DNA引物酶抑制剂碘化-3,3′-二乙基-9-甲基-硫杂羰花青诱导人白血病HL-60细胞凋亡

目的研究DNA引物酶抑制剂碘化-3,3′-二乙基-9-甲基-硫杂羰花青(DMTCCI)诱导人粒细胞性白血病HL-60细胞凋亡并探索其机制。方法分别采用不同浓度的DMTCCI处理培养于RPMI-1640培养基的HL-60细胞。采用MTT法检测DMTCCI对HL-60细胞的生长抑制作用。采用流式细胞仪和DNA琼脂糖凝胶电泳方法检测细胞凋亡。采用蛋白免疫印迹(Western blotting)法观察凋亡相关蛋白survivin， Bcl-xL， Bad， Bax， Bcl-2， caspase-9， caspase-3， caspase-6， PARP， DFF45和lamin B的表达。采用ApoAlert Caspase-3分析试剂盒检测caspase-3的活性。结果DMTCCI具有抑制人白血病HL-60细胞增殖的作用，其IC₅₀值为0.24 μmol·L^-1。流式细胞仪和DNA琼脂糖凝胶电泳结果显示，DMTCCI可诱导HL-60细胞凋亡。在经DMTCCI处理的HL-60细胞中，survivin和Bcl-xL蛋白的表达水平下调，Bad和Bax蛋白的表达水平上调，Bcl-2蛋白的表达水平无变化，caspase-9，caspase-3，caspase-6，PARP，DFF45和lamin B被分别裂解，产生相应裂解产物。在HL-60细胞中，caspase-3的活性在1 μmol·L^-1 DMTCCI处理3 h时明显升高，在处理12 h时达到最高峰。结论DMTCCI可抑制人白血病HL-60细胞的增殖并诱导其发生细胞凋亡。Bcl-2家族蛋白、survivin和caspases家族蛋白可能参与了上述诱导HL-60细胞凋亡的过程。     

抗肿瘤新药临床前安全性评价

大多数药物均具有两重性,一方面能治疗疾病,另一方面又具有副反应,抗肿瘤药更是如此。因此,对新的抗肿瘤药物进行安全性评价就显得更加重要。为了更正确地评价抗肿瘤药物的安全性,特提出抗肿瘤药物临床前安全性评价的基本要求和抗肿瘤药物毒理学研究中需要讨论的一些问题。     

法尼基转移酶抑制剂ManumyCin诱导HepG2细胞凋亡的研究

目的:研究法尼基转移酶抑制剂Manumycin对人肝癌HepG2细胞的抗肿瘤作用,并探讨其诱导凋亡的分子机制。方法:采用MTT(Methythiazolyltetrazolium)法观察法尼基转移酶抑制剂Manumycin对肝癌细胞株HepG2细胞增殖的抑制作用,荧光显微镜、DNA凝胶电泳、流式细胞术等技术检测细胞凋亡,应用Westernblot方法检测bcl-2、p53、bax的蛋白水平变化。结果:法尼基转移酶抑制剂Manumycin能明显抑制HepG2细胞的生长且呈浓度依赖性,其IC50为(17.65±0.58)μmol/L。荧光显微镜检查显示Manumycin处理的HepG2细胞DAPI染色后,细胞核内可见浓染致密的颗粒荧光,典型细胞可见新月型改变,固缩或片段化的核。DNA凝胶电泳可见典型的DNA梯形带。流式细胞DNA直方图上出现典型的亚二倍体“凋亡峰”,细胞凋亡与Manumycin作用的时间和浓度相关。Manumycin能时间依赖性地诱导HepG2细胞发生G2/M期阻滞。Manumycin处理HepG2细胞后,Westernblot检测结果显示p53蛋白表达明显增加,而bcl-2蛋白和bax蛋白表达无明显变化。结论:法尼基转移酶抑制剂Manumycin对人肝癌细胞株HepG2有强烈的细胞毒作用,其分子机制可能是诱导HepG2细胞凋亡。Manumycin诱导HepG2细胞凋亡与bcl-2蛋白和bax蛋白表达水平无关,而p53蛋白表达水平的上调可能在此过程中起了一定     

DNA引物酶抑制剂碘化-3,3′-二乙基-9-甲基-硫杂羰花青诱导人白血病HL-60细胞凋亡(英文)

目的研究DNA引物酶抑制剂碘化-3,3′-二乙基-9-甲基-硫杂羰花青(DMTCC I)诱导人粒细胞性白血病HL-60细胞凋亡并探索其机制。方法分别采用不同浓度的DMTCC I处理培养于RPM I-1640培养基的HL-60细胞。采用MTT法检测DMTCC I对HL-60细胞的生长抑制作用。采用流式细胞仪和DNA琼脂糖凝胶电泳方法检测细胞凋亡。采用蛋白免疫印迹(W estern b lotting)法观察凋亡相关蛋白survivin,Bc l-xL,Bad,Bax,Bc l-2,caspase-9,caspase-3,caspase-6,PARP,DFF45和lam in B的表达。采用ApoA lert Caspase-3分析试剂盒检测caspase-3的活性。结果DMTCC I具有抑制人白血病HL-60细胞增殖的作用,其IC50值为0.24μmol.L-1。流式细胞仪和DNA琼脂糖凝胶电泳结果显示,DMTCC I可诱导HL-60细胞凋亡。在经DMTCC I处理的HL-60细胞中,survivin和Bc l-xL蛋白的表达水平下调,Bad和Bax蛋白的表达水平上调,Bc l-2蛋白的表达水平无变化,caspase-9,caspase-3,caspase-6,PARP,DFF45和lamin B被分别裂解,产生相应裂解产物。在HL-60细胞中,caspase-3的活性在1μmol.L-1DMTCCI处理3 h时明显升高,在处理12 h时达到最高峰。结论DMTCCI可抑制人白血病HL-60细胞的增殖并诱导其发生细胞凋亡。Bcl-2家族蛋白、survivin和caspases家族蛋白可能参与了上述诱导HL-60细胞凋亡的过程。     

