海水养殖氮磷污染负荷对莱州湾东岸水质的影响

为定量分析莱州湾东岸海水养殖产生的营养盐负荷量及对近岸水域水质的影响,以大菱鲆、对虾和海湾扇贝为典型养殖生物,估算其产生的氮磷负荷量,其中大菱鲆和对虾氮磷负荷量采用竹内俊郎法计算,并考虑饵料流失量,海湾扇贝氮磷负荷量根据排泄速率计算,并分析了近岸水域营养盐浓度对海水养殖氮磷负荷量的响应。计算结果表明,海湾扇贝产生的氮磷负荷量最高,对虾产生的负荷量最小;1997~2012年间,莱州湾东岸海水养殖产生的氮磷负荷量呈缓慢增长趋势,其中海湾扇贝养殖产生的氮负荷量与近岸水域的溶解性无机氮浓度呈正相关关系,说明贝类养殖是近岸水域溶解性无机氮(DIN)浓度增加的重要影响因素。研究结果可为莱州湾东岸海水养殖管理提供理论依据。     

海水养殖氮磷污染负荷对莱州湾东岸水质的影响

为定量分析莱州湾东岸海水养殖产生的营养盐负荷量及对近岸水域水质的影响，以大菱鲆、对虾和海湾扇贝为典型养殖生物，估算其产生的氮磷负荷量，其中大菱鲆和对虾氮磷负荷量采用竹内俊郎法计算，并考虑饵料流失量，海湾扇贝氮磷负荷量根据排泄速率计算，并分析了近岸水域营养盐浓度对海水养殖氮磷负荷量的响应。计算结果表明，海湾扇贝产生的氮磷负荷量最高，对虾产生的负荷量最小；1997~2012年间，莱州湾东岸海水养殖产生的氮磷负荷量呈缓慢增长趋势，其中海湾扇贝养殖产生的氮负荷量与近岸水域的溶解性无机氮浓度呈正相关关系，说明贝类养殖是近岸水域溶解性无机氮（DIN）浓度增加的重要影响因素。研究结果可为莱州湾东岸海水养殖管理提供理论依据。     

磷酸酯淀粉对冷冻大菱鲆鱼肉保水效果的影响

以木薯淀粉为原料,利用酯化改性技术,采用不同时间和温度制备出磷酸酯淀粉;研究了磷酸酯淀粉对冷冻大菱鲆鱼肉的保水效果及其本身的冻融稳定性.结果表明:磷酸酯淀粉对冷冻大菱鲆鱼肉有明显妁保水效果和很好的冻融稳定性,其保水效果和冻融稳定性均随着取代度的增加即制备磷酸酯淀粉的反应时间增加和反应温度的提高而增强,磷酸酯淀粉可以应用于冷冻水产及其制品的抗冻剂.     

大菱鲆病原鳗弧菌生物学及分子特征研究

从山东沿海养殖发病大菱鲆分离了5株鳗弧菌。5株菌对大菱鲆有较强的致病性,LD50范围为2.32×101～4.03×102cfu/g鱼;5株菌分别属于O1、O2、O3血清型,菌株之间的16SrRNA基因序列相似性范围97.1%～99.9%;与国外报道的鳗弧菌的序列相似性范围为89.7%～99.9%。5株菌的生理生化特征与鳗弧菌标准菌株一致,能产生多种胞外酶和溶血素;都含有金属蛋白酶基因和溶血素基因,其中3株菌各含有一个67kb大质粒。病原菌对青霉素、苯唑青霉素、氨苄青霉素、先锋霉素Ⅳ、先锋霉素Ⅴ、先锋霉素Ⅵ、链霉素、强力霉素、洁霉素、万古霉素、灭滴灵等11种常用抗菌药物有抗性,只对新生霉素、呋喃妥因、利福平、新霉素等4种药物敏感。     

大菱鲆红体病虹彩病毒ATPase基因的克隆与序列分析

克隆了大菱鲆红体病虹彩病毒(TRBIV)的重要功能蛋白——腺苷三磷酸酶(adenosine triphosphatease,ATPase)基因的全部编码区及其上下游部分的核苷酸序列。经多序列比对和分析发现,TRBIV与GenBank中6种代表性虹彩病毒的同源性介于35％～98％之间。绘制出的包含TRBIV在内的14种虹彩病毒的系统发育树证实,TRBIV是一种新的鱼类虹彩病毒,其分类地位处在虹彩病毒科待指定病毒属内的真鲷虹彩病毒亚群和传染性脾肾坏死病毒亚群之间。     

基于群体感应抑制的丹皮提取物和茶多酚对冷藏大菱鲆的协同保鲜作用

本研究将具有群体感应抑制活性的丹皮提取物和茶多酚保鲜剂进行复合,应用于冷藏大菱鲆鱼块的保鲜,研究其协同保鲜效果。实验结果表明,经丹皮提取物和茶多酚复合保鲜处理的大菱鲆鱼块感官品质劣变缓慢,细菌菌落总数、pH值、挥发性盐基氮含量、硫代巴比妥酸含量、K值均显著低于丹皮提取物处理组、茶多酚处理组和对照组(P0.05)。复合处理组鱼肉的货架期比对照组延长约9 d,比丹皮提取物处理组延长6~7 d,比茶多酚处理组延长2~3 d,且对鱼肉颜色无显著影响(P0.05)。丹皮提取物与茶多酚复合具有协同保鲜效果,能够有效地减缓冷藏大菱鲆鱼块的腐败变质速率,保持鱼肉品质。     

