IL-24对乳腺癌细胞CXCR4表达及肿瘤细胞侵袭、迁移及凋亡能力的影响北大核心CSCD

目的:探究过表达IL-24对乳腺癌细胞CXCR4表达及肿瘤细胞侵袭、迁移及凋亡的影响与机制。方法:免疫组织化学染色(IHC)检测乳腺癌与癌旁正常乳腺组织CXCR4与其配体CXCL12表达,并分析其相关性;Western blot检测CXCR4在人正常乳腺上皮细胞MCF-10A及乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-453和MDA-MB-231中的表达;采用慢病毒稳转技术在乳腺癌细胞系MDA-MB-231中过表达IL-24,免疫荧光显微镜、RT-PCR和ELISA检测感染效率;将细胞分为5组:LV-IL-24组(感染过表达IL-24慢病毒)、LV-NC组(感染阴性对照慢病毒)、AMD3100组(采用CXCR4/CXCL12轴阻滞剂AMD3100进行培养)、LV-IL-24+AMD3100组(采用AMD3100进行培养的感染过表达IL-24慢病毒的细胞)、阴性对照组(正常培养的MDAMB-231细胞);Transwell、划痕实验和Annexin V-FITC细胞凋亡实验检测上述各组细胞侵袭、迁移及凋亡;Western blot检测各组细胞CXCR4、AKT与mTOR蛋白磷酸化水平及凋亡相关蛋白Bax与cleaved-Caspase-3表达。结果:CXCR4与CXCL12在乳腺癌组织中的表达均显著高于正常乳腺组织,且二者表达呈正相关;与MCF-10A细胞相比,CXCR4在乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-453及MDA-MB-231中表达明显增加(P<0.05),以MDA-MB-231最为显著(P<0.01)。转染过表达IL-24的慢病毒后,MDA-MB-231细胞IL-24 mRNA与蛋白表达均显著增加(P<0.05);与阴性对照组相比,LV-IL-24组、AMD3100组和LV-IL-24+AMD3100组细胞侵袭、迁移能力均显著降低(P<0.05),而凋亡率明显提高(P<0.05),LV-IL-24+AMD3100组变化最为显著(P<0.01);Western blot结果显示,与阴性对照组相比,LV-IL-24组、AMD3100组和LV-IL-24+AMD3100组细胞CXCR4、AKT与mTOR蛋白磷酸化水平显著降低(P<0.05),而凋亡相关蛋白Bax与cleaved-Caspase-3表达明显增加(P<0.05),LV-IL-24+AMD3100组变化最为显著(P<0.01)。结论:乳腺癌细胞中过表达IL-24可抑制CXCR4表达,通过下调PI3K/AKT/mTOR信号通路降低肿瘤细胞侵袭、迁移能力,促进其凋亡,联合使用CXCR4/CXCL12阻滞剂AMD3100可显著提高IL-24的上述抑癌效应。     

TET试验联合DCG对CHD的诊断效能

目的:探究运动平板(TET)试验与24 h动态心电图(DCG)对老年女性冠心病(CHD)的诊断效能。方法:选取郑州市骨科医院2017年3月至2019年3月老年女性疑似CHD患者95例,分别行TET试验、DCG诊断,以冠状动脉造影诊断结果为金标准,比较TET试验、DCG单独与联合的诊断效能、对冠状动脉病变支数诊断符合率。结果:TET试验与DCG联合诊断准确度(96.84%)、灵敏度(98.39%)高于TET试验(84.21%、77.42%)、DCG(81.05%、74.19%)单独诊断,漏诊率1.61%低于TET试验22.58%、DCG 25.81%单独诊断,差异具有统计学意义(P<0.05);联合诊断冠状动脉病变支数符合率高于TET试验、DCG单独诊断,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:TET试验联合DCG应用于老年女性CHD患者可提高诊断准确度、灵敏度,降低漏诊率,且对冠状动脉病变支数检出情况更优。     

