射频消融在脾脏疾病中的应用现状

射频消融（radiofrequency ablation,RFA）是一种良好的消融、凝血工具,较早应用于肝外科疾病手术,其作用已经从单纯消融肝脏肿瘤扩展到无血肝切除。然而RFA在脾脏疾病中应用相对局限,其临床价值似乎被低估。本文总结RFA在脾脏各种疾病中的应用,以期为临床拓展思路,为RFA在脾脏疾病的应用提供参考。     

佛波酯对LPS／IFN-γ诱导的巨噬细胞活性氧产生的影响

目的研究佛波酯（PMA）对脂多糖／γ-干扰素（LPS／IFN-γ）诱导的巨噬细胞RAW264．7活性氧产生的影响。方法于实验前0、3、6、9、12、18h,用1μg／mL的LPS和100U／mL IFN-γ诱导处于对数生长期的RAW264．7细胞,采用蛋白质印迹技术检测细胞中一氧化氮合酶（iNOS）的表达;对经LPs／IFN-γ诱导12h的RAW264．7细胞加入终浓度为200ng／mL的PMA,应用激光共聚焦显微技术观察RAW264．7细胞中活性氧的产生。结果LPS／IFN-γ可使RAW264．7细胞的诱导型iNOS表达增加,同时PMA可刺激经LPS／IFN-γ诱导后的RAW264．7细胞产生呼吸爆发,细胞的荧光强度较未刺激组增强（P〈0．01）。结论PMA可促使经LPS／IFN-γ诱导的RAW264．7细胞产生大量活性氧。     

金雀异黄素对人脐静脉内皮细胞增殖的影响

目的:研究金雀异黄素对人脐静脉内皮细胞(hU-VEC)生长的影响及机制。方法:培养并鉴定hUVEC;用不同浓度金雀异黄素(0·1、1、10和50μmol)对hUVEC作用24h;先用MTT比色法观察细胞存活率、流式细胞术检测细胞DNA含量及细胞周期观察其对hUVEC生长的影响,流式细胞术检测凋亡相关蛋白Fas、Bcl-2的表达,探讨金雀异黄素诱导hU-VEC增殖的可能机制。结果:金雀异黄素能诱导hUVEC的增殖(P<0·05或P<0·01),其效应随浓度的增加而增强;细胞周期显示S期细胞明显增加;金雀异黄素促进Bcl-2的表达,抑制Fas的表达。结论:金雀异黄素能诱导hUVEC增殖,其机制可能与上调Bcl-2及下调Fas的表达有关。     

microRNA调控肝缺血再灌注损伤的作用机制

肝缺血再灌注损伤是影响临床肝外科手术预后的重要原因之一。研究发现microRNA可通过多条途径参与肝缺血再灌注损伤过程。归纳总结了microRNA的生物合成与功能及其通过能量代谢、凋亡、自噬、氧化应激和细胞炎症等途径调控肝缺血再灌注损伤的相关机制。认为以microRNA为靶点治疗肝缺血再灌注损伤有广阔的应用前景,期待之后更深入的研究。     

大豆异黄酮对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)的机制尚未阐明,可能与活性氧(ROS)生成、细胞因子参与、肝细胞内钙离子超载、细胞凋亡等有关[1].大豆异黄酮(SI)是人们公认的抗氧化剂及抗炎药物.研究结果表明,其对心肌、脑等器官缺血再灌注损伤具有保护作用[2-3].但对HIRI是否具有保护效应,鲜见报道.本研究通过动物实验观察了SI对HIRI的保护作用.     

氧化型低密度脂蛋白对平滑肌细胞核因子-kB激活的影响

目的：观察氧化型低密度脂蛋白对人平滑肌细胞核因子-kB激活的影响，探讨氧化型低密度脂蛋白致动脉粥样硬化机制。方法：以体外培养的人脐动脉平滑肌细胞为对象，采用免疫细胞化学法测定氧化型低密度脂蛋白与核因子-kB亚单位p65核移位的时间效应与浓度效应关系。结果：在氧化型低密度脂蛋白刺激下，平滑肌细胞中0．5h即出现核因子-kB核移位，2h达高峰，4h仍持续可见。不同浓度(12．5，25，50及100mg/L)氧化型低密度脂蛋白均可诱导平滑肌细胞中核因子-kB核移位，在一定剂量范围内，氧化型低密度脂蛋白的浓度越大，核因子-kB核移位越明显，尤以50mg/L的氧化型低密度脂蛋白作用最明显。结论：氧化型低密度脂蛋白可刺激平滑肌细胞中核因子-kB的激活，进一步提示氧化型低密度脂蛋白／核因子-kB信号途径在促进动脉粥样硬化发病机制中起重要作用。     

一种改进的人脐静脉内皮细胞的培养方法

目的:建立稳定的人脐静脉内皮细胞分离和培养的方法. 方法:采用胰蛋白酶/胶原酶(1∶1)混合酶液消化法培养人脐静脉内皮细胞,简化完全培养液组分(不添加血管内皮细胞生长因子、肝素等辅助因子),当原代培养细胞80%以上汇合后用胰蛋白酶消化传代;用形态学、免疫细胞化学法进行鉴定. 结果:种植在培养瓶中的内皮细胞4h贴壁生长,48～96 h生长最快,7～10 d汇合. 内皮细胞呈单层铺路石样外观,Ⅷ因子相关抗原(Ⅷ:Ag)和内皮细胞生长因子受体2(KDR)鉴定内皮细胞纯度达95%以上. 结论:用混合酶液灌注脐静脉消化内皮细胞是获取内皮细胞的一种好方法,可靠性大,成功率高,可以构建体外研究血管内皮细胞的模型.