桂枝中酚类提取物潜在作用靶点的探索

目的?研究桂枝中酚类提取物木脂素的潜在作用靶点。方法?在药效团模型数据库中筛选出与木脂素衍生物匹配值（FitValue）大于0.75的药效团模型；运用反向对接技术，从上述药效团模型所对应的靶点蛋白中挑选出与木脂素衍生物结合能最低的蛋白；以该靶蛋白已报道的抑制剂建立3D-QSAR药效团模型预测木脂素衍生物的活性，同时通过荧光偏振实验测试化合物1与Tankyrase 1蛋白的结合力，通过Western blot实验测试加入化合物1后细胞中Tankyrase 1蛋白的含量变化；最后用分子动力学模拟分析木脂素衍生物与该蛋白的作用模式。结果?与木脂素衍生物匹配值大于0.75的药效团模型有17个，其中4个为神经保护类靶点，占比（24%）最大；反向对接结果显示该化合物与Tankyrase 1蛋白（PDB ID:4TOR）的结合能（E=-66?kcal/mol）最低；预测该化合物的活性为0.61?μmol/L，荧光偏振实验测得化合物1与Tankyrase 1蛋白的结合力Ki=（0.15±0.01）μmol/L，属于中等抑制，Western blot表明在SW480细胞中化合物1使Tankyrase 1蛋白的表达下降；且分子动力学结果显示对接构象与该靶点已报道的抑制剂类似。结论?经过对桂枝中酚类提取物木脂素衍生物的反向找靶，以及活性测试确定其对Tankyrase 1蛋白具有潜在的抑制活性。      

连翘脂素通过调控P2X7R/NF-κB/NLRP3炎性小体信号通路缓解LPS/ATP诱导的L02细胞炎症

目的 为研究连翘脂素（Phillygenin，PHI）对脂多糖（LPS）和腺嘌呤核苷三磷酸（ATP）联合诱导L02细胞中的抗炎药效和对P2X7受体（P2X7R），NOD样蛋白结构域受体3（NLRP3）和核转录因子-κB（NF-κB）表达的影响。方法 本研究采用先给予100 μg·L^-1 LPS处理24 h后，再使用5 mmoL·L^-1 ATP 5 h建立L02细胞炎症模型。给药组在给予LPS处理的同时给予不同浓度PHI（100、50、25 mg·L^-1）培养6 h，随后换液，继续用LPS处理18 h，ATP处理5 h后，采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测L02细胞中白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-18（IL-18）、P2X7R、NLRP3、胱天蛋白酶-1前体（pro-Caspase-1）、裂解胱天蛋白酶-1（cleaved Caspase-1）、NF-κB、NF-κB抑制蛋白α（IκBα） mRNA和蛋白表达。通过分子对接实验预测P2X7R与PHI能否结合，以及DCFH-DA活性氧（ROS）荧光探针检测细胞中ROS的累积。采用小干扰核糖核酸（siRNA）沉默P2X7R，并随后通过Real-time PCR检测IL-1β、IL-18、P2X7R、NLRP3、Caspase-1、NF-κB、IκBα mRNA表达情况。结果 Real-time PCR和Western blot分析显示，与空白组比较，模型组IL-1β、IL-18的表达均有所升高（P<0.05）；与模型组比较，给药组明显下调了IL-1β、IL-18 mRNA和蛋白的表达（P<0.05）。分子对接结果显示PHI与P2X7R有较好的结合作用。Real-time PCR和Western blot分析显示，与空白组比较，模型组P2X7R的表达明显上调（P<0.05）；与模型组比较，给药组下调了P2X7R mRNA和蛋白表达（P<0.05）。ROS荧光探针分析显示，与空白组比较，ROS的含量明显升高（P<0.05）；与模型组比较，给药组明显降低了ROS的积累（P<0.05）。Real-time PCR和Western blot分析显示，与空白组比较，模型组NLRP3炎性小体，NF-κB的表达明显升高（P<0.05）；与模型组比较，给药组明显降低NLRP3、cleaved-Caspase-1和上调NF-κB、IκBα mRNA及蛋白表达（P<0.05）。Real-time PCR分析显示，与模型组比较，siRNA沉默P2X7R后，IL-1β、IL-18、P2X7R、NLRP3、Caspase-1、NF-κB、IκBα mRNA表达明显降低（P<0.05），PHI具有同样的作用，二者合用后，基因表达进一步下降。结论 P2X7R为NF-κB/NLRP3信号通路的上游，PHI可能是通过下调P2X7R从而抑制NF-κB/NLRP3信号通路的表达从而缓解LPS/ATP诱导的L02细胞炎症，提示P2X7R可能是PHI发挥抗炎作用的靶标。     