非小细胞肺癌中与PD-L1和PD-L2表达相关的基因

背景程序性细胞死亡配体1(programmed cell death ligand-1,PD-L1)和配体2(programmed cell death ligand-2,PD-L2)与程序性细胞死亡受体1(programmed cell death protein-1,PD-1)的相互作用是一个介导免疫逃逸的免疫抑制检查点,因此是癌症中基于阻滞的免疫治疗的重要靶点。在非小细胞肺癌(nonsmall-celllungcancer,NSCLC)中,有必要对PD-1检查点阻滞反应生物学进行深入了解,并确定生物标志物以预测其对免疫疗法的临床反应。在本研究中,我们系统描述了NSCLC中PD-L1和PD-L2表达相关基因。方法我们进行了回顾性比较分析,来确定NSCLC中PD-L1和PD-L2 mRNA表达相关基因。为此,我们考察了肿瘤细胞系百科全书(Cancer Cell Line Encyclopedia,CCLE)数据库中肺–非小细胞(lung non-small-cell,Lung_NSC)和癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)和鳞状细胞癌(lung squamous cell carcinoma,LUSC)的可用数据集。结果通过对CCLE数据集Lung_NSC的分析确定了PD-L1和PD-L2之间的表达相关性。此外,我们发现了489个基因与PD-L1相关、191个基因与PD-L2相关,以及111个基因与二者均有表达相关性。在TCGA数据集LUAD和LUSC中对PD-L1和PD-L2也进行了表达相关研究。在LUAD中,我们发现了257个基因与PD-L1相关、914个基因与PD-L2相关以及211个基因与二者均有表达相关性。在LUSC中,我们发现了26个基因与PD-L1相关、326个基因与PD-L2相关以及13个基因与二者均有表达相关性。只有少数基因表达在CCLE和TCGA数据集中均表现为与PD-L1和PD-L2相关。涉及干扰素信号转导基因的表达尤其与Lung_NSC中的PD-L1、LUSC中的PD-L2以及LUAD中的PD-L1和PD-L2的表达相关基因汇聚。在LUSC,PD-L1的表达,以及PD-L2的表达(相比之下相关程度较小)与染色体9p24区的基因相关,表明染色体9p24拓扑相关结构域是LUSC中PD-L1表达特别重要的驱动力。对PD-L1和PD-L2的受体PD-1、分化群80(cluster of differentiation,CD80)和排斥导向分子B(repulsive guidance molecule B,RGMB)的表达相关分析表明,在LUAD中PD-1和CD80表达与PD-L1和PD-L2均相关。在LUSC中CD80表达与PD-L2相关。结论我们提出了与NSCLC中PD-L1和PD-L2 mRNA表达相关的基因特征,这可能对于了解PD-1检查点阻滞反应生物学和开发基于基因特征的生物标志物以预测免疫疗法的临床反应具有重要意义。     

灰毡毛忍冬LmC3H1基因的克隆及表达模式与绿原酸含量相关性分析

目的:以灰毡毛忍冬为材料,克隆对-香豆酸3-羟化酶(LmC3H1)基因,进行生物信息学和表达模式分析,结合绿原酸含量,研究推测灰毡毛忍冬LmC3H1基因的功能。方法:通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和RACE技术克隆LmC3H1基因的全长c DNA序列,对该序列进行生物信息学分析,并利用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和HPLC分别测定灰毡毛忍冬茎、叶及不同花期花中LmC3H1的相对表达量及绿原酸含量。结果:克隆得LmC3H1(Gen Bank:MN177695)基因,开放阅读框(ORF)长度为1 533 bp,编码510个氨基酸,推测其分子式为C_(2618)H_(4134)N_(718)O_(727)S_(22),相对分子质量为58 005.32,等电点8.92,为亲水性蛋白,定位于叶绿体中,具有跨膜区域LLLIPAVLFLISLVYPLI,含有细胞色素P450的保守结构域CYTOCHROME_P450(422-433 aa);Real-time PCR结果显示,LmC3H1在灰毡毛忍冬茎、叶及不同花期花有不同程度的表达,其中在花发育阶段,白色花蕾期相对表达量最高,花蕾初期及白色开花期次之;白色花蕾期花与茎、叶比,花的相对表达量最高,叶的最低;HPLC结果显示,从绿白色花蕾期到金黄色开花期绿原酸含量呈上升趋势,金黄色开花期含量最高,不同器官中,花中绿原酸最高,茎最低。结论:克隆得到灰毡毛忍冬LmC3H1基因,推测LmC3H1可能参与灰毡毛忍冬花绿原酸的生物合成。该研究为进一步研究该基因的功能及探究灰毡毛忍冬绿原酸生物合成和调节机制提供了依据,同时为遗传改良灰毡毛忍冬品质奠定了基础。     

