群体感应AHLs对大菱鲆体内温和气单胞菌致腐能力的影响

将温和气单胞菌(AS7)及添加不同种类的AHLs信号分子标准品(C4-HSL、C6-HSL和C8-HSL)的菌液接种于大菱鲆无菌鱼块中,通过测定其在4℃冷藏过程中新鲜度指标(感官评定、菌落总数、pH、K值、持水性)的变化,研究群体感应对温和气单胞菌体内致腐能力的调控作用。结果表明,在贮藏期间添加C4-HSL和C8-HSL信号分子标准品,能够明显促进温和气单胞菌的生长,且对鱼块pH、K值、持水性及其品质变化影响较明显;而添加C6-HSL对其新鲜度指标均没有显著影响,说明群体感应可以通过AHLs来调控温和气单胞菌致腐能力。     

养殖大菱鲆暴发性疖疮病的病原分离与组织病理研究

为探究大菱鲆Scophthatmus maximus疖疮病的病因及患病大菱鲆的组织病理学变化,从患病鱼体(体质量为180 g±10 g)分离到一株优势菌DLPJC01,经分子生物学鉴定为杀鲑气单胞菌无色亚种Aeromonas salmonicida subsp.achromogenes,并进行了人工感染试验。结果表明:该菌株对大菱鲆有较强的致病力,证实其为疖疮病病原;药敏试验结果显示,该菌株对庆大霉素、头孢曲松、链霉素、头孢噻肟和新霉素5种抗菌药物高度敏感,对复方新诺明、环丙沙星、卡那霉素等13种抗菌药物完全耐药;组织病理学观察发现,病鱼呈现典型的急性全身性感染,各组织中均可见大量细菌团块;肌肉组织呈急性化脓性肌炎,肌细胞及脂肪细胞坏死,中性粒细胞渗出;肝、脾、肾、鳃和肠道等组织呈多灶性或弥漫性坏死,坏死细胞的细胞核碎裂、核染色质边移。研究表明,大菱鲆疖疮病的病原菌杀鲑气单胞菌亚种为典型的全身性感染菌,肝、脾、肾、鳃、肠道和肌肉是其主要的靶器官或靶组织。     

雷霁霖

雷霁霖,海水鱼类养殖专家。1935年5月24日出生,福建宁化县人。1958年毕业于山东大学。中国水产科学研究院黄海水产研究所研究员。系统研究了22种海水鱼类的增养殖理论与技术,其中8种已实现产业化。20世纪60至80年代,率先突破了梭鱼等10多种鱼类的育苗工艺,相继构建起工厂化育苗技术和体系。90年代,创建了工厂化育苗新系统和新工艺,首次开辟了人工苗的放流增殖技术。率先从英国引进冷温型良种大菱鲆,突破了工厂化育苗关键技术,首创"温室大棚+深井海水"工厂化养殖新模式,迅速形成良种养殖大产业,5年累计创产值逾70亿元。获国家科技进步奖二等奖2项。出版专著7部,发表论文120余篇。2005年当选为中国工程院院士。     

用饲料酵母替代鱼粉对大菱鲆幼鱼生长及免疫机能的影响

分别用质量分数为0、15%、30%、45%、60%的饲料酵母替代饲料中0、17%、34%、51%、68%的鱼粉,配制成5种等氮、等能的试验饲料,分别记为Ⅰ(对照组)、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组。将195尾大菱鲆Scophthatmus maximus(9.02 g±0.15 g)随机分为5组,每组设3个重复,每个重复组放养13尾鱼。将试验鱼饲养于设有循环流水系统的水族箱(60 cm×40 cm×50 cm)中,用5种饲料投喂,每天投喂3次,投饲率为鱼体质量的3%～4%,以生长及免疫指标来评价饲料酵母替代鱼粉对大菱鲆幼鱼生长的影响。经过56 d的饲养,结果表明:Ⅱ组的增重率(275.30%)和特定生长率(1.91%/d)最高,但与对照组(235.66%、1.82%/d)无显著差异(P>0.05);Ⅱ组的饲料系数(1.34)最低,但与对照组(1.53)无显著差异(P>0.05);Ⅱ组(97.44%)和Ⅳ组(94.87%)的成活率均显著高于对照组(84.62%)(P<0.05),而Ⅴ组的成活率(74.36%)则显著低于对照组(P<0.05);鱼体的粗蛋白含量随着饲料酵母替代比例的增加而逐渐降低(P<0.05),粗灰分则逐渐升高(P<0.05);溶菌酶、超氧化物歧化酶和血浆中蛋白的含量随着替代比例的增加而减少,且当饲料酵母替代比例超过51%时,与对照组差异显著(P<0.05)。综合考虑大菱鲆的生长指标、形体指标、鱼体成分和免疫机能等因素,要获得最佳的养殖效益,大菱鲆幼鱼饲料中用饲料酵母替代鱼粉的比例以17%为宜。     

大菱鲆几个性状与生长性能的关系

为了研究大菱鲆的白化率、畸形率、存活率等3个性状与生长性状的关系,采用不平衡式巢式交配,通过人工授精技术,构建了66个全同胞家系。在初孵仔鱼第80天时,每个全同胞家系分别随机取样50尾个体,对其体长和体质量等生长数量性状进行测量和分析,并结合统计的白化率、畸形率和存活率进行各表型参数和性状间的相关分析,探讨了应用聚类分析方法确定生长性状选育指标的可行性。分析结果显示,大菱鲆生长性状选育和性能测定的适宜指标中,白化率与体长、体质量两两间均无显著相关(P0.05),畸形率与存活率呈极显著负相关(P0.01)。该聚类分析结果可以为大菱鲆速生苗种的选育提供参考依据。     

