IR实验后E、DE组较实验前显著下降(P0.05);实验后HOMA-IR指数E组和DE组较C组显著下降(P0.05)。4E组RBP4、D组SREBP-1c和DE组TNF-α、RBP4、SREBP-1c血浆水平实验后较实验前显著下降(P0.05);实验后E组SREBP-1c水平和DE组血浆RBP4、SREBP-1c水平较C组显著降低(P0.05)。结论:116周有氧运动、饮食控制以及有氧运动联合饮食控制,NAFLD患者血浆SREBP-1c、RBP4、TNF-α水平分别呈不同程度降低,IR缓解,脂质代谢紊乱改善,有利于NAFLD转归。2有氧运动联合饮食控制对NAFLD的干预效果更佳。     

固醇调节元件结合蛋白1c对骨骼肌细胞胰岛素受体底物1表达调控的影响

目的 探讨固醇调节元件结合蛋白1c（SREBP-1c）对大鼠骨骼肌细胞胰岛素受体底物1（IRS-1）表达调控的影响.方法 采用酶联合消化法取2～3 d SPF级雄性SD大鼠原代骨骼肌细胞,将原代细胞分为对照组（C）、对照＋胰岛素组（C＋I）、高脂组（PA）及高脂＋胰岛素组（PA＋I）.将表达SREBP-1c腺病毒转染L6细胞,根据感染复数（MOI）分为含绿色荧光蛋白阴性载体（GFP）组、MOI值为5、50、100、200组.将靶基因为SREBP-1c的干扰RNA （siRNA）转染L6细胞,并分为空白对照组、阴性siRNA组及SREBP-1c siRNA组.Western blotting和实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测SREBP-1c、IRS-1、蛋白激酶B（Akt）基因及蛋白表达,油红O染色法检测细胞内脂质沉积情况.多组资料比较采用方差分析,两两比较采用最小显著差异法.结果 与C组相比,PA组SREBP-1c基因和蛋白水平升高（分别为2.72±0.08比1.00±0.18,3.02 ±0.19比1.00±0.05,t=15.240、18.289,均P＜0.05）,IRS-1基因和蛋白水平降低（分别为0.71 ±0.04比1.00 ±0.05,0.82 ±0.04比1.00±0.04,t=-7.960、-6.052,均P＜0.05）,丝氨酸磷酸化IRS-1蛋白表达升高,丝氨酸磷酸化Akt（p-Akt）蛋白表达下降（t=20.987、-5.869,均P＜0.05）.与GFP组相比,MOI值为50、100和200组的SREBP-1c基因和蛋白表达呈剂量依赖性上升（均P＜0.05）,IRS-1基因和蛋白表达水平呈剂量依赖性下降（均P＜0.05）.与空白对照组和阴性siRNA组相比,SREBP-1c siRNA组SREBP-1c基因和蛋白水平降低,IRS-1蛋白表达升高（均P＜0.05）.结论 SREBP-1c可抑制骨骼肌IRS-1胰岛素信号通路,参与肌细胞胰岛素抵抗的发生.     

六味地黄汤对非酒精性脂肪性肝病大鼠SREBP-1c和LXR-α基因表达的影响

[目的]探讨六味地黄汤对非酒精性脂肪性肝病大鼠固醇调节元件结合蛋白(SREBP-1c)和肝X受体(LXR-α)的影响.[方法]选择雄性SD大鼠,随机分3组:正常组,六味地黄汤组(治疗组)和模型组.正常组喂养普通饲料,模型组和治疗组喂养高脂饲料建立非酒精性脂肪性肝病模型,治疗组并用六味地黄汤干预治疗;荧光定量RT-PCR检测各组大鼠SREBP-1c和LXR-α的基因表达.[结果]模型组大鼠SREBP- 1cmRNA和LXRαmRNA的相对表达均高于正常组(分别为t=2.361,P＜0.05和t=3.118,P＜0.01);与模型组相比,治疗组能显著降低SREBP-1cmRNA和LXR-αmRNA的表达(分别为t=3.816,P＜0.01和t=3.36,P＜0.01).[结论]六味地黄汤能降低SREBP-1c和LXR-α的基因表达,改善脂质代谢.     