腰椎后外侧融合术与360°融合术在严重腰椎管狭窄症治疗中的应用

目的比较腰椎后外侧融合术(PLF)与腰椎360°融合术(CF)在严重腰椎管狭窄症治疗中的临床疗效。方法回顾性分析2014年1月至2017年8月在我科住院治疗的161例不合并椎间盘突出或脱出的严重腰椎管狭窄症患者的临床资料,根据手术方式将患者分为腰椎后外侧融合组(PLF组,81例)和腰椎360°融合组(CF组,80例)。PLF组行腰椎后侧减压联合椎弓根螺钉固定及后外侧融合术;CF组行腰椎椎间盘切除联合后侧减压、椎弓根螺钉固定及360°融合术。比较2组患者术中出血量、手术时间、手术费用及术后并发症发生率;比较2组患者腰腿痛VAS、ODI、腰痛JOA评分评估临床症状;比较2组患者椎间隙高度、腰椎前凸角、融合率评估术后腰椎矢状位平衡及腰椎稳定性。结果术后2组患者的VAS、JOA、ODI较术前均明显改善,与术前比较差异有统计学意义(P<0.01),但2组间比较差异无统计学意义(P>0.05);2组患者术后均恢复了腰椎前凸角和椎间隙高度,且2组术后融合率比较差异无统计学意义(P>0.05);CF组的手术时间、术中出血量、手术费用比PLF组更多,2组比较差异有统计学意义(P<0.01);此外,2组共有8例发生术后并发症,其中PLF组1例(1.23%),CF组7例(8.75%),2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论对于不合并椎间盘突出或脱出的严重腰椎管狭窄症,行腰椎后侧减压联合椎弓根螺钉固定及后外侧融合术后可以明显缓解临床症状,实现手术节段间骨性融合,达到与腰椎椎间盘切除联合后侧减压、椎弓根螺钉固定及360°融合术同样的手术效果,且手术时间、术中出血量、手术费用、并发症更少。     

正畸治疗在口腔修复中的临床应用效果

目的:探寻正畸治疗在口腔修复中的临床应用效果。方法:选择2013年1月-2015年10月在我院接受口腔修复治疗的患者126例,随机分成对照组及观察组,每组各63例,对照组采用常规治疗措施,观察组给予正畸治疗措施,比较两组临床疗效。结果:观察组患者63例中总有效60例,有效率95.23%,对照组63例中有效48例,有效率76.19%;观察组患者临床疗效明显高于对照组,数据差异明显,具有统计学意义,0.05。结论:在口腔修复治疗中,应用正畸治疗,具有临床疗效好、患者牙齿更美观、牙齿咀嚼能力恢复快、不良反应较少等优点,值得临床推广及应用。     

药物制法对中成药解表功效的影响分析

解表中成药具有发汗、解表、透疹等作用,在临床上广泛用于治疗表证。解表中成药制剂品种繁多、工艺各异,一些处方相同、功效相近的解表中成药,在制法和质量标准上却存在较大差异,这必然对其功效有一定的影响。从《新编国家中成药》第2版和《中国药典》2010年版中含挥发油的解表类中成药的情况、制备工艺及质量控制现状,通过文献研究,分析挥发油对解表药解表功效的重要性、制法对解表作用的重要影响,并在中医药"方-证-剂"对应的中药制剂指导思想基础上,进一步提出"方-证-制-剂-质"对应指导中成药组方、制备和质量控制的指导思想,以期对现代中成药复方制剂的研究、开发和再评价具有一定的启示。     

