基于UPLC-LTQ-Orbitrap高分辨质谱的葛根芩连汤的化学成分分析

目的基于超高效液相色谱-离子阱-静电场轨道阱质谱(UPLC-LTQ-Orbitrap-MS)的分析方法鉴定葛根芩连汤中化学成分。方法采用色谱柱Dikma Endeavorsil C18(100 mm×2.1 mm,1.8μm),流动相为0.1%甲酸水(A)-乙腈(B),体积流量0.3 mL/min,梯度洗脱。质谱采用ESI源,正负离子模式分别采集一级、二级质谱数据。结果通过对照品指认、软件预测分析,结合文献报道,从葛根芩连汤中鉴定出67个化合物,包括黄酮类36个、生物碱类12个、三萜类及三萜皂苷类4个及其他15个。结论利用UPLC-LTQ-Orbitrap-MS系统阐明葛根芩连汤中化学成分,并初步归纳其各类主要化学成分的质谱裂解特点,为葛根芩根芩连汤的质量控制和作用机制研究提供了参考依据。     

基于高通量测序技术研究葛根芩连汤及其配伍对急性肠炎大鼠肠道菌群多样性的影响

研究葛根芩连汤对急性肠炎大鼠肠道菌群的影响,探讨葛根芩连汤及其配伍改善急性肠炎与肠道菌群的关系。雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组、葛根芩连汤全方组、全方去甘草组、全方去葛根组、全方去芩连组和芩连组,造模和给药前后观察大鼠的病理切片情况及检测指标。给药7 d后,选取24只大鼠粪便样本,利用Illumina Miseq平台进行高通量测序。从抗炎和药效指标来看,葛根芩连汤全方组、全方去甘草组、全方去葛根组、芩连组的作用最明显,与模型组比较P<0.05。alpha多样性与beta多样性显示,各组大鼠肠道菌群组成存在明显差异,与模型组比较,除全方去芩连组外均能下调急性炎症引起的菌群丰度和多样性的增加(P<0.05)。利用LEfSe分析挖掘差异菌属,结果显示双歧杆菌属Bifidobacterium等有益菌只出现在正常组中;与正常组相比,模型组乳酸杆菌属Lactobacillus显著减少(P<0.01),拟杆菌属Bacteroides、梭杆菌Flavonifractor和梭菌属Clostridiumsensustricto1上调(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,葛根芩连汤全方组、全方去甘草组、芩连组均可显著增加阿克曼菌属Akkermansia的数量(P<0.05),降低与肠道炎症疾病相关的梭菌属Clostridiumsensustricto1的数量;全方甘草组和全方去芩连组引起瘤胃菌科Ruminococcaceae的上调,但同时导致结肠细胞毒害的脱硫弧菌属Desulfovibrio富集;全方去葛根组引起变形菌门Proteobacteria及伯克菌目Burkhonderiales的上调。该研究表明葛根芩连汤可能是部分通过改善肠道屏障、调节炎症因子水平及肠道菌群的结构而发挥治疗急性肠炎的作用。     

HPLC法同时测定复方米诺地尔凝胶中米诺地尔和维A酸的含量

摘 要 目的：建立HPLC法同时测定复方米诺地尔凝胶剂中的米诺地尔和维A酸含量。方法: 色谱柱：Shim Pack VP ODSC₁₈柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相：甲醇和2%醋酸溶液进行梯度洗脱;检测波长：280 nm和350 nm;流速：1.0 ml·min^-1;柱温：35℃;进样量：10 μl。结果: 米诺地尔和维A酸分别在4.0～240.0 μg·mL^-1和0.05～3.00 μg·mL^-1的浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系（r分别为0.999 6和0.999 3）。米诺地尔和维A酸的平均回收率分别为99.56%和99.36%,RSD分别为0.42%和0.50%（n=9）。结论:建立的测定方法简便,可行,适用于同时测定复方米诺地尔凝胶剂中米诺地尔和维A酸的含量。     

