排序方式: 共有82条查询结果,搜索用时 265 毫秒
1.
【目的】构建表达人细胞周期蛋白Dl及细胞周期蛋白激酶CDK4融合蛋白的重组体。【方法】用RT-PCR从HL-60细胞中扩增细胞周期蛋白D1及CDK4基因片段,克隆到pGEM-T easy载体上。测序鉴定后切下相应的片段,连接到表达载体pET-22b( )上,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DL3),使之高效表达融合蛋白细胞周期蛋白D1及CDK4。SDS-PAGE电泳及Western blotting鉴定表达蛋白。【结果】 用PCR扩增得到了正确的目的基因片段并构建成pET-cyclinD1和pET-CDK4两个原核表达载体。将其转化大肠杆菌,Western blot检测证实了转化的大肠杆菌能表达细胞周期蛋白D1及CDK4融合蛋白。【结论】 本研究成功构建了细胞周期蛋白D1及CDK4原核表达载体,后两在细胞内能正确表达细胞周期蛋白D1及CDK4融合蛋白. 相似文献
2.
3.
目的研究阿诺宁乳化剂的抗瘤作用和急性毒性反应。方法用小鼠和裸鼠移植性肿瘤模型测定体内抗瘤活性,用Blliss方法计算小鼠给药的急性毒性的LD50。结果阿诺宁乳化剂在4,8和16 mg·kg-1,灌胃(ig)qd×10 d,对小鼠肝癌HepS 3批实验的平均抑瘤率分别为39.2%,46.9%和55.7%;对小鼠肉瘤S-180的平均抑瘤率分别为34.6%,47.3%和54.4%;对小鼠L2的平均抑瘤率分别为37.5%,45.9%和56.5%。阿诺宁乳化剂在7.5,15,30和60 μg·kg-1腹腔注射(ip)×10d 剂量下,对小鼠肝癌(HepS)实验的平均抑瘤率分别为31.0%,42.9%,50.2%和62.4%;对小鼠肉瘤S-180的平均抑瘤率依次为23.6%,39.4%,50.9%和61.2%;在15,30和60μg·kg-1,ip,每日1次,每周6次,共4周的剂量下,对人肝癌(Bel-7402)裸鼠移植瘤的抑瘤率分别为32.0%,50.5%和60.2%;在上述3个剂量下,对人肺腺癌(GLC-82)裸鼠移植瘤的抑瘤率分别为30.3%,41.9%和56.1%。结果表明,阿诺宁乳化剂ig,ip对上述5种肿瘤均有明显的抑制作用,且其抑瘤率与阿诺宁乳剂的剂量相关。用Bliss方法统计出阿诺宁乳化剂对小鼠ig一次的半数致死量(LD50)及其95%可信限为74.75 (58.67~5.26) mg·kg-1;ip的LD50)为1.12 (1.01~1.24)mg·kg-1),静脉注射(iv)的LD50为1.81(1.61~2.03) mg·kg-1。结论阿诺宁乳化剂对多种小鼠和裸鼠移植瘤均有明显抗瘤作用。 相似文献
4.
5.
THEANTICANCEREFFECTANDANTI-DNATOPOISOMERASEIIEFFECTOFEXTRACTSOFCAMELLIAPTILOPHYLLACHANGANDCAMELLIASINENSISXieBinsfen;谢冰芬;LiuZ... 相似文献
6.
