PBL教学模式下法医毒物分析与法医毒理学阶段性合并实验教学探讨

法医毒物分析是以分析化学特别是现代仪器分析技术为基础,主要研究涉及法律问题的生物检材或其他检材中毒物的分离与鉴定,为确定是否中毒或中毒致死提供证据的科学。由于毒物分析技术的飞速发展,法医毒物分析成为法医学的组成部分,提高法医毒物分析的教学质量对培养合格的高等法医人才有着重要的意义。实践教学环节对法医学生的科学思维能力、实践探索能力、创新能力及综合素质的培养起着不可替代的作用。1国内相关研究的现状分析西安交通大学医学院法医系黄景峰等[1]就法医毒物分析实验教学进行改革,在2009年发表的教改论文中阐述了有选     

四聚乙醛在亚急性中毒大鼠部分组织中的分布

目的 建立生物检材中四聚乙醛气相色谱/质谱以及气相色谱-FID的分析方法, 考察四聚乙醛在亚急性中毒大鼠部分组织中的分布情况.方法 SD大鼠口服给药四聚乙醛 (40 mg/kg, 140 mg/kg, 280 mg/kg) 1周后麻醉处死, 心血、肝脏、胃组织、肾脏提取后检测, 对照组大鼠以生理盐水口服给药, 各对应组织器官样品为空白对照样.采用二氯甲烷液-液萃取, 气相色谱/质谱进行定性分析、气相色谱-FID定量分析生物检材中的四聚乙醛的浓度.结果 建立了生物检材中四聚乙醛的GC/MS及GC-FID分析方法.GC/MS分析方法最低检出限为0.1 ng, GC-FID分析方法在0.010.1 mg/mL范围线性良好 (R=0.9992) , 平均回收率大于75%.高、中、低剂量染毒后四聚乙醛在胃组织中的浓度最高, 而常见药物代谢的肝脏组织中浓度最低.结论 四聚乙醛在亚急性中毒大鼠体的含量分布情况为:胃组织>心血>肾脏>肝脏, 该方法操作简便快速, 检测灵敏度高, 干扰小, 适用于体内四聚乙醛含量的测定.     

生物检材中苯巴比妥的测定

目的 建立一种简便、快速、准确、可靠的方法检测生物检材中的苯巴比妥。方法 丙酮∶水(8∶2)对生物检材进行浸泡,然后在pH值为3~4条件下,采用乙酸乙酯进行提取分离,气相-质谱联用(GC-MS)对样品进行检测,使用总离子流图(TIC图)中苯巴比妥保留时间及质谱图中苯巴比妥的特征离子碎片定性,应用外标法进行定量。结果 该方法简单易操作,背景干扰小,分离效果好,分析速度快,用于苯巴比妥定性的保留时间为8.385min,苯巴比妥的特征离子碎片为m/z 204和m/z 232;以m/z 204为定量离子碎片,采用外标法进行定量,回收率为87.35%,相对标准偏差RSD为5.43%,最低检出限(LLOD)为0.005mg/mL。结论 该方法可用于法医毒物分析生物检材中苯巴比妥的检验,效果良好。     

UPLC-MS/MS法研究滇乌碱在大鼠体内组织的分布

目的 建立灌胃给药滇乌碱的大鼠中毒模型, 用高效液相色谱-串联质谱 (UPLC-MS/MS) 法测定大鼠血液及各组织中滇乌碱的含量, 研究滇乌碱在大鼠体内的分布情况.方法 将SD大鼠随机分为3组, 分别按2.2 mg/kg, 1.1 mg/kg和0.7 mg/kg剂量灌胃高、中、低剂量组大鼠, 给药2 h后处死, 迅速采取大鼠的心血、胃、小肠、肝脏、胰腺、肾脏、肺脏、脾脏、心脏、膀胱、睾丸和全脑, 液-液萃取法处理后, 用UPLC-MS/MS法测定各生物检材中滇乌碱的含量.结果 滇乌碱大鼠中毒模型给药剂量为1.1 mg/kg, 滇乌碱在大鼠体内分布由高到低的顺序为胃、小肠、肝脏、胰腺、肾脏、肺脏、脾脏、心脏、膀胱、睾丸、心血和大脑.结论 滇乌碱在大鼠体内分布广泛, 尤以胃、小肠和肝脏中含量最高, 该结论为黄草乌中毒的检验材料选取提供依据.     