不同水分活度降低剂对大菱鲆即食制品的影响

为了降低大菱鲆即食制品水分活度,延长制品保藏期,选择丙三醇、乳酸钠、麦芽糖醇3种水分活度降低剂,在单因素试验基础上,根据Box-Behnken原理设计三因素三水平响应面试验,建立二次多项数学模型,并进行保藏实验。以水分活度为指标,得到大菱鲆即食制品水分活度降低剂的最佳配比为丙三醇添加量4.1 mL/100 g、乳酸钠添加量1.5 mL/100 g、麦芽糖醇添加量4.0 g/100 g,在此配比下含水量40%的大菱鲆即食制品水分活度为0.781。将产品在37℃贮藏7 d后其菌落总数为4.04(lg(CFU/g))、TVB-N值为12.47 mg/100 g、TBA值为1.48 mg/100 g,均在国家标准限量范围内。说明利用水分活度降低剂能有效提高产品的保藏性能,延长产品的保藏期。     

大菱鲆鳗弧菌灭活疫苗生产工艺条件的优化

目的优化大菱鲆鳗弧菌VAM003株灭活疫苗的生产工艺条件。方法通过对大菱鲆鳗弧菌VAM003株培养基(TSB和LB)、培养基盐度(1. 5%、2. 0%、2. 5%、3. 0%、3. 5%NaCl)、接种量(5%、10%、15%)、发酵时间(6～12 h)进行筛选,采用最适发酵条件制备大菱鲆鳗弧菌VAM003株发酵菌液,分别加入不同终浓度的甲醛(0. 1%、0. 2%、0. 3%、0. 4%)灭活24、48、72 h,确定最适灭活条件。采用最适生产工艺制备2批大菱鲆鳗弧菌VAM003株灭活疫苗,并进行安全性及效力试验。结果大菱鲆鳗弧菌VAM003株最适发酵培养条件为:用含2. 5%NaCl的TSB培养基,在接种量10%条件下发酵培养10～12 h,活菌量达5×109 CFU/m L以上;最适灭活条件为:甲醛终浓度0. 2%灭活24 h。大菱鲆注射灭活疫苗后,全部健活,未出现临床症状,摄食、游姿及体色均正常,注射部位无红肿,内脏器官无病变;疫苗的免疫保护率达90%以上。结论成功优化了大菱鲆鳗弧菌VAM003株灭活疫苗规模化生产工艺条件,制备的灭活疫苗具有良好的安全性及效力,可用于大菱鲆鳗弧菌病的预防。     

大菱鲆疾病早期快速检测方法——胶体金免疫层析试纸的研制与建立

使用成分单一的牛血清白蛋白(BSA)为模拟病原,以胶体金标记兔抗血清(即大菱鲆免疫球蛋白多抗)作为检测示踪物,并分别将BSA和葡萄球菌A蛋白印记到硝酸纤维素膜上制成检测线和对照线,通过一系列工艺创制与组装配套,首次成功制备了一套完整的大菱鲆抗体快速检测试纸。采用大菱鲆抗BSA血清作为阳性样本,以健康大菱鲆血清作为阴性样本,用以检验试纸的性能,并与酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测结果相比较。结果表明:本试纸检测抗体的特异性与敏感性均很高,与ELISA方法相当,而且使用方便,不需专业技能和额外的试剂与辅助仪器设备,5 min内即可用裸眼获得观察结果,很适合于基层生产操作及户外调研使用。以该实验为基础建立起来的抗体检测试纸,亦可推广应用于其他病害抗体的检测,可为鱼类疾病早期发生提供简易、快捷和操作性强的诊断方法。     

HS/SPME-GC/MS法研究大菱鲆和南美白对虾冷藏中的典型TVB N组分变化规律

为研究不同水产品的典型挥发性盐基氮(total volatile basic nitrogen,TVB-N)组分在贮藏过程中的变化规律,本文首先优化顶空固相微萃取-气相色谱质谱联用(head space/solid phase micro extraction-gas chromatography/massspectrometer,HS/SPME-GC/MS)技术的萃取条件,然后探究大菱鲆和南美白对虾4℃冷藏过程中氨(ammonia,NH₃)、甲胺(methylamine,MA)、二甲胺(dimethylamine,DMA)和三甲胺(trimethylamine,TMA)等典型TVB-N组分的含量变化。结果表明:采用85 μm碳分子筛/聚二甲基硅烷(Carboxen/Polydimethylsiloxane,CAR/PDMS)萃取纤维,40℃萃取5 min,四种挥发性胺类物质的萃取效果最好,且四种物质一定范围内均呈良好的线性关系(R2 > 0.999),四种组分的相对标准偏差(RSD)为2.21%~5.64%,大菱鲆的平均回收率为86.20%~98.60%,南美白对虾的平均回收率为78.27%~108.78%,方法检测限为0.1~1 mg/100 mg,仪器检测限为0.003~0.029 mg/100 mg,该方法简便快捷,稳定性好且灵敏度高,可用于水产品主要挥发性胺类物质的检测。实际样品检测表明,大菱鲆和南美白对虾在冷藏过程中均未检测出MA和DMA;大菱鲆在冷藏过程中TMA含量在第7 d显著增长(p < 0.05),第13 d TMA含量达到23.94 mg/100 g。南美白对虾冷藏过程中NH₃含量变化显著(p < 0.05),第6 d达到39.59 mg/100 g。本研究结果为更加准确、深入地了解不同水产品冷藏过程中TVB-N组分的动态变化及其对品质的影响提供了新的参考和依据。