毒黄素对非小细胞肺癌A549细胞株作用的实验研究

目的 研究毒黄素不同浓度和不同作用时间对非小细胞肺癌A549细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法 分别取0.5、0.375、0.25和0.125 μmol／L毒黄素作用于A549细胞（实验组）,以不加毒黄素为对照组,分别培养24 h和48 h。采用CCK-8试剂盒、Annexin V-FITC／PI凋亡试剂盒检测A549细胞增殖抑制率和凋亡率。划痕实验对比0.125 μmol／L毒黄素组和对照组（0 μmol／L毒黄素）在12、24和48 h细胞迁移率。结果 0.5、0.375、0.25和0.125 μmol/L毒黄素组24 h细胞增殖抑制率分别为（93.51±3.69）％、（40.38±3.08）％、（23.54±2.58）％和（13.07±2.37）％,48 h为（90.53±3.58）％、（53.72±3.02）％、（34.44±3.10）％和（24.78±2.43）％。0.5、0.375、0.25和0.125 μmol/L毒黄素组24 h细胞凋亡率分别为（78.68±2.22）％、（43.66±2.53）％、（20.81±2.59）％和（6.25±0.96）％,高于对照组的（1.57±0.52）％;0.5、0.375、0.25和0.125 μmol/L毒黄素组48 h细胞凋亡率分别为（88.66±3.16）％、（59.86±2.81）％、（27.89±3.48）％和（9.91±1.33）％,高于对照组的（1.59±0.55）％。0.125 μmol／L毒黄素组12、24和48 h细胞迁移率分别为7％、11％和16％,低于对照组相应的14％、26％和39％。结论 毒黄素对A549细胞有明显增殖抑制和促凋亡作用,并呈时间和剂量依赖性,且可抑制A549细胞迁移活性。     

CD103+CD8+T细胞在结直肠癌组织中的浸润分布及其临床意义

[摘要] 目的:研究组织驻留CD8+T细胞（CD103+CD8+T细胞）在结直肠癌（colorectal cancer,CRC）组织中浸润程度及分布特征,分析其浸润程度与患者临床病理特征及预后的关系。方法:选用上海芯超生物科技有限公司的88 例结肠癌HColA180Su14和77 例直肠癌HRec-Ade180Sur-03 组织芯片,应用免疫荧光染色法分别检测CRC组织及相应癌旁组织中CD103+CD8+T细胞的浸润分布特征及程度,Wilcoxon 秩和检验比较CRC及癌旁组织中CD103+CD8+T细胞浸润程度,χ2检验分析CRC中CD103+CD8+T细胞浸润程度与患者临床病理特征的关系;Kaplan-Meier 生存分析CD103+CD8+T细胞浸润程度与患者预后的关系,拟合Cox 模型评价不同指标与患者预后的关系。结果: CRC组织中CD103+CD8+T 细胞浸润程度与癌旁组织比较差异无统计学意义（P>0.05）,有远处转移患者中CD103+CD8+T细胞高度浸润的比率显著低于无远处转移患者（P<0.01）,CD103+CD8+T细胞浸润程度与患者其他临床病理特征无明显相关（P>0.05）。Kaplan-Meier生存分析显示,CD103+CD8+T细胞高度浸润患者的OS较低度浸润患者显著延长（54.42% vs 25.00%,P<0.05）,多因素Cox 显示,病理分级（P<0.01）和CD103+CD8+T细胞高度浸润（P<0.05）均可作为CRC患者预后的独立影响因素。结论: CRC组织中CD103+CD8+T细胞浸润与预后相关,提示其在CRC发生发展过程中发挥重要作用。     

Runt相关转录因子2在人肾透明细胞癌组织的表达及其临床意义

目的探讨Runt相关转录因子2(RUNX2)在肾透明细胞癌(ccRCC)中的表达及其与患者预后和临床病理特征之间的关系。方法基于肾癌肿瘤基因组图谱(TCGA)数据, 分析RUNX2在癌和癌旁组织中的表达及其预后价值。采用多色免疫荧光标记(mIHC)技术分析RUNX2在癌和癌旁组织中的分布特征, 并结合临床资料进行χ2检验。单因素和拟合多因素Cox模型分析RUNX2及其他指标的预后价值。基于TCGA数据库, 探讨RUNX2与免疫细胞浸润的相关性。结果 TCGA数据分析结果显示, RUNX2在癌组织中的表达显著高于正常组织(P<0.001)。mIHC结果表明RUNX2在癌组织表达水平高于癌旁组织(Z=-2.123, P<0.05), 且其表达水平与患者总生存期呈负相关[P<0.01, 风险比(HR)=2.768, 95%可信区间(CI):1.120～6.838]。RUNX2表达水平与患者美国癌症联合委员会(AJCC)临床分期明显相关(χ2=4.505, P<0.05)。多因素Cox回归模型显示年龄(P<0.01, HR=1.068, 95%CI:1.024～1...     

