芍药甘草汤的历史沿革与现代研究

芍药甘草汤最早见于张仲景《伤寒杂病论》,由白芍和甘草(炙)等比例配伍而成,具有养血敛阴、调和肝脾、缓急止痛之功效,用于血虚津伤和筋脉失濡所致的腿脚挛急、脘腹疼痛。被历代医家推崇并沿用至今,并且拓展出了应用范围。现代药理研究表明,芍药甘草汤具有显著的解痉、止痛、镇咳、平喘及抗炎等作用,用于治疗痉挛性疾病、疼痛性疾病、炎症性疾病、支气管哮喘及妇产科疾病等。笔者从芍药甘草汤的历史沿革与方义衍变、组方配伍分析、药理药效学研究、现代临床应用4个方面进行系统阐述,以期为该经典名方的现代研究开发提供理论依据和文献参考,并为其制剂的临床定位提供理论和实践支撑。     

铁皮石斛的PCR-RFLP鉴别方法

目的:建立铁皮石斛专有的分子鉴别方法。方法:通过对铁皮石斛及其近缘种石斛的叶绿体matk基因序列进行对比分析,根据鉴别位点设计特异的铁皮石斛鉴别引物,通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)技术进行鉴别。结果:本试验中鉴别引物可成功扩增铁皮石斛及其近缘种石斛,PCR产物为331 bp,铁皮石斛的PCR产物可被Tru9 Ⅰ限制性内切酶切开,而近缘种石斛不能被切开,可通过琼脂糖凝胶电泳成功鉴别。结论:本试验建立的PCR-RFLP鉴别方法可以鉴别铁皮石斛及其近缘种石斛。     

暹罗鳄鱼鳞胶原蛋白多肽对小鼠免疫功能的影响

目的 观察暹罗鳄鱼鳞胶原蛋白多肽对小鼠免疫功能的影响.方法 采用环磷酰胺为免疫抑制剂,获得免疫功能低下的小鼠动物模型.比较小鼠服用胶原蛋白前后,小鼠T淋巴细胞增殖功能、NK细胞的杀伤功能以及小鼠碳粒廓清能力.结果 胶原蛋白多肽对免疫功能低下小鼠T淋巴细胞的增殖功能、NK细胞的杀伤活性,均具有免疫增强作用（P ＜0.05）,并呈剂量依赖性.结论鳄鱼鳞胶原蛋白多肽具有正向调节小鼠免疫功能的能力.     

丁香掺杂染色问题及检测方法研究

目的：4-甲基咪唑为焦糖色素制备过程中的一副产物,通过建立4-甲基咪唑的快速检测方法,控制丁香中花梗染焦糖色素后掺入样品。方法：采用高效液相色谱-质谱联用法,色谱柱为PhenomenexLuna C18（2 mm×150 mm,3μm）,以甲醇-0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱,流速0.3 mL·min^-1,柱温30℃;质谱使用电喷雾离子源,正离子模式下检测。结果：4-甲基咪唑在9.28~371.11 ng·mL^-1浓度范围内呈良好的线性关系（r=0.9994）,平均回收率96.91%,RSD=1.0%;160批次丁香中33批次检出4-甲基咪唑,表明上述样品涉嫌染色。结论：本方法快速、简便、准确,专属性强,灵敏度高,可作为丁香中4-甲基咪唑的定性定量检测方法,为控制丁香质量提供参考。     

胃复春胶囊通过NF-κB信号通路诱导胃癌细胞凋亡并抑制胃癌细胞转移作用

目的 研究胃复春胶囊对人胃癌细胞株MKN-49P的作用,为胃复春胶囊在抗消化道肿瘤方面的应用提供新的依据。方法 将SD大鼠随机分为2组,即对照组、胃复春胶囊组。胃复春胶囊组取胶囊内容物,以生理盐水混悬,按300 g/（kg·d）剂量ig给药,对照组大鼠ig 2 mL生理盐水,共5 d。末次给药后2 h,在无菌条件下,ip 10%水合氯醛（350 mg/kg）麻醉,腹主动脉取血,分离血清,经灭活处理后,置于—20℃冰箱保存备用。用不同质量浓度（0、2.5、5、10、20、30、50、80、100 μg/mL）的胃复春胶囊含药血清处理MKN-49P细胞,采用MTT法检测细胞活力。加入各质量浓度（25、50、100 μg/mL）胃复春胶囊含药血清,流式细胞术Annexin V/PI双染色检测细胞凋亡情况,Hoechst染色法检测细胞形态,细胞划痕实验测定细胞的迁移能力,Western blotting法检测信号传导与转录激活因子（STAT）蛋白、核转录因子-κB（NF-κB）信号通路及与细胞凋亡相关的蛋白表达情况。结果 胃复春胶囊含药血清能够剂量和时间相关地降低MKN-49P细胞的活力,并可诱导MKN-49P细胞凋亡。Hoechst染色显示细胞膜通透性增强;细胞划痕实验结果显示,与对照组（0 μg/mL）相比,不同浓度胃复春胶囊含药血清（25、50、100 μg/mL）可浓度相关性地抑制MKN-49P细胞的迁移。MKN-49P细胞经过25、50、100 μg/mL胃复春胶囊含药血清分别处理24 h后,MKN-49P细胞中STAT3的磷酸化减弱,NF-κB信号通路相关的蛋白表达量下调,抗凋亡蛋白表达量下降而促凋亡蛋白表达量增加。结论 胃复春胶囊含药血清能抑制胃癌细胞的增殖、诱导细胞凋亡,并显著降低细胞迁移能力,其作用机制推测与NF-κB信号通路有关。     

