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目的 应用分步克隆法构建人拓扑异构酶Ⅲ alpha(hTOP 3 alpha)真核反义表达载体,为进一步阐明其与控制细胞周期的相关基因ATM之间的相互作用,研究ATM的生物学功能奠定基础。方法 采用分步克隆法首先用Hind Ⅲ和EcoRI双酶切构建插入2.6kb的片段,再用EcoRI酶切插入另一1kb的片段,最终获得人拓扑异构酶Ⅲ真核反义表达的重组载体。结果 经酶切、测序鉴定,人拓扑异构酶Ⅲ真核反义表达载体构建成功。结论 为研究ATM基因与人拓扑异构酶Ⅲ的相互作用,阐明其生物学功能奠定了基础,同时为大片段的基因的表达载体构建探索了新的方法和途径。 相似文献
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常规染色体畸变分析法对AT细胞高辐射敏感性的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 研究毛细血管扩张性共济失调症(ataxia-telangiectasia,AT)患者皮肤的成纤维细胞系AT5BIVA(AT细胞)的高辐射敏感性。方法 以源于正常人皮肤的成纤维细胞系GM0639(GM细胞)为对照,用常规染色体畸变分析法,在AT细胞和GM细咆经60COγ射线0、1、2、3、4 Gy照射后,观察比较AT细胞和GM细胞之间染色体畸变率(CAF)的差异,并分别进行曲线拟合。结果 在0、1、2、3、4 Gy剂量下,AT细胞染色体畸变率明显高于GM细胞(P<0.05);AT和GM细胞染色体畸变率与剂量成正相关,均可拟合成剂量效应直线方程Y=a+bX,且AT细胞剂量效应直线回归方程斜率明显大于GM细胞(P<0.05)。结论 AT患者AT细胞的辐射敏感性显著高于GM细胞,具有高辐射敏感性。 相似文献
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胞质分裂阻滞微核法对AT细胞高辐射敏感性的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 研究源于毛细血管扩张性共济失调症(ataxia-telangiectasia,AT)患者皮肤的成纤维细胞系AT5BIVA(AT细胞)的辐射敏感性.方法本实验以源于正常人皮肤的成纤维细胞系GM0639(GM细胞)为对照,采用胞质分裂阻滞微核法(Cytokinesis-Block micronucleus method),在AT细胞和GM细胞经60Co γ射线0、1、2、3、4 Gy照射后,观察比较AT细胞和GM细胞之间微核率及微核细胞率的差异,并分别进行曲线拟合.结果在1、2、3、4 Gy剂量照射下,AT细胞微核率及微核细胞率均明显高于GM细胞,其差异有非常显著性 (P<0.01),并且两者微核率及微核细胞率均与剂量呈正相关,均可拟合成剂量效应直线方程y=a bx,微核率及微核细胞率直线回归方程斜率AT细胞明显大于GM细胞(P<0.01).结论辐射敏感性AT细胞显著高于GM细胞,AT患者AT细胞具有高辐射敏感性. 相似文献
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目的:探讨人肝癌中表达的3种septin 蛋白1, 2和6自身之间和相互之间是否存在相互作用关系,从而探讨在肝癌中septin家族的作用方式. 方法:通过构建septin家族基因的pCMV-Myc,pCMV-HA表达载体,采用人肾293细胞内蛋白的免疫共沉淀进行验证蛋白的相互作用. 结果:Septin 家族蛋白中确实存在着相互作用,不仅蛋白相互之间存在相互作用,且同一种蛋白质的分子之间也存在着较强的相互作用. 结论:Septin家族蛋白可能以复合物的形式在肿瘤发生过程中参与细胞活动. 相似文献
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AT病是一种隐性遗传病,主要表现为基因组不稳定和端粒缩短。本文主要阐述在AT细胞中,端粒、端粒结合蛋白与ATM蛋白相互作用,影响AT细胞的基因组不稳定性,从而对AT病中端粒缩短的原因进行探讨。 相似文献
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[目的]研制建立核和辐射卫生监测公众内照射剂量估算软件。[方法]使用POWERBUILDER11.5,运用IAEA—TECDOC-1162出版物中有关食入和吸入途径内照射剂量估算方法,结合江苏省田湾核电站周围人群健康背景资料编制软件。[结果]建成核和辐射卫生监测公众内照射剂量估算软件:并运用软件计算2010年度田湾核电站30km半径范围内食品中^137Cs致公众内照射集体有效剂量为5.05人·mSy。2011年应对日本核电站泄漏辐射监测期间,南京地区蔬菜中^137I致公众内照射有效剂量最大为2.2×10~rosy。[结论]该软件可满足核电站正常运行和事故状态下,食入和吸入两种途径公众内照射待积有效剂量的快速计算评价。为保证评价准确性,需要对核电站地区人口结构和饮食结构资料进行定期调查。 相似文献