射频消融在脾脏疾病中的应用现状

射频消融（radiofrequency ablation,RFA）是一种良好的消融、凝血工具,较早应用于肝外科疾病手术,其作用已经从单纯消融肝脏肿瘤扩展到无血肝切除。然而RFA在脾脏疾病中应用相对局限,其临床价值似乎被低估。本文总结RFA在脾脏各种疾病中的应用,以期为临床拓展思路,为RFA在脾脏疾病的应用提供参考。     

金雀异黄素对人脐静脉内皮细胞增殖的影响

目的:研究金雀异黄素对人脐静脉内皮细胞(hU-VEC)生长的影响及机制。方法:培养并鉴定hUVEC;用不同浓度金雀异黄素(0·1、1、10和50μmol)对hUVEC作用24h;先用MTT比色法观察细胞存活率、流式细胞术检测细胞DNA含量及细胞周期观察其对hUVEC生长的影响,流式细胞术检测凋亡相关蛋白Fas、Bcl-2的表达,探讨金雀异黄素诱导hU-VEC增殖的可能机制。结果:金雀异黄素能诱导hUVEC的增殖(P<0·05或P<0·01),其效应随浓度的增加而增强;细胞周期显示S期细胞明显增加;金雀异黄素促进Bcl-2的表达,抑制Fas的表达。结论:金雀异黄素能诱导hUVEC增殖,其机制可能与上调Bcl-2及下调Fas的表达有关。     

佛波酯对LPS／IFN-γ诱导的巨噬细胞活性氧产生的影响

目的研究佛波酯（PMA）对脂多糖／γ-干扰素（LPS／IFN-γ）诱导的巨噬细胞RAW264．7活性氧产生的影响。方法于实验前0、3、6、9、12、18h,用1μg／mL的LPS和100U／mL IFN-γ诱导处于对数生长期的RAW264．7细胞,采用蛋白质印迹技术检测细胞中一氧化氮合酶（iNOS）的表达;对经LPs／IFN-γ诱导12h的RAW264．7细胞加入终浓度为200ng／mL的PMA,应用激光共聚焦显微技术观察RAW264．7细胞中活性氧的产生。结果LPS／IFN-γ可使RAW264．7细胞的诱导型iNOS表达增加,同时PMA可刺激经LPS／IFN-γ诱导后的RAW264．7细胞产生呼吸爆发,细胞的荧光强度较未刺激组增强（P〈0．01）。结论PMA可促使经LPS／IFN-γ诱导的RAW264．7细胞产生大量活性氧。     

杜仲不同部位及不同提取方法的提取物对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

背景与目的:已有研究证实杜仲提取物具有抗炎、抗氧化作用,且对器官缺血再灌注损伤具有保护作用,但杜仲的不同部位及不同提取方法所得提取物的药理效应有所不同。本研究对比性研究杜仲叶与皮的不同提取物对大鼠肝缺血再灌注损伤(HIRI)的保护作用,以期为临床HIRI的防治提供给参考。方法:48只雄性SD大鼠随机分均为假手术组、HIRI模型组与4个预处理组。4个预处理组大鼠分别用杜仲皮水提取物、杜仲皮醇提取物、杜仲叶水提取物、杜仲叶醇提取物灌胃,1次/d,连续10 d,提取物浓度80 g生药/kg;假手术组、HIRI模型组用等体积生理盐水按相同的方式灌胃,第11天,除假手术组行假手术外,其余各组采用阻断左肝叶及肝中叶血供1 h后再灌4 h的方式诱导HIRI,随后采集各组大鼠左肝叶与下腔静脉取血标本,用HE染色法观察肝脏病理变化,检测血清肝功能指标丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)以及肝组织中炎性指标肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)与氧化应激指标丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)。结果:除假手术组外,其余各组大鼠肝组织均有不同程度的病理改变,但各预处理组的肝损伤情况均较HIRI组有明显改善,其中杜仲叶醇提取物预处理的作用最为明显。与假手术组比较,HIRI模型组及各预处理组大鼠血清ALT、AST活性明显升高,肝组织TNF-α、IL-1β水平及MDA浓度明显升高,SOD活性明显降低,而各预处理组以上指标的变化程度均较HIRI模型组降低,其中杜仲叶醇提取物预处理最为明显(均P0.05)。结论:杜仲不同部位及不同提取方法的提取物对HIRI的保护作用,尤以杜仲叶醇提取物保护作用最为显著,提示杜仲叶中的黄酮类化合物可能是抗HIRI最有效的成分,值得进一步的研究与开发。     

医学生物化学教学的几点体会

生物化学是高等医学院校一门重要的医学基础课,其发展速度快,知识信息广,授课难度较大,也是学生普遍反应,难学好的一门课程[1].它主要研究生物体分子结构与功能,物质代谢与调节,以及遗传信息传递的分子基础与调控规律,从分子水平探讨生命现象的本质[2].同时,它又是生命科学中进展迅速的基础学科,其理论和技术渗透至基础医学与临床医学的各个领域[2].校园中就流传着"生化生化,深而难化"的俗语.如何在有限的学时里让学生掌握足够深度和广度的生化知识,提高学生对这门课程的兴趣及认知水平,是需要我们生化教师仔细总结和探讨的.为此,笔者就教学中的一些体会进行了讨论,恳请同行指正.     

一种改进的人脐静脉内皮细胞的培养方法

目的:建立稳定的人脐静脉内皮细胞分离和培养的方法. 方法:采用胰蛋白酶/胶原酶(1∶1)混合酶液消化法培养人脐静脉内皮细胞,简化完全培养液组分(不添加血管内皮细胞生长因子、肝素等辅助因子),当原代培养细胞80%以上汇合后用胰蛋白酶消化传代;用形态学、免疫细胞化学法进行鉴定. 结果:种植在培养瓶中的内皮细胞4h贴壁生长,48～96 h生长最快,7～10 d汇合. 内皮细胞呈单层铺路石样外观,Ⅷ因子相关抗原(Ⅷ:Ag)和内皮细胞生长因子受体2(KDR)鉴定内皮细胞纯度达95%以上. 结论:用混合酶液灌注脐静脉消化内皮细胞是获取内皮细胞的一种好方法,可靠性大,成功率高,可以构建体外研究血管内皮细胞的模型.