越鞠丸联合盐酸氟西汀胶囊治疗抑郁症临床研究

目的:观察越鞠丸联合盐酸氟西汀胶囊治疗抑郁症的临床效果及对血清脑源性神经营养因子(BDNF)水平的影响。方法:纳入因抑郁症就诊的64例患者,随机分为对照组与治疗组各32例。对照组给予盐酸氟西汀胶囊抗5-羟色胺(5-HT)治疗,治疗组在对照组基础上联合越鞠丸治疗。比较2组治疗前后汉密尔顿抑郁量表(HAMD-24)评分、抑郁症状学快速自评量表(QIDS-SR16)、血清BDNF水平及总体疗效。结果:治疗前后比较,2组HAMD-24评分、QIDS-SR16评分均下降,血清BDNF水平升高(P<0.05),组间比较,治疗组2项评分下降更多,血清BDNF水平升高更多(P<0.05)。治疗后,治疗组总体疗效为90.63%,优于对照组的68.75%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:越鞠丸联合盐酸氟西汀胶囊治疗抑郁症,可更加有效减缓患者抑郁症状,升高血清BDNF水平,增加临床疗效,有效保护患者脑功能,值得临床推广。     

原发性高血压患者24 h动态心电图心率减速力与心率变异性的相关性研究

目的探讨原发性高血压(EH)患者心率减速力(DC)特点,分析其与心率变异性(HRV)各时域指标的相关性,以及对自主神经功能的评估价值。方法前瞻性选择2018年1月至2020年6月合肥市滨湖医院收治的78例EH患者,作为EH组。另选取同期体检的50位健康志愿者,作为对照组。2组均接受24 h动态心电图监测,比较2组DC值和HRV时域指标[窦性R-R间期标准差(SDNN)、差值均方根(RMSSD)和相邻R-R间期差值>50 ms心搏百分比(pNN50)];依据DC值进行猝死危险分层,将EH组分为高危组(DC≤2.5 ms)和非高危组(DC≥2.6 ms)比较2组HRV时域指标差异;分析DC与HRV各时域指标的相关性。结果EH组DC、SDNN、RMSSD、pNN50分别为(4.83±1.27)ms、(109.26±21.03)ms、(38.74±9.38)ms、(5.12±0.95)%,均明显低于对照组的(6.19±1.42)ms、(132.07±28.54)ms、(52.65±11.32)ms、(7.83±1.42)%,差异均有统计学意义(P<0.05);高危组DC、SDNN、RMSSD、pNN50分别为(2.42±0.07)ms、(87.39±10.23)ms、(32.57±8.15)ms、(4.26±1.02)%,均明显低于非高危组的(5.27±1.26)ms、(113.24±20.15)ms、(39.86±10.47)ms、(5.28±1.27)%,差异均有统计学意义(P<0.05);Pearson法分析显示,EH患者DC与SDNN、RMSSD、pNN50水平均呈正相关(r=0.637、0.652、0.709,P<0.05)。结论EH患者DC明显下降,且和HRV呈正相关,可协同作为自主神经功能和猝死风险的评估筛查指标。     