天然紫草萘醌类化合物及其衍生物的抗瘤作用研究

紫草为传统中药，具有广泛的药理作用，抗瘤作用是其中之一。由于天然紫草有效成分含量极低，抗癌活性不强，限制了临床上应用。为了提高萘醌类化合物的抗癌活性，现以紫草有效成分β，β-二甲基丙烯酰阿卡宁作为先导化合物，进行结构改造，在芳环C-6或C-7以及侧链C-11引入含巯基或含氮基团，半合成系列紫草萘醌类衍生物（SYUNZs），对这系列衍生物进行体外体内试验，进一步了解紫草萘醌类衍生物的抗癌活性与其结构的相关性，为开发高效低毒的新型紫草萘醌类抗肿瘤药物提供理论数据。     

绞股蓝总皂甙诱导人肝癌HepG2－A16细胞程序性死亡

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琼脂培养MTT法测定卵巢癌对顺铂的体外敏感性与临床疗效观察

目的：观察琼脂培养ＭＴＴ法测定卵巢癌对顺氯氨铂（ＤＤＰ）体外敏感性与临床疗效的关系。方法：用琼脂培养ＭＴＴ法对２６例卵巢癌患者的癌组织标本行药敏测定，同时观察ＤＤＰ对卵巢癌治疗的临床疗效。结果：卵巢癌接种活细胞数与光密度（ＯＤ值）在一定范围内呈线性相关（ｒ＝０．９７２８，Ｐ＜０．０１）。临床缓解组ＤＤＰ对卵巢癌细胞的相对抑制率（７３±５）明显较临床无效组（３６±９）高（Ｐ＜０．０１）。卵巢癌对顺铂体外敏感性与临床疗效相关，体内外阳性符合率是８８％（１６／１８），阴性符合率为１００％（８／８），总符合率是９２％（２／２６）。结论：琼脂培养ＭＴＴ法能为指导临床化疗选药提供一定依据     

高密度脂蛋白对ERK1/2表达及其磷酸化的影响

丝裂素活化蛋白激酶是信号从细胞表面转导到细胞内部的重要传递者 ,通过磷酸化活化转录因子而调控特定基因的表达。本实验观察了人高密度脂蛋白对U937细胞信号转导分子ERK1 2表达水平及其磷酸化的影响。人单核—巨噬细胞株U937用含 10 %胎牛血清的RPMI 16 4 0培养基 ,在 5 %CO2 、37℃培养箱中培养。待细胞长至 5× 10 5时 ,换无血清的RPMI 16 4 0培养基 5mL。高密度脂蛋白制备方法 ,取新鲜抗凝血浆 ,用超速离心机进行密度梯度离心 ,收集密度 1.0 6 3～ 1.2 10g cm3组分 ,PBS透析后冷藏备用。SDS PAGE采用 12 %的分离胶 ,浓缩胶的电流为 10mA ,分离胶的电流为 15mA ,每孔加约 5 0 μg的样本。在转膜前 ,每一批样本用考马斯亮蓝R2 5 0染色以检测提取细胞蛋白情况。转膜采用 10 0mA的电流 ,时间为 2h ,膜为聚偏氟乙烯膜 ,用前用甲醇浸泡 10min左右 ,封闭液为Pierce公司产品 ,漂洗液为PBS +5 0 %的吐温 ,一抗稀释度为 1∶2 0 0 ,二抗稀释度为 1∶10 0 0 ,温育时间均为室温 1h ,显色液为Pierce公司产品。其余步骤按常规操作。Westernblot实验结果显示 ,高密度脂蛋白刺激ERK1 2表达 ,并诱导ERK1 2磷酸化水平增加。ERK1 2磷酸化诱导过氧化体增殖物激活型受体γ的磷酸化 ,而丝裂素活化蛋白激酶特异性抑制剂则阻     

奥曲肽抑制人胃粘液腺癌细胞增殖

1982年，Baner等合成了一种人肽的生长抑索长效类似物一奥曲肽（Octreotide，OCT即SMSZOI－995，Sandostatin）。其血浆半衰期明显长于14肽的生长抑素（Somatostatin，SS）。奥曲肽对食道静脉曲张破裂出血有较好的治疗作用【门。近年有报道低剂量典曲肽和它莫西芬联合治疗胰腺癌明显延长患者的生存时间，并且毒性低【引。奥曲肽对胃癌细胞增殖是否具有抑制作用，尚未见报道。我们采用Mry比色法和克隆形成法观察了奥曲肽对体外培养的人胃粘液腺癌（MGC803）细胞增殖和克隆形成能力的影响。1材料与方法l·l细胞人胃粘液腺癌（MGC－80…