基于UPLC-LTQ-Orbitrap-MS分析加味参芪地黄汤的化学成分

目的 采用超高效液相色谱-离子阱-静电场轨道阱质谱(UPLC-LTQ-Orbitrap-MS)技术分析鉴定加味参芪地黄汤中化学成分。方法 采用Warters ACQUITY UPLC HSS T₃ (2.1 mm ×100 mm,1.8 μm) 色谱柱,流动相：0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸乙腈溶液(B),梯度洗脱,流速为0.3 ml/min。质谱采用电喷雾(ESI)离子源及静电场轨道离子阱质量分析器,采集质谱碎片信息为正、负离子模式,通过与对照品的相对保留时间进行比对,并根据质谱碎片信息进行分析,同时,结合文献报道,实现对加味参芪地黄汤中化学成分的准确鉴定。结果 研究发现加味参芪地黄汤水煎剂采用UPLC-LTQ-Orbitrap-MS技术共鉴定出62个化学成分,包括13个芳香酸类、9个黄酮类、8个皂苷类成分、5个芳香胺类、3个酮酸类、2个酚类、1个芳香醌类及其他成分。结论 本研究所采用的鉴定分析方法高效、准确,可应用于加味参芪地黄汤中化学成分的鉴定分析,为其后期的药效物质基础作用机制提供重要的实验数据。     

基于定量蛋白质组学技术探究半夏泻心汤对慢性胃炎大鼠影响的作用机制

目的 应用定量蛋白质组学探究半夏泻心汤抗慢性胃炎的生物学基础。方法 实验大鼠分为正常组、慢性胃炎模型组、半夏泻心汤组,采用56%乙醇灌胃法,4周建立慢性胃炎模型,给药治疗后,取胃组织进行苏木素-伊红（HE）染色,观察各组大鼠胃组织病理损伤及改善情况,提取胃组织蛋白质,运用串联质谱标签（TMT）定量蛋白质组学研究各组之间的差异蛋白情况,采用蛋白免疫印迹法（Western blot）验证关键的差异表达蛋白。结果 从大鼠胃组织中鉴定出4 452个蛋白,其中模型组与正常组差异蛋白为318个。经半夏泻心汤干预后,与模型组相比,共有258个差异蛋白,这些差异蛋白主要富集于cell killing,nucleoid及hijacked molecular function等。京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集发现,作用涉及到三羧酸循环,steroid hormone biosynthesis,retrograde endocannabinoid等信号通路,同时还涉及磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）和核转录因子（NF）-κB信号通路。Western blot验证发现14-3-3 theta,干细胞因子（SCF）,肌腱蛋白C（TN-C）,半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）,细胞间黏附分子-1（ICAM-1）,线粒体丙酮酸载体（Mpc1）和免疫相关蛋白GTP酶4（GIMAP4）可能是该方治疗慢性胃炎的关键蛋白。结论 半夏泻心汤治疗慢性胃炎的作用机制涉及到能量代谢、激素调节、炎症反应及免疫过程,利用差异蛋白质组学寻找的靶点蛋白及其涉及的信号通路可能是半夏泻心汤治疗慢性胃炎的生物学基础。     

HPLC法测定复方维生素B6凝胶剂中维生素B6与醋酸氟轻松的含量

摘 要 目的：建立复方维生素B₆凝胶剂中维生素B₆与醋酸氟轻松的含量测定方法。方法: 采用HPLC法,色谱柱：Lichrospher CNC₁₈柱（250 mm×4.6 mm, 5 μm）;流动相：庚烷磺酸钠溶液（称取6.8 g磷酸二氢钾和1.0 g庚烷磺酸钠,加水溶解并稀释至1 000 ml）-甲醇-三乙胺（35∶65∶0.2）,用磷酸调pH至3.2;检测波长：238 nm;柱温：25℃;进样量：20 μl。结果: 维生素B₆在15.0～300.0 μg·mL^-1浓度范围内线性关系良好（r=1.0000）,平均回收率为99.65%,RSD为0.3%（n=9）;醋酸氟轻松在0.4～8.0 μg·mL^-1浓度范围内线性关系良好（r=0.999 0）,平均回收率为99.35%,RSD为0.85%（n=9）。结论:该方法简便,重复性好,测定的结果准确,可用于复方维生素B₆凝胶剂的含量测定。     

线上线下教学的有效衔接与融合探索

以药学专业分析化学课程为例,分析线上线下教学衔接过程中存在的问题、衔接要点,对理论部分及实验部分的教学衔接进行设计探索,以期实现线上线下教学的有效衔接,保证教学质量。     

疫情防控时期分析化学线上线下实验教学模式研究

分析化学是药学专业的重要专业基础课，又是一门实践性很强的学科，其中实验教学占有非常重要的地位。由于新冠肺炎疫情的反复流行，给教学带来一定的不确定性，单纯采用传统教学已不能适应时代发展的要求。因此，文章探索性地将线上线下混合式教学法应用于分析化学实验教学中，从实验教学方式、教学内容及实验考核、建立比较完善的课程评价体系，对分析化学课程的实验教学进行改革创新，以期为探索分析化学实验教学新模式提供参考。