补肾活血化浊中药联合驱铜治疗对肝豆状核变性患者血清学、尿铜指标、精神神经症状、中医证型变化与疗程关系的影响

目的运用补肾活血化浊中药联合驱铜治疗肝豆状核变性患者,分析排铜期间血清学、尿铜指标的变化与疗程的相关性,探讨中药联合驱铜治疗最适宜的疗程。方法纳入80例肝豆状核变性患者,所有患者均予二巯丙磺酸钠联合中药综合排铜治疗8个疗程,分别于疗程开始前、第2、4、6、8疗程结束后复查患者血清、24 h尿排铜指标,同时对患者进行中医证候积分及运用改良Young量表进行精神神经症状评估,分析每位患者排铜期间血清学及24 h尿铜变化,中医证型及精神神经症状的变化,初步探讨中药联合驱铜治疗最适宜的疗程。结果补肾活血化浊中药联合驱铜治疗第4疗程至第6疗程,患者NEU及PLT较前均有所下降,且较治疗前比较差异有统计学意义(P <0. 05),至第8疗程,患者NEU及PLT较治疗前均明显减少,差异有统计学意义(P <0. 01)。患者第2、4、6、8疗程ALT、AST指标均较前改善(P <0. 05)。同时,患者ALB水平在排铜各疗程期间较前比较均无明显变化(P> 0. 05)。患者在排铜治疗第2、4、6、8疗程后改良Young量表积分较治疗前显著减少,且以第2、4、6个疗程改善作用更为显著(P <0. 05)。患者24 h尿排铜量于第6疗程达到高峰值(P <0. 01),后至第8疗程逐渐减少,比较差异有统计学意义(P <0. 05)。随着疗程时间延长,湿热内蕴证、痰瘀互结证患者数量较前减少,肝风内动证、肝肾不足证及脾肾阳虚证患者数量较前增多。结论补肾活血化浊中药联合驱铜治疗以第4～6疗程为宜。     

辨证施护对慢性肾小球肾炎患者的效果分析

目的探讨辩证施护对慢性肾小球肾炎患者的效果。方法将本院收治的124例慢性肾小球肾炎患者随机分为对照组和观察组,对照组62例予以常规护理,观察组62例予以辩证施护,比较护理干预前后两组患者的24 h尿蛋白定量、SCr含量变化情况。结果护理前,对照组及观察组患者的24 h尿蛋白定量、SCr含量比较,统计结果均显示无差异,均有P> 0.05。护理后,对照组及观察组患者的24 h尿蛋白定量、SCr含量均显著低于护理前,且观察组下降得更明显,均有P <0.05。结论在慢性肾小球肾炎患者中施以辨证施护,可有效改善患者的临床症状,具有十分重要的临床意义。     

益气逐瘀方对缺氧诱导乳鼠心肌细胞凋亡及miR-24/Bim通路的影响

目的研究益气逐瘀方(参元丹)对缺氧诱导乳鼠心肌细胞凋亡及miR-24/Bim通路的影响。方法分离并培养乳鼠心肌细胞,建立心肌细胞缺氧模型,Lipofectamine2000转染miR-24 mimic/inhibitor至心肌细胞,实验分为正常组、缺氧组、参元丹组、参元丹+miR-24 mimic组、参元丹+miR-24 inhibitor组,治疗组予参元丹含药血清干预。比色法检测心肌细胞培养基上清液LDH、CPK活性,MTT法检测心肌细胞存活率,Annexin V/PI双染流式细胞术检测心肌细胞凋亡,qRT-PCR检测心肌细胞miR-24、Bim mRNA表达。结果与低氧组相比,参元丹组、参元丹+miR-24 mimic组、参元丹+miR-24 inhibitor组均能显著降低细胞培养基上清液LDH、CPK活性(P<0.05),提高心肌细胞存活率(P<0.05),降低心肌细胞凋亡(P<0.05),升高心肌细胞miR-24 mRNA表达(P<0.05),降低Bim mRNA表达(P<0.05);治疗组之间比较,参元丹+miR-24 mimic组作用更显著(P<0.05)。结论益气逐瘀方参元丹能够减轻缺氧诱导乳鼠心肌细胞损伤及细胞凋亡,其作用机制可能与其上调miR-24表达,同时抑制其靶基因Bim mRNA表达有关。