Cystatin M在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的 了解cystatin M在乳腺肿瘤中的表达及其临床意义.方法 采用实时定量PCR检测52例乳腺肿瘤标本及邻近正常乳腺组织中cystatin M mRNA及内参GAPDH表达水平,分析cystatin M基因表达与临床病理参数的关系.结果 乳腺癌标本的cystatin M含量与其周围邻近的正常乳腺组织及良性肿瘤中表达cystatin M含量无统计学意义;但发生淋巴结转移的乳腺肿瘤标本的cystatin M则明显低于其周围邻近的正常乳腺组织(P＜0.05),也明显低于未发生淋巴结的乳腺肿瘤标本(P＜0.05);乳腺癌标本cystatin M表达水平与乳腺癌病人的雌激素受体状态(ER)及孕激素状态(PR)无关.结论 Cystatin M是一种监测乳腺癌是否发生转移的一种可靠的指标.     

实时荧光定量PCR检测MT2-MMP在肺癌中的表达及其临床相关性

目的建立实时荧光定量PCR检测肺癌组织中膜型基质金属蛋白酶2(MT2-MMP)基因表达的方法,并探讨MT2-MMP的临床相关性。方法肺癌组织及癌旁正常组织取自21例非小细胞肺癌手术患者。设计人MT2-MMP、内参照β-actin基因的引物及Taq Man探针,将MT2-MMP及β-actin基因扩增片段纯化后分别构建重组质粒,制备标准品。检测肺癌及癌旁正常组织中MT2-MMP及β-actin的基因表达水平,并分析其临床相关性。结果经测序验证,PCR扩增产物为MT2-MMP及β-actin基因的特异片段。MT2-MMP、β-actin基因表达灵敏度分别为600拷贝/ml、300拷贝/ml,线性范围分别为6×102~6×107拷贝/ml、3×102~3×107拷贝/ml,相关系数均为1.000,扩增效率分别为88.1%、86.2%,批间变异系数分别为0.40%~1.55%、0.59%~3.98%。MT2-MMP在肺癌组织中的基因表达水平显著高于癌旁正常组织(P<0.05),但与患者临床病理参数无相关性。结论成功构建了检测人MT2-MMP的实时荧光定量PCR方法,该法特异性好,灵敏度高;MT2-MMP可能参与肺癌的...     

组织因子在子宫颈病变过程中的表达及其与瘤内血管生成的关系

目的通过检测子宫颈上皮内瘤变和子宫颈鳞状细胞癌组织中组织因子表达和微血管分布,探讨组织因子在子宫颈病变过程中表达水平的变化及与瘤内血管生成的关系。方法采用组织芯片技术和免疫组织化学方法,分别检测子宫颈上皮内瘤变和子宫颈鳞状细胞癌组织中组织因子的表达和微血管分布。结果组织因子在正常子宫颈组织中均不表达,而在子宫颈病变过程中其表达水平显著上调（P〈0.0001）,瘤内微血管密度亦显著增加（P〈0.0001）;同时,子宫颈病变过程中组织因子的表达水平和瘤内微血管密度呈显著正相关（r=0.3705,P〈0.0001）,和患者年龄无关（P=0.7089）。结论组织因子参与子宫颈癌的发生与发展,并促进瘤内微血管形成,可作为一个潜在的子宫颈癌诊断和治疗的分子靶标并应用于临床。     

Distribution features of resident CD8+ T cells in human esophageal cancer tissues and its effects on the prognosis

<正>Objective To explore the distribution features of resident CD8⁺T cells infiltration in human esophageal cancer tissues and its clinical significance.Methods Data from the Cancer Genome Atlas database were retrieved,and the correlation between CD103⁺CD8⁺T cells and infiltration degree of conventional type 1dendritic cell(cDC1),conventional type 2 dendritic cell(cDC2),type 3 dendritic cell(DC3) was investigated.     

Foxp3在卵巢癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨叉状头-翅膀状螺旋转录因子p3（Forkhead box protein 3,Foxp3）在卵巢癌组织中的表达及其与预后的关系。方法 采用免疫组化染色法检测卵巢癌组织芯片中45例癌组织及7例正常卵巢组织的Foxp3表达。应用秩和检验比较不同病理类型卵巢癌Foxp3表达的差异;卡方检验分析Foxp3表达与临床病理参数的关系;Kaplan-Meier法分析Foxp3表达与卵巢癌预后关系;Cox比例风险回归模型评价影响患者预后的因素。结果 Foxp3阳性着色主要定位于细胞核。Foxp3表达与FIGO分期有关（P＜0.05）,与年龄、病理类型、分化程度、肿瘤长径、淋巴结转移等均无关（P＞0.05）。Kaplan-Meier法生存分析显示Foxp3低表达者（H-score≤90）中位生存时间（OS）为6183个月,显著高于高表达者（H-score＞90）的25.03个月（P＜0.05）。Cox比例风险模型显示,术后未化疗（HR=6.603,95％CI： 1.147～32.057）、FIGO分期较高（HR=3.861,95％CI： 1.427～10.417） 为预测卵巢癌不良预后的独立因素。结论 卵巢癌组织中Foxp3表达与FIGO分期相关,并可以作为卵巢癌预后判断的参考指标。     

