炎症性肠病发病机制及间充质干细胞治疗的作用与问题

文题释义： 炎症性肠病：是一类肠道慢性、特异性及复发性炎性疾病,其发病机制复杂,受到遗传、环境等多种因素的影响,尤其与自身免疫失调密切相关。 间充质干细胞的治疗作用：间充质干细胞是一群具有潜在自我更新能力和多元分化能力的异质基质细胞群,具有组织修复和免疫调节等功能,在多种疾病中,间充质干细胞的治疗作用已得到充分验证。 背景：近年来,炎症性肠病的发病率逐年增加,尚无良好治疗方案。间充质干细胞在治疗系统性红斑狼疮、心肌梗死、移植物抗宿主病等多项免疫相关疾病的研究中展现出良好的效果;同时,多项研究表明,间充质干细胞在炎症性肠病的治疗中拥有独特优势,因此关于间充质干细胞治疗炎症性肠病的研究逐渐成为目前的热点。 目的：总结间充质干细胞治疗炎症性肠病的现有研究,并对其应用前景和安全性进行展望。 方法：以“间充质干细胞,炎症性肠病,发病机制,治疗”及“mesenchymal stem cells,inflammatory bowel disease,mechanisms,treatment”分别作为中、英文关键词,在中国知网数据库、万方数据库及PubMed数据库对近20年间的相关文献进行检索,最终纳入符合要求的62篇文献进行综述。 结果与结论：间充质干细胞具有自我更新、组织迁移和多能性的能力以及强大的免疫调节作用,不仅在系统性红斑狼疮、心肌梗死、移植物抗宿主病等多种免疫相关疾病中表现出良好的治疗效果,同时在炎症性肠病中也拥有良好治疗表现,但目前用于临床的研究仍为少数,间充质干细胞治疗炎症性肠病仍面临安全性等多方面的问题。 ORCID: 0000-0001-5595-8257(黄文文) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

半自动纯化法分离纯化成年猪胰岛细胞的实验研究

目的探索大规模猪胰岛细胞分离纯化的方法.方法采用胶原酶消化法和Ficoll液不连续密度梯度离心进行分离纯化;采用双硫腙染色、AO-PI染色、胰岛素释放试验检测胰岛的纯度和活性.结果消化后平均获取的胰岛细胞团数量为（4 387±617）IEQ/g胰腺组织;纯化后平均为（3 192±756）IEQ/g胰腺组织;获取的猪胰岛细胞平均纯度为（60.15±2.35）%,活率为（80.00±0.47）%.结论所获得的胰岛细胞有较好的纯度和良好的生物活性,显示半自动纯化法分离纯化成年云南小耳猪胰岛细胞是成功可行的,可以满足进一步异种移植的研究需要,可为大规模分离纯化猪胰岛细胞提供技术支持.     

大肠杆菌表达抗原结合片段的策略

背景:抗原结合片段在大肠杆菌中表达量低是制约其大规模生产和应用的主要因素,通过对宿主细胞、表达载体、表达条件和纯化条件等进行改造与优化,将有可能获得基因工程抗体的高效表达.目的:总结并介绍抗原结合片断抗体在大肠杆菌中的表达和纯化的最新策略.方法:由第一作者用计算机检索中国期刊全文数据库(CNKI:1990/2010)和Medline数据库(1990/2010),检索词分别为"大肠杆菌,抗原结合片段,表达,纯化,抗体"和"Escherichia coli,Fab,Expression,antibody,purification",语言分别设定为中文和英文.从Fab抗体在大肠杆菌中表达方式及纯化2方面进行总结,对抗原结合片断抗体在大肠杆菌中最新的表达和纯化等方面进行介绍.结果与结论:共检索到125篇文章,按纳入和排除标准对文献进行筛选,共纳入30篇文章.结果表明抗原结合片段抗体在大肠杆菌中表达方式主要为细胞质表达和分泌表达,其纯化主要有金属离子螯和纯化和特异蛋白亲和纯化,抗原结合片断在大肠杆菌中表达的影响因素是多方面且相互关联的.目前研究对大幅提高抗原结合片断抗体在大肠杆菌中最新的表达量和最适纯化策略尚不一致.     

诱导性多潜能干细胞的研究进展及应用前景

背景：由于诱导性多潜能干细胞可以从患者的诸多细胞进行诱导,避开了干细胞研究的免疫排斥和伦理道德问题,且具有类似于胚胎干细胞的特征。 目的：综述诱导性多潜能干细胞研究进展及应用前景,并提出目前诱导性多潜能干细胞在诱导方法及效率、安全性、应用等方面许多亟待解决的问题。 方法：以“induced pluripotent stem cel s,efficiency,disease model,clinical application”为英文检索词,应用计算机检索Kjmed数据库中2003年1月至2013年6月发表的相关文章。纳入与诱导性多潜能干细胞研究相关的文献,排除重复性研究。 结果与结论：共检索到112篇,排除无关重复的文献,保留32篇进行综述。通过导入特定的转录因子可将成体细胞重编程为诱导性多能干细胞,转染效率低是诱导性多潜能干细胞技术的一个主要障碍。诱导性多潜能干细胞在建立疾病模型、研究疾病发病机制以及新药物的筛选和新治疗方法的探索方面有着巨大的应用前景,且诱导性多潜能干细胞也有较高的临床应用价值,但是,在诱导性多潜能干细胞应用于临床这条道路的探索过程中,还有许多亟待解决和深入探究的问题。     

