野黄芩苷通过hedgehog信号通路抑制结肠肿瘤干细胞分化的研究

该文旨在研究野黄芩苷对结肠肿瘤干细胞体外和体内分化的影响,揭示野黄芩苷基于hedgehog信号通路的抑制结肠肿瘤干细胞分化的作用机制。用3D细胞培养法观察野黄芩苷对结肠肿瘤干细胞HT-29CSC体外生长的影响;用软琼脂克隆形成实验研究野黄芩苷对HT-29CSC细胞转化的影响;用胎牛血清诱导干细胞分化实验,研究野黄芩苷对HT-29CSC细胞体外分化的影响;用qRT-PCR法检测野黄芩苷对HT-29CSC细胞中Lgr5,c-Myc,CK20和Nanog mRNA表达的影响;用Western blot法检测野黄芩苷对HT-29CSC细胞中c-Myc,Gli1,Lgr5蛋白表达的影响。通过裸鼠皮下接种HT-29CSC细胞建立肿瘤干细胞体内分化成瘤模型,研究野黄芩苷对裸鼠体质量和HT-29CSC细胞分化成瘤的影响;用qRT-PCR法检测肿瘤组织中CD133,Lgr5,Gli1,Ptch1,c-Myc,Ki-67,CK20,Nanog mRNA表达水平;用Western blot法及免疫组织化学法检测肿瘤组织中c-Myc,Gli1,Lgr5,CD133,Ki-67蛋白表达水平。体外研究表明,野黄芩苷能够抑制HT-29CSC细胞生长、转化与分化,同时显著下调HT-29CSC细胞中Lgr5,c-Myc,CK20,Nanog mRNA水平和c-Myc,Gli1,Lgr5蛋白表达。动物实验表明,野黄芩苷显著抑制裸鼠皮下HT-29CSC细胞分化成瘤,并且下调肿瘤组织中CD133,Lgr5,Gli1,Ptch1,c-Myc,Ki-67,CK20,Nanog mRNA表达和c-Myc,Gli1,Lgr5,CD133,Ki-67蛋白表达。综上所述,野黄芩苷能够抑制结肠肿瘤干细胞的体外和体内分化,其作用机制在于下调hedgehog信号通路活性。     

中医药调控肿瘤干细胞的研究现状

肿瘤干细胞是导致肿瘤复发、转移、多药耐药的主要原因,靶向于肿瘤干细胞是治疗肿瘤的一种新途径。目前,肿瘤干细胞的靶向治疗尚处于探索阶段,还没有成熟的可以用于调控肿瘤干细胞功能的方法。中医药是我国肿瘤治疗的重要手段之一,具有一定的疗效,而实验研究也表明中医药对肿瘤干细胞存在一定的影响。因此,本文将对中医药调控不同肿瘤干细胞的研究现状作一综述。     

半枝莲通过Hedgehog信号通路抑制结肠肿瘤干细胞自我更新

目的:研究半枝莲对结肠肿瘤干细胞(CSC)自我更新的影响,从Hedgehog信号通路阐明其作用机制。方法:制备半枝莲乙醇提取物,从HT-29人结肠腺癌上皮细胞中分拣出结肠CSC,用Aqueous法,研究半枝莲对结肠CSC体外活性的影响,用干细胞球形成试验研究半枝莲对结肠CSC自我更新的影响。用qRT-PCR研究半枝莲对结肠CSC标记物基因CD133和Lgr5表达的影响,和对结肠CSC中Hedgehog信号通路基因Ptch1和Gli1表达的影响。结果:终浓度为125μg/ml、250μg/ml和500μg/ml的半枝莲乙醇提取物可以剂量依赖性地抑制结肠CSC体外活性,抑制结肠CSC自我更新,下调结肠CSC标记物基因CD133和Lgr5 mRNA水平,降低结肠CSC中Hedgehog信号通路基因Ptch1和Gli1 mRNA转录。结论:半枝莲可以抑制结肠CSC自我更新,其机制在于抑制Hedgehog信号通路的活性。     

牡蛎调控肠道肿瘤细胞维生素D受体信号通路的研究

目的:维生素D受体(VDR)信号通路在肿瘤的防治中起有重要作用,研究牡蛎对结肠肿瘤细胞增殖、侵袭、转化的影响,从VDR信号通路阐明牡蛎抗癌的机制。方法:制备牡蛎酶解产物,用Aqueous法研究牡蛎对SW480结肠癌细胞体外增殖的影响;用细胞Transwell侵袭试验研究牡蛎对SW480细胞侵袭的影响;用软琼脂克隆形成试验研究牡蛎对SW480细胞转化的影响;用qRT-PCR研究牡蛎对SW480细胞中癌基因c-Myc和cyclin D1表达的影响,以及对VDR信号通路基因VDR和E-cadherin转录的影响。结果:终浓度为100μg/ml、200μg/ml和400μg/ml的牡蛎酶解产物可以剂量依赖性地抑制SW480结肠癌细胞体外增殖、侵袭、转化,下调SW480细胞中c-Myc和cyclin D1 mRNA水平,抑制VDR和E-cadherin转录表达。结论:牡蛎具有良好的抗肠道肿瘤作用,其机制在于增强VDR信号通路的活性。