鳗弧菌油乳化二价口服疫苗免疫养殖大菱鲆的免疫应答及免疫效果的研究

以鳗弧菌M3和SMP1为细菌抗原制备了油乳化二价疫苗,用饵料包埋后连续7天口服免疫大菱鲆鱼,评价鱼的免疫应答和疫苗的保护效果.结果显示,乳化疫苗在鱼后肠刺激产生的溶菌酶和抗蛋白酶活性以及抗体水平均高于未乳化疫苗(P＜0.05);并且在乳化疫苗免疫的鱼血清检测到明显升高的M3抗体效价(P＜0.05).原位杂交结果显示,乳化疫苗免疫鱼的后肠IgM的产生水平高于未乳化疫苗免疫鱼.攻毒实验显示,乳化疫苗免疫的鱼对M3和SMP1的感染分别获得100%和50%的免疫保护率,而未乳化疫苗获得的免疫保护率分别为57.9%和0%.结果表明,鳗弧菌油乳化二价口服疫苗能引起大菱鲆后肠的非特异性和特异性免疫应答并有效地抵抗鳗弧菌的感染,适合用作水产口服鱼用疫苗.     

大菱鲆鱼皮多肽液的制备及其抗运动疲劳作用

利用热水水解法制备大菱鲆鱼皮胶原蛋白。以制备的胶原蛋白为原料,利用复合蛋白酶酶解法制备大菱鲆鱼皮多肽液,并利用单因素和正交试验对复合蛋白酶酶解大菱鲆鱼皮胶原蛋白的工艺进行优化,并对得到的大菱鲆鱼皮多肽液的抗运动疲劳作用进行研究。结果表明,复合蛋白酶酶解法制备大菱鲆鱼皮多肽液的最佳酶解工艺为:温度50℃,p H 6.5,酶用量0.08%,酶解时间8 h。在此工艺条件下大菱鲆鱼皮胶原蛋白的水解度为68.35%。小鼠负重游泳实验和抗疲劳生化指标结果表明大菱鲆鱼皮多肽液具有良好的抗运动疲劳能力。     

蛭弧菌在大菱鲆养成中的应用研究

[目的]用蛭孤菌促进大菱鲆的生长,提高存活率,消除养殖水体中的弧菌.[方法]采用20 d的换水周期,以不添加蛭弧菌的养殖池为对照组(B组),往水体中添加蛭弧菌的养殖池为蛭弧菌添加组(C组),以生产性的养殖池作为参照(A组),以成活率、增重率、体重平均日增长量、体长增长率、体长平均日增长量、肥满度为判断依据,确定蛭弧菌对大菱鲆生长的影响;对换水前后各组养殖水体中所含弧菌数进行检测.[结果]蛭弧菌添加组大菱鲆的生长指标和存活率显著高于生产组和对照组(P<0.05);与生产组相比,蛭弧菌添加组大菱鲆的成活率提高了13.23%,增重率、体重平均日增长量、体长增长率、体长平均日增长量、肥满度分别提高了663%、130.35mg、28.09%、31.82 μm、4.99.蛭弧菌添加组的弧菌数明显减少.[结论]蛭弧菌能够提高大菱鲆的成活率,促进其生长发育,并能有效控制养殖水体中弧菌数.     

养殖大菱鲆感染迟缓爱德华氏菌的分离、毒力基因及ERIC-PCR分析

为了调查辽宁省葫芦岛市养殖患病大菱鲆Scophthalmus maximus病原菌感染情况,选用迟缓爱德华氏菌Edwardsiella tarda特异性引物对分离菌株进行PCR鉴定,共分离得到22株迟缓爱德华氏菌。结果表明:迟缓爱德华氏菌毒力基因的PCR扩增显示,22株菌均含有kat B、fim A、gad B、esa V等基因;人工感染试验表明,22株迟缓爱德华氏菌感染并致大菱鲆累积死亡率均为100%;ERIC-PCR结果显示,迟缓爱德华氏菌模式菌株(ATCC15947)与分离株可分为2个基因型,分别标记为Ⅰ和Ⅱ型,其中22株迟缓爱德华氏菌分离株均为Ⅱ型,与ATCC15947菌株为Ⅰ型明显不同。本研究结果为养殖大菱鲆迟缓爱德华氏菌感染的防控提供了依据。     

基于电子鼻的冷藏大菱鲆品质变化研究

利用电子鼻技术检测不同贮藏温度下大菱鲆样品的挥发性气体变化情况,对所得数据进行主成分分析(PCA)、载荷分析(LA)和聚类分析(CA),并结合细菌菌落总数和挥发性盐基氮(TVB-N)含量变化进行分析,建立一种基于电子鼻的冷藏大菱鲆新鲜度判别方法。结果表明:电子鼻主成分分析、载荷分析和聚类分析能很好地区分大菱鲆0℃与4℃贮藏过程中的挥发性气味变化,气味发生变化的时间拐点分别是贮藏20 d和16 d;电子鼻分析结果与细菌菌落总数和TVB-N值变化预测的货架期终点基本一致。因此电子鼻技术可以用来判别大菱鲆冷藏过程中的新鲜度变化。