暹罗鳄鱼鳞胶原蛋白多肽对小鼠免疫功能的影响

目的观察暹罗鳄鱼鳞胶原蛋白多肽对小鼠免疫功能的影响。方法采用环磷酰胺为免疫抑制剂,获得免疫功能低下的小鼠动物模型。比较小鼠服用胶原蛋白前后,小鼠T淋巴细胞增殖功能、NK细胞的杀伤功能以及小鼠碳粒廓清能力。结果胶原蛋白多肽对免疫功能低下小鼠T淋巴细胞的增殖功能、NK细胞的杀伤活性,均具有免疫增强作用(P<0.05),并呈剂量依赖性。结论鳄鱼鳞胶原蛋白多肽具有正向调节小鼠免疫功能的能力。     

减肥保健食品中添加化学药物的快速检测方法研究

目的建立薄层色谱法和液相色谱-质谱联用法检测常见减肥类保健食品中添加的化学药。方法运用薄层色谱法快速初筛,液相色谱-质谱联用法定性鉴定的色谱光谱综合运用技术。结果建立的方法能够系统而快速地鉴别出添加的盐酸西布曲明、盐酸芬氟拉明、酚酞、士的宁、盐酸麻黄碱、氢氯噻嗪等化学药物成分。结论本方法准确可靠、简便易行,易于推广。     

胃复春胶囊提取物对人胃癌细胞系MGC-803细胞凋亡及Bcl-2/Bax表达的影响*

目的研究胃复春胶囊提取物对人胃癌细胞系MGC-803细胞的凋亡作用及其作用机理。方法 MGC-803细胞分别用不同浓度的胃复春胶囊提取物处理。CCK-8法检测细胞活力;Hoechst 33258染色观察形态学改变;流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期;Western blot检测Bcl-2、Bax、Caspase-3和Caspase-9的表达。结果 胃复春胶囊提取物（浓度为0～100 μg·mL-1）可以浓度和时间依赖性地降低MGC-803细胞的活力。Hoechst 33258染色显示胃复春胶囊提取物处理后的MGC-803细胞膜通透性增高。流式细胞检测结果显示胃复春胶囊提取物作用于MGC-803细胞后可以诱导细胞凋亡,细胞凋亡率分别为（20.4 ± 2.7）%（25 μg·mL-1）、（41.3 ± 6.2）%（50 μg·mL-1）、（68.8 ± 5.8）%（100 μg·mL-1）,明显高于对照组凋亡率（3.8 ± 1.6）%（0 μg·mL-1）（P<0.05）。MGC-803细胞经过不同浓度胃复春胶囊提取物处理24 h后,处于G0/G1期细胞比例升高,而G2/M期和S期细胞比例下降;免疫印迹实验结果表明胃复春胶囊提取物（浓度为25,50,100 μg·mL-1）处理组 MGC-803 细胞中cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9和Bax表达量升高,而Bcl-2表达量降低,且呈剂量依赖性。结论 胃复春胶囊提取物能抑制MGC-803细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制与下调Bcl-2基因的表达,上调Bax基因的表达以及增加Caspases活性有关。     

DESI-MSI技术在经典名方芍药甘草汤质量控制中应用研究

目的使用超高效液相色谱-二极管阵列检测器检测法(UHPLC-DAD)和解吸电喷雾电离-离子化质谱成像技术(desorption electrospray ionization-mass spectrometry imaging,DESI-MSI)对15批芍药甘草汤(Shaoyao-Gancao-Decoction,SGD)物质基准和对应实物进行分析,考察DESI-MSI在经典名方SGD质量控制中的优势。方法以SGD为研究模型,采用传统UHPLC-DAD法建立物质基准指纹图谱,并对SGD指标成分(芍药苷、甘草苷、甘草酸)含量、出膏率进行考察。同时,以芍药甘草汤对应实物冻干粉为研究载体,将其复溶后点样于定性滤纸,并固定于载玻片制成样品,以甲醇-甲酸(1 000∶1)为喷雾溶剂,体积流量3μL/min;扫描范围m/z 100～1 200;空间分辨率300μm;喷雾气(N2)压力0.5 MPa;离子源温度120℃,采用正负离子全扫描样本。结果 DESI-MSI法能检测到SGD指标成分芍药苷、甘草苷、甘草酸以及共有峰成分芍药内酯苷等。同时,DESI-MSI法还能检测到来自甘草、白芍的甘草皂苷G2、甘草皂苷J2、没食子酸、柠檬酸、对羟基苯甲酸等11种成分,并对其相对含量进行直观呈现,定性分析能力远强于UHPLC-DAD法。结论基于DESI-MSI技术无需进行复杂的样品前处理,可以在无对照品情况下进行复杂样品的定性、相对含量分析,灵敏度高,分析能力强,可以作为经典名方物质基准、对应实物及配方颗粒样品的质控研究方法。     

暹罗鳄鱼鳞酶解物体外免疫调节活性的研究

目的 探讨暹罗鳄鱼鳞酶解物的体外免疫调节活性.方法 通过测定暹罗鳄鱼鳞酶解物对THP-1细胞释放TNF-α的抑制的影响来实现.结果 表明鳄鱼鳞酶解物具有较好的抑制THP-1细胞释放TNF-α的活性的作用.结论 暹罗鳄鱼鳞酶解物有很好的免疫调节作用.