细胞因子与重症急性胰腺炎关系研究进展

重症急性胰腺炎(SAP)的发病机制尚未完全阐明,寻找更有效的方法阻断SAP的恶化和降低其死亡率一直是人们近年来研究的热点.目前研究表明,细胞因子在SAP的发病过程中起到很重要的作用,包括促炎细胞因子如白细胞介素(IL)-1、IL-6、IL-8、IL-12、IL-15、IL-18和肿瘤坏死因子(TNF),抗炎细胞因子IL-2、IL-4、IL-10、IL-11.现将各细胞因子与SAP关系研究进展情况综述如下.     

用抗细胞壁半乳糖—N—乙酰葡萄糖胺多糖的单克隆抗体鉴定炭疽杆菌(文摘)

本文报道了炭疽杆菌半乳糖—N—乙酰葡萄糖胺(Ga1-NAG)多糖单克隆抗体(McAbs)的制备及其特性鉴定,并用筛选的McAbs快速鉴定炭疽杆菌株。 作者用盐酸胍裂解法从粗制炭疽杆菌细胞壁中提取Ga1-NAG多糖,免疫BALB/c小鼠。从融合细胞中,筛选出对Ga1-NAG多糖特异性高的McAbs 5G4和6G6,荧光素异硫氰酸标记,分析其特性。发现McAb5G4和6G6能与纯化的细胞壁、O-脂多糖和荚膜内完整生长细胞特异性结合,证明其为抗炭疽杆菌Ga1-NAG多糖的McAbs,为IgM类(入链)。ELISA发现,0.5mol半乳糖和乳糖分别能强烈抑制McAbs 5G_4和6G6与Ga1-NAG多糖结合,而N-乙酰葡     

肿瘤特异性凋亡基因对荷瘤小鼠基因治疗的实验研究

随着分子生物学研究的不断深入和人类基因组计划的完成，人类正在进入基因诊断和基因治疗的时代，特别是恶性肿瘤的基因诊断和基因治疗日益受到人们的重视。肿瘤的基因治疗虽然不能替代手术、化疗和放疗，但其可能对提高化疗、放疗的敏感性，减少肿瘤术后复发和转移具有一定的作用。近年研究发现，鸡贫血病毒(chicken anemia virus，CAV)VP3基因编码的一种蛋白质，     

微量快速检测HFRS病毒特异性抗体的自身血凝实验

目的 验证微量快速自身血凝实验用于检测紧肾综合征出血热（HFRS）病毒抗体的实用性。方法 采用直接玻片自身血凝试验检测临床诊断为HFRS病人全血中的特异性抗体，采用间接免疫荧光光法作平行对照。结果 检测HFRS病人全血54份，自身血凝实验49例（90．7％）为阳性，而间接免疫荧光仅45例（83．33％）阳性；用自身血凝实验检测90例正常人全血，其中89例不出现凝集。结论 检测HFR病人全血中病毒抗体的自身血凝实验是一种简便，微量，快速的试验诊断方法，非常适合基层医疗单位使用。     

肾综合征出血热病毒76－118株的反转录及聚合酶链反应扩增、鉴定的初步研究

用反转录和聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术扩增了肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）７６－１１８株ＭＲＮＡ３＇－端２３７ｂｐ基因片段。制备了长臂光敏氨基已酸生物素标记的２３７ｂｐ探针。经琼脂糖电泳和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹，生物素－亲和素系统杂交和显色，对２３７ｂｐ扩增产物进行了特异性和灵敏性鉴定。ＰＣＲ技术与反转录技术相结合可用来对一些ＲＮＡ病毒进行研究和诊断，并能快速制备出质量较好的标记探针。     

Apoptin基因/壳聚糖纳米粒的制备及其对U937细胞凋亡的诱导作用

目的以羧甲基壳聚糖为基质材料,制备apoptin基因缓释微球,探讨其对U937细胞凋亡的作用。方法采用复凝聚法制备apoptin/壳聚糖微球,分别用光镜观察微球形态、内切酶研究其稳定性、DNA电泳阻滞分析apoptin/壳聚糖最佳比例、PCR测定apoptin基因作为复制摸板能力、用MTT法检测其抗肿瘤活性。结果壳聚糖与apoptin基因可形成稳定的微球,其直径在200～300之间,成球性较好,apoptin/壳聚糖微球P/N最佳质量比为5.5:1。微球能够有效防止DNA酶的降解作用,apoptin/微球载体中的基因仍具有DNA复制摸板功能,并能有效地转染U937细胞,转染48h可诱导U937细胞发生凋亡,从而抑制瘤细胞生长。结论apoptin基因与羧甲基壳聚糖可形成稳定的缓释微球,并能有效地转染肿瘤细胞,诱导肿瘤细胞发生凋亡。     

用鼠型单克隆抗体鉴定欧洲肾综合征出血热病毒抗原变异特点

本文报道了应用Puumala(Puu)病毒自然宿主—(?)鼠的脾细胞制备抗Puu单克隆抗体(McAb)的方法,并用所制的McAb对11株HFRS病毒的抗原变异进行了分析。Puu病毒为欧洲流行性肾病的病原体。近年来,尽管制备了许多抗汉坦病毒的鼠McAb,     

核酸杂交反应中影响因素分析

以光敏生物素标记的R3 cDNA克隆为模型,采用正交设计的方法,对影响核酸杂交反应的主要因素:杂交反应温度,反应时间,探针浓度及甲酰胺浓度作了综合性分析。当探针浓度为800μg/L,甲酰胺浓度为10mol/L,50℃杂交反应6h,可获得最高灵敏度(10pg)。     

肿瘤特异性凋亡基因诱导A375细胞凋亡信号转导机制研究

为研究肿瘤特异性凋亡基因(apoptin)在诱导人黑素瘤细胞A375凋亡中的信号转导机制,用含有apoptin基因的真核表达载体瞬间转染体外培养的人黑素瘤细胞A375;采用流式细胞术检测A375细胞的凋亡;以比色法检测caspase-8和caspase-3的相对活性;Western印迹检测凋亡细胞中细胞色素C的表达量。结果表明,Apoptin基因瞬间转染的A375细胞凋亡率明显高于其他各组(P<0·01);caspase-3的活性升高,但caspase-8活性没有明显变化;细胞色素C释放量明显增多。结论:Apoptin基因可能通过促进线粒体释放细胞色素C激活caspase-3,进而诱导人黑素瘤细胞A375凋亡。     

用Feulgen方法检测凋亡细胞的实验研究

细胞凋亡是生物体内的一个重要生命现象,发生在正常生理或疾病过程中.许多疾病特别是恶性肿瘤的发生和发展与细胞洲亡异常有关,所以对细胞凋亡的研究受到广泛关注.但目前常用于检测凋亡细胞的方法、设备和试剂要求比较高,在普通实验室较难开展.本文应用传统的DNA染色法检测凋亡细胞,取得较好的实验结果.现将研究结果报告如下.