液态芯片的高敏感性检测HIV-1 RNA

目的建立高敏感的液态芯片检测血液HIV-1 RNA的方法。方法抽提NASBA（nucleic acid sequence-based amplification）确定HIV-1 RNA载量的患者血浆RNA，对HIV-1引物进行生物素标记，行一步法RT-PCR扩增靶HIV-1 gag区片段。PCR产物与两个交联HIV-1特异探针的微球杂交，同时对于HIV-1病毒载量在100-790拷贝/ml样本进行荧光定量PCR检测。结果对NASBA确定阳性的上海108例（载量170-3 300 000）、COBAS定量的北京86例阳性（载量477-2 040 000）以及5例NIH的HIV标准品（〈100；273；1 610；11 300；33 800）的结果进行液态芯片多区段检测HIV-1 RNA，总阳性率为96.98%（193/199），液态芯片检测的敏感性与NASBA、COBAS方法相当（P〉0.05），对于HIV-1 RNA载量在180-790拷贝/ml的13个样本的荧光定量PCR未检测到信号，液态芯片检测结果为阳性。结论多区段液态芯片法检测HIV-1 RNA灵敏度高、特异性强、重复性好，降低漏检率，而且具有操作简便、快速、低成本的特点，将液态芯片技术应用于血液筛查将有助于提高HIV-1阳性血液的检出率和输血的安全性。