目的研究DNA引物酶抑制剂碘化-3,3′-二乙基-9-甲基-硫杂羰花青(DMTCCI)诱导人粒细胞性白血病HL-60细胞凋亡并探索其机制。方法分别采用不同浓度的DMTCCI处理培养于RPMI-1640培养基的HL-60细胞。采用MTT法检测DMTCCI对HL-60细胞的生长抑制作用。采用流式细胞仪和DNA琼脂糖凝胶电泳方法检测细胞凋亡。采用蛋白免疫印迹(Western blotting)法观察凋亡相关蛋白survivin, Bcl-xL, Bad, Bax, Bcl-2, caspase-9, caspase-3, caspase-6, PARP, DFF45和lamin B的表达。采用ApoAlert Caspase-3分析试剂盒检测caspase-3的活性。结果DMTCCI具有抑制人白血病HL-60细胞增殖的作用,其IC50值为0.24 μmol·L-1。流式细胞仪和DNA琼脂糖凝胶电泳结果显示,DMTCCI可诱导HL-60细胞凋亡。在经DMTCCI处理的HL-60细胞中,survivin和Bcl-xL蛋白的表达水平下调,Bad和Bax蛋白的表达水平上调,Bcl-2蛋白的表达水平无变化,caspase-9,caspase-3,caspase-6,PARP,DFF45和lamin B被分别裂解,产生相应裂解产物。在HL-60细胞中,caspase-3的活性在1 μmol·L-1 DMTCCI处理3 h时明显升高,在处理12 h时达到最高峰。结论DMTCCI可抑制人白血病HL-60细胞的增殖并诱导其发生细胞凋亡。Bcl-2家族蛋白、survivin和caspases家族蛋白可能参与了上述诱导HL-60细胞凋亡的过程。 相似文献
7.
神经酰胺诱导鼻咽癌细胞凋亡 总被引:5,自引:1,他引:4
目的 了解第二信使神经酰胺信号转导对鼻咽癌细胞生长的影响。方法 采用MTT法检测神经酰胺对鼻咽癌细胞株 (CNE 2 )增殖的抑制作用。光镜观察、荧光染色、流式细胞术检测细胞凋亡改变。Westernblot法检测p2 1WAF1的表达。结果 神经酰胺在 6 2 5、12 5、2 5、5 0 μm浓度下 ,对CNE 2细胞生长有明显的抑制作用 ,流式细胞仪检测发现亚G1峰出现 ,荧光染色可见核荧光强度增加、核片段化和凋亡小体。p2 1WAF1蛋白表达明显上调。结论 神经酰胺能诱导鼻咽癌细胞株CNE 2凋亡 ,且上调 p2 1WAF1蛋白表达。p2 1WAF1可能是神经酰胺诱导鼻咽癌细胞凋亡中起作用的因素之一。 相似文献
8.
茶多酚对人鼻咽癌细胞株CNE_2细胞DNA损伤和细胞周期的影响 总被引:11,自引:0,他引:11
目的 观察茶多酚(tea polyphenols, TP) 对人鼻咽癌细胞株CNE2 细胞DNA 的损伤作用和细胞周期的影响。方法 用琼脂糖凝胶电泳方法测定TP对细胞DNA的断裂作用;用流式细胞术(FCM) 观察TP对CNE2 细胞周期的变化及其诱导凋亡。结果 TP可引起CNE2 细胞DNA 断裂、其断裂程度随剂量的增加和作用时间的延长而增强。TP不同浓度和不同作用时间可干扰CNE2 细胞在周期中的进程,使G1 期细胞明显增多,S期细胞减少,细胞分裂增殖指数(PI)亦随之降低。同时,TP可诱导CNE2 细胞凋亡,其凋亡率随TP浓度的增加和作用时间的延长在逐渐增加。结论 TP1998 12 04 收稿,1999 07 31 修回* 国家自然科学基金资助课题,No 39370800作者简介:谢冰芬,女,副研究员,硕士生导师,研究方向为肿瘤药理可引起人鼻咽癌细胞株CNE2 细胞的DNA 断裂,使细胞停滞于G1 期,阻止G1 期细胞进入S期;同时亦可诱导细胞凋亡,这些结果可能为TP的抗瘤作用提供理论依据 相似文献
9.
新酮醛是中山医科大学化学教研室合成。它是临床上用于抗炎的鱼腥草素和新鱼腥草素的同系物,其碳链略短。我校桂治宁等应用~3H-TdR体外参入法观察到新酮醛对小鼠肝癌细胞的DNA合成有明显抑制作用。对小鼠肿瘤(S—180,L_2,Hep ESC)有边缘抗瘤活性。合并用药能提高穿心莲和环磷酰胺的抗瘤作用。对大鼠没有明显的蓄积性毒性,对狗的亚急性毒性试验除引起血红蛋白值降低外,对其他脏器未见明显毒性。对小鼠免疫功能未见明显影响。 相似文献
10.