多烯磷脂酰胆碱对大鼠非酒精性脂肪性肝病的防治作用观察

目的观察多烯磷脂酰胆碱对大鼠非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的预防作用.方法选用Wistar大鼠48只,随机分为正常组（14只）、模型组（14只）、预防组（10只）和治疗组（10只）.模型组大鼠在高脂饮食喂养12周成功诱导出NAFLD模型.预防组提前应用多烯磷脂酰胆碱胶囊干预4周,再加用高脂饮食处理12周;治疗组给予模型动物多烯磷脂酰胆碱胶囊治疗12周.采用Western Bloting法检测肝组织葡萄糖调节蛋白78（GRP78）和固醇调节元件结合蛋白1-c（SREBP-1c）表达.结果在12周时,与模型组比较,预防组和治疗组大鼠肝脏脂肪变程度减轻,血清ALT、AST、TG、FFA水平显著下降（P〈0.01）;正常组肝组织GRP78和SREBP-1c表达量分别为12.35±0.50和10.09±0.52,而模型组分别为40.67±1.72和34.67±1.54,预防组分别为17.97±0.89和15.73±0.58,治疗组分别为18.07±0.81和17.82±3.28（P〈0.01）;预防组与治疗组间以上各个指标比较,差异无统计学意义.结论多烯磷脂酰胆碱胶囊对单纯高脂饮食诱导的NAFLD大鼠有治疗作用,但预防性用药无明显效果.     

SCAP重组腺病毒对ATDC5细胞增殖和凋亡的影响

目的 构建固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白(SRREBP cleavage activating protein,SCAP)基因干扰(small interfering RNA,siRNA)和过表达重组腺病毒,观察其对ATDC5软骨干细胞增殖及凋亡的影响.方法 应用pAdEasyTM腺病毒载体系统构建重组腺病毒质粒pAd-SCAPsiRNA和pAdSCAP,在HEK293细胞中分别包装和扩增.RT-PCR和Western blot检测ATDC5细胞中SCAP的表达,流式细胞仪检测SCAP腺病毒对ATDC5细胞周期和凋亡的影响,Western blot检测凋亡相关蛋白Cleaved Caspase-3、p-JNK的表达.结果 成功获腺病毒siSCAP(滴度为2.5 × 1010PFU/mL)和Ad-SCAP(滴度为3.0×10n PFU/mL).RT-PCR和Western blot结果表明:siSCAP和Ad-SCAP能分别有效抑制和增强ATDC5细胞中SCAP的表达.流式细胞仪检测结果表明:与正常组和空病毒组比较,siSCAP腺病毒处理组S期细胞比例升高15.45％和16.07％ (P ＜0.05),Ad-SCAP组比例降低14.27％和13.45％(P＜0.05);siSCAP组细胞凋亡率降低13.10％和11.50％ (P ＜0.05),Ad-SCAP组升高10.51％和10.17％ (P ＜0.05).Western blot检测结果与流式细胞仪检测结果一致.结论 成功构建SCAP腺病毒;敲低SCAP能促进ATDC5细胞增殖并抑制凋亡;过表达SCAP则抑制增殖、促进凋亡.     

有氧运动对非酒精性脂肪肝大鼠肝组织雷帕霉素靶蛋白、核糖体蛋白S6激酶1和固醇调节元件结合蛋白1c表达的影响

目的 观察有氧运动对非酒精性脂肪肝大鼠肝组织雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、核糖体蛋白S6激酶1（S6K1）、固醇调节元件结合蛋白1c（SREBP-1c）表达的影响。 方法 选取健康雄性SD大鼠30只,按随机数字表法分为正常组、模型组和运动组。正常组喂食基础饲料,模型组和运动组均喂食高脂饲料,运动组大鼠进行12周跑台训练。3组大鼠均于实验12周后取材,肝脏称重,并进行肝组织苏木精-伊红(HE)染色观察和肝组织炎症活动度评分,同时测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)、谷草转氨酶(AST)和谷丙转苷酶(ALT)含量的变化,采用免疫印迹方法检测肝组织mTOR、S6K1、SREBP-1c蛋白的表达。 结果 正常组大鼠肝脏组织形态学基本正常,肝索排列整齐,肝小叶结构完整清晰,未见脂肪变性及炎症细胞浸润;模型组大鼠可见弥漫性肝细胞脂肪变性,肝索紊乱,炎性细胞浸润;运动组大鼠肝索排列较模型组整齐,肝细胞脂滴明显减少,炎症细胞浸润减轻。运动组大鼠肝组织炎症活动度评分显著低于模型组(P<0.01);模型组大鼠血清TC、TG、FFA、ALT、AST水平均显著高于正常组(P<0.01);运动组大鼠血清TC、TG、FFA、ALT、AST水平均显著低于模型组(P<0.01)。模型组大鼠肝组织mTOR、S6K1、SREBP-1c的蛋白表达分别(1.12±0.24)、(1.34±0.35)、(0.84±0.12),均显著高于正常组(P<0.01);运动组大鼠肝组织mTOR、S6K1、SREBP-1c的蛋白表达分别为(0.54±0.18)、(0.61±0.21)、(0.41±0.15),均显著低于模型组(P<0.01)。 结论 有氧运动可以发挥防治非酒精性脂肪肝的作用,其机制可能与mTOR/S6K1/SREBP-1c信号通路的抑制相关。