不同地区儿童社区获得性肺炎常见革兰阴性菌对碳青霉烯类药物的耐药性差异及变迁

目的 比较不同地区儿童社区获得性肺炎（community-acquired pneumonia,CAP）的痰液培养中常见革兰阴性菌对碳青霉烯类药物的耐药性差异及变迁,为医疗援助提供参考。方法 回顾性研究2019年6月至2022年6月湖州和安顺地区CAP患儿的痰液培养及药敏结果,分析历年常见革兰阴性菌对碳青霉烯类药物的耐药性,比较不同地区间差异及历年耐药性变迁。结果 近3年两个地区痰液培养常见革兰阴性菌为肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌。湖州地区肺炎克雷伯菌检出率在2019、2021年明显高于安顺地区（P<0.05）,耐药率2019年明显高于安顺地区（P<0.05）,2021年低于安顺地区（P<0.05）;湖州地区肺炎克雷伯菌耐药率逐年降低,2021年明显低于2019年（P<0.05）,安顺地区逐年升高,2021年明显高于2019年（P<0.05）。对于大肠埃希菌,湖州地区检出率在近3年中均明显低于安顺地区（P<0.05）,其耐药率在同一年不同地区以及同一地区近3年的变迁比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论 儿童CAP常见革兰阴性菌对碳青霉烯类药物的耐药性在不同地区具有差异,并逐年变化,在医疗援助中,依据本地区经验的同时,更要根据受援医院的细菌耐药性监测系统,结合当地情况选用抗菌药物。     

骨肉瘤细胞脱逸化疗诱导的细胞衰老可重新增殖成瘤细胞

目的探讨骨肉瘤细胞(OS)能否脱逸化疗至细胞衰老和再增殖;评价逃逸衰老的细胞成瘤能力,从新的角度解释骨肉瘤复发的机制。方法多柔比星(DOX)诱导骨肉瘤细胞U2OS和MG63制备衰老的细胞模型,SA-Gal染色法检测细胞衰老;Western blot检测衰老相关分子。更换成不含DOX的培养基培养75 d,细胞计数检测细胞增殖和计算脱逸率。而后分为3组:对照组、衰老细胞组和脱逸衰老细胞组,琼脂糖克隆实验检测集落形成和裸鼠成瘤实验检测成瘤能力。结果超过90%的U2OS和MG63呈SA-Gal染色阳性;衰老相关的细胞分子p-p53、p-Rb和p-γH2AX明显升高(P<0.05)。75 d后,观察到有细胞重新增殖(脱逸率百万分之一),具有集落形成和裸鼠成瘤能力。结论衰老的骨肉瘤细胞能够脱逸细胞衰老状态重新增殖并具有成瘤能力。     

不同体质量指数及性别对阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者影响的研究进展

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)是最常见的睡眠障碍疾病,会对人体不同器官造成影响,心血管受累尤为严重。持续气道正压通气治疗是目前OSAHS治疗中应用最广泛且有效的方法,可以有效改善患者缺氧严重程度及睡眠情况。OSAHS的发病、严重程度及其预后受年龄、性别和体质量指数(BMI)等多种因素的影响。OSAHS通常被认为是男性为主的疾病,但近年的研究发现女性患者的临床表现、预后以及治疗方式的选择上与男性有所不同,且BMI的增加会因为性别差异的存在导致不同的结局。本文对BMI和性别对OSAHS患者的影响进行综述。     

初匀速法预测制川乌的有效期

目的:采用化学动力学方法预测制川乌有效期。方法:采用HPLC测定苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、乌头碱、次乌头碱、新乌头碱含量,流动相乙腈(A)-40 mmol·L-1乙酸铵溶液(B)梯度洗脱(0~45 min,30%~45%A;45~65 min,45%~50%A;65~75 min,50%~55%A;75~80 min,55%~65%A;80~85 min,65%A),检测波长240 nm。采用初均速法对制川乌药材进行加速试验并预测其有效期,考察不同温度下制川乌药材中双酯型生物碱和单酯型生物碱含量变化情况。结果:制川乌在室温条件下贮存期0.69年。结论:高温不利于制川乌的稳定,初均速法可为制川乌药材有效期的建立提供参考。     

应答式释药系统构建方法的研究进展

应答式释药系统能在特定时间、位点并根据生物节律变化释放药物,有效克服了机体耐药性,具有保护药物、局部靶向、抑制酶活性及记忆与表达等优点,具有良好的应用前景,目前已有多个化药制剂品种上市。该文主要综述了该释药系统构建方法的研究进展,同时考虑复杂中药(复方)中多组分、多环节、多靶点的整体作用特点,尝试提出了基于中药组分应答式释药系统的研究思路,以期"抛砖引玉",为该递药系统的发展提供借鉴与思考。