肾上腺髓质素对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞MCP-1表达的影响

目的观察肾上腺髓质素（ADM）对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞（VSMCs）单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）表达的影响。方法体外培养大鼠主动脉VSMCs。实验分组：空白对照组（A组）;1×10^-7mol/L ADM组（B组）;1×10^-7mol／LAngⅡ组（C组）;1×10^-8mol／L ADM＋1×10^-7mol／L AngⅡ组（D组）;1×10^-7mol／LADM＋1×10^-7mol／LAng Ⅱ组（E组）。采用逆转录聚合酶链反应技术测定细胞中MCP-1 mRNA的表达量。结果C组MCP-1 mRNA的表达量高于A组（P〈0．05）。D组、E组MCP-1 mRNA的表达量低于C组（P〈0．05）。结论ADM对Ang Ⅱ诱导的大鼠主动脉VSMCs MCP-1的表达起明显的抑制作用,这可能是其发挥抗炎、心血管保护作用机理中的一个重要途径。     

持续性病毒感染

病毒的持续性感染是典型急性感染以外的一种感染形式,在这类感染中,病毒可在机体内持续数月、数年、甚至数十年,可以出现症状,也可以不出现症状而长期携带病毒,成为重要的传染源.持续性病毒感染的研究已成为病毒分子生物学研究的一个重要方面,了解病毒如何在宿主体内持续存在以及其致病的机理需要新的视角.目前关于持续性病毒感染的许多认识主要基于在过去一个世界中对急性病毒感染研究所积累起来的信息.     

甲型肝炎减毒活疫苗免疫小鼠后的体液和细胞免疫应答

减毒活疫苗进入体内在增殖的过程中，可以刺激T淋巴细胞分化，产生细胞免疫；使用甲型肝炎减毒活疫苗后发现，诱发的抗体阳转率往往低于疫苗保护率，推测疫苗引起的抗体应答是疫苗保护机制的一部分，而另外重要的一部分应该是细胞免疫。本研究拟在检测抗体反应的同时，观察疫苗免疫后T淋巴细胞免疫应答，探讨接种甲型肝炎减毒活疫苗后产生免疫保护的机制。     

云南省3551例先心病患者的ABO血型及性别分析

目的 分析云南地区先心病患者及正常个体的ABO血型分布,了解先心病与血型和性别的关系.方法 收集云南省昆明市延安医院2007年3月至2011年3月入院的先心病患者的病历资料,统计3 551名患者的ABO血型和性别的百分比,并分别与已经公布的2007年云南省人口血型分布和2005年云南人口性别分布进行对比.同时统计各种常见类型的先天性心脏病患者的ABO血型、性别分布情况,并进行统计学处理.结果 先天性心脏病患者的ABO血型分布与正常人的存在统计学差异(P＜0.05);不同类型的先天性心脏病患者间的血型无统计学意义(P＞0.05).先天性心脏病患者的性别分布与正常人的存在统计学差异(P＜0.05);不同类型的先天性心脏病患者之间的性别分布也有统计学意义(P＜0.05).结论 ABO血型与先天性心脏病的发生有关,A型和AB型患先天性心脏病的频率较高,血型因素可能是先天性心脏病的易患因素,但与发生何种类型的先天性心脏病无明显关系.性别与先天性心脏病的发生也可能有一定联系,女性较易患先天性心脏病,性别对患何种先天性心脏病也有影响.     

2007年至2008年昆明地区腹泻患儿轮状病毒非结构蛋白基因特征的分析

目的 探讨轮状病毒非结构蛋白(NSP4)基因的特征及变异情况.方法 在2007年和2008年昆明医学院第一附属医院儿科住院的96例秋冬季腹泻患儿中,随机选取轮状病毒阳性的12例(其中2007年6例,2008年6例)患儿粪便标本,采用RT-PCR扩增NSP4基因,并进行测序,测序结果 用DNAassist软件对核苷酸序列进行翻译,并用Clustal-mp软件与Genbank Datebase中的4株人RV(Wa、KUN、AU-1、Hochi)、3株动物RV(EW、OSU、SAll)和中国北京、上海、广州的流行株的NSP4序列进行分析比较.结果 (1)选取的2007年6份和2008年6份样本均可以扩增出NSP4的全长片段,测序表明:2007年6份样本中有5株属于Wa株,1株属于KUN株;2008年6份样本中也有5株属于Wa株,1株属于KUN株.10株Wa株与来自GenBank Database的4株人RV(wa、KUN、AU-1、Hochi)和3株动物RV(EW、OSU、SAll)同源性分别为96.3%、85.3%、84.7%、95.1%和57.7%、92%、82.8%,与中国北京、上海、广州的流行株同源性均在95%以上;2株KUN株与以上来自GenBank Database的标准株的同源性分别为85.3%、98.2%、82.8%、85.9%、60.1%、85.3%、94.3%,和其他地区流行株的同源性为85%左右; (2)以Wa株为参考,10株Wa株的NSP4基因变异发生在第34位氨基酸,第76位氨基酸,第141位氨基酸,第145位氨基酸,第161位氨基酸和第169位氨基酸;以KUN株为参考,2株KUN株的NSP4基因变异仅在第87位氨基酸和第140位氨基酸.结论 2007年和2008年昆明地区流行株NSP4基因为Wa组和KUN组,以Wa组为主.     

两个房间隔缺损家系的GATA4基因分析

目的探讨GATA4基因变异与房间隔缺损遗传的相关性.方法采集云南省心血管病医院心脏外科2个房间隔缺损（ASD）家系,共4名ASD患者和11名成员,选择GATA4基因编码区内4个可引起氨基酸改变的cSNP和GATA4基因附近的11个STR位点以及5个GATA4基因内STR位点,进行PCR和DNA测序分析.结果 D8S258、D8S552两个位点存在多态性,Q19E（rs1139240）、L39V（rs1139241）、P66A（rs1139244）和G377S（rs3729856）位点未发现多态性及突变.结论 D8S258、D8S552在本文人群中检测到多态但未检测到突变,4个cSNP位点未检测到突变。