法医毒物分析实验课形成性考核的实践与思考

目的建立并实施“法医毒物分析实验”形成性考核体系,提高教学质量.方法以法医专业2009级学生为研究对象,分对照组和实验组,在“法医毒物分析”实验教学中,对照组按照终结性考核进行教学,实验组学生实施形成性考核.结果实验组学生学习成绩优于对照组(P＜0.05).结论 “法医毒物分析”教学中开展形成性考核,有助于调动学生学习积极性,提高学生综合能力.     

水浸GC-MS法检测生物检材中的百草枯

目的 建立一种简便、快速、准确、可靠的水浸气相色谱-质谱联用法 (GC-MS) 检测生物检材中的百草枯.方法 根据百草枯的水溶性, 用水浸法对生物检材进行样品前处理, 用GC-MS对样品进行分离分析, 用总离子流图 (TIC图) 中百草枯的保留时间及质谱图中百草枯的特征离子碎片定性.结果 该方法样品前处理简单, 使用的有机溶剂少, 背景干扰小, 分离效果好, 分析速度快, 百草枯定性的保留时间为6.674 min, 百草枯的特征离子碎片为156 (m/z=156) ;方法回收率为91.42%, 日内及日间相对标准偏差RSD分别为4.83%及6.87%, 最低检出限 (LLOD) 为0.005 mg/m L.结论 该方法简便、准确、可靠, 可用于法医毒物分析生物检材中百草枯的检验.     

DA、5-HT及MAO在甲基苯丙胺和氯胺酮联合滥用依赖大鼠CPP效应中的表达量变化

目的观察DA、5-HT及MAO在甲基苯丙胺和氯胺酮联合应用致大鼠成瘾中的表达变化及其与依赖大鼠产生CPP效应的关系。方法随机将36只大鼠分为六组:正常对照组,甲基苯丙胺组(2 mg/kg),氯胺酮低剂量(15 mg/kg)组,氯胺酮中剂量(30 mg/kg)组,甲基苯丙胺+氯胺酮低剂量(2 mg/kg+15 mg/kg)组,甲基苯丙胺+氯胺酮中剂量(2 mg/kg+30 mg/kg)组,每组每天给予相应的药物,连续10 d,建立大鼠位置偏爱模型;ELISA检测DA、5-HT及MAO的表达。结果与正常对照组比较,给药组大鼠在伴药箱中逗留的时间均明显增多(P<0.01),成功建立位置偏爱模型。ELISA检测结果显示,在大鼠前额叶皮质、伏隔核、中脑腹侧被盖区中DA、5-HT及MAO的表达趋势基本相同;与正常对照组相比,MA组表达增强(P<0.01);与MA组相比,联用组的DA、5-HT及MAO表达均呈一致性降低(P<0.01)。结论 DA、5-HT及MAO表达水平降低与甲基苯丙胺和氯胺酮联合给药的依赖大鼠CPP效应没有显著提升有关。     

顶空气相色谱法对血中乙醇水平测定方法的探讨

目的建立一种简便、快速、准确、可靠的双柱双检测器,采用顶空气相色谱法对血中乙醇进行定性、定量分析。方法利用气体对挥发性物质的萃取原理进行样品前处理,顶空进样器进样,叔丁醇为内标物,用装有2根色谱柱(001通道色谱柱,DB-ALC2;002通道色谱柱,DB-ALC1)及2个氢火焰离子化检测器(FID1、FID2检测器)的气相色谱仪进行分离分析,用保留时间定性,内标标准曲线法定量。结果该方法线性范围为0.2~2.0 mg/mL,001通道线性回归方程为:Y=1.057 7 X+0.048 2,决定系数R2=0.999 05;002通道线性回归方程为:Y=1.039 5 X+0.046 5,决定系数R2=0.999 25。方法平均回收率为99.70%,001通道与002通道对样品测定结果的相对标准偏差(RSD)4%。结论该方法可用于法医毒物分析血中乙醇水平的检测及实验室能力认可中能力验证计划样品的测定,结果令人满意。