地佐辛注射液对老年结肠癌患者手术后炎症因子的影响

目的观察地佐辛注射液对老年结肠癌患者手术后炎症因子、超氧化物歧化酶(SOD)及T淋巴细胞影响。方法将90例择期进行结肠癌腹腔镜手术的老年患者随机分为对照组45例和试验组45例。对照组给予1.5%~3.0%七氟醚持续吸入,瑞芬太尼4μg·kg^-1·h^-1静脉滴注;试验组给予1.5%~3.0%七氟醚持续吸入,地佐辛40μg·kg^-1·h^-1静脉滴注。观察2组患者的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、SOD、丙二醛(MDA)、T淋巴细胞亚群水平及药物不良反应发生情况。结果术后24 h,试验组和对照组的TNF-α分别为(16.28±3.21),(18.67±3.54)pg·L^-1,SOD分别为(97.82±7.03),(94.48±6.45)nU·mL^-1,MDA分别为(4.10±0.54),(4.72±0.61)mmol·L^-1,CD3^+分别为(69.35±2.53)%,(68.01±2.23)%,差异均有统计学意义(均P<0.05)。试验组和对照组的镇静评分分别为(2.54±0.66),(1.48±0.45)分,疼痛评分分别为(1.49±0.37),(3.20±0.59)分,差异均有统计学意义(均P<0.05)。对照组发生的药物不良反应以嗜睡、皮肤瘙痒和恶心呕吐为主,试验组发生的药物不良反应以嗜睡和恶心呕吐为主;试验组和对照组的药物不良反应发生率均为13.33%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论地佐辛注射液可有效降低老年结肠癌腹腔镜手术患者的免疫抑制,改善氧化应激反应,促进术后恢复,且安全性高。     

肿瘤相关巨噬细胞及CD8+/CD68+细胞比值是影响肺腺癌患者预后的独 立危险因素

目的：探讨CD68+ 肿瘤相关巨噬细胞（TAM）、CD8+ T 细胞、Foxp3+ Treg 细胞等在肺腺癌（LUAD）组织中浸润分布及 其与患者预后的关系。方法：收集2004 年9 月至2009 年4 月间在苏州大学附属第三医院手术切除的93 例LUAD 组织及78 例癌 旁组织,采用组织芯片（TMA）及多重免疫荧光（mIF）技术检测其中的免疫细胞浸润与分布,Wilcoxon 秩和检验比较癌与癌旁组 织、癌巢与间质中浸润水平的差异,χ2 检验分析其浸润水平及CD8+/CD68+细胞比值与临床病理特征的关系,Kaplan-Meier 法和 COX 模型分析影响患者OS 的潜在危险因素。结果：与癌旁组织比较,癌组织中CD68+ TAM、CD8+ T 细胞、Foxp3+ Treg 细胞浸润 水平均显著增加（均P<0.01）,间质CD68+ TAM、CD8+ T 细胞的浸润水平均显著高于癌巢（均P<0.01）。总CD68+ TAM、癌巢及间质 CD68+ TAM 浸润水平与淋巴结转移呈正向关联（均P<0.05）,癌巢CD68+ TAM 浸润水平与T 分期呈正向关联（P<0.05）,间质 CD68+ TAM 浸润水平与病理分级呈正向关联（P<0.05）;癌组织中CD8+/CD68+细胞比值与病理分级、淋巴结转移均呈负向关联（均 P<0.05）。Kaplan-Meier 生存分析显示,LUAD 组织中总CD68+ TAM、癌巢及间质CD68+ TAM 高浸润患者OS 均短于低浸润患者（P<0.05 或P<0.01）、癌组织中CD8+/CD68+细胞比值高患者OS 显著长于低比值患者（P<0.05）。多因素COX 模型分析示,LUAD 患者年龄、TNM 分期及癌组织中CD8+/CD68+ 细胞比值是影响患者预后的独立风险因素（P<0.05或P<0.01）。结论:高度浸润的 CD68+TAM与LUAD的进展、侵袭、转移和不良预后显著关联,而高CD8+/CD68+ 细胞比值是影响LUAD 患者OS 的独立保护因素。