藻酸钙复合材料构建组织工程化骨修复大鼠股骨缺损

背景：骨形态发生蛋白2可诱导骨髓基质细胞向成骨或软骨系分化。既往多采用外源性给药方法，但其在体内易被代谢，骨诱导时间短，用量大，需反复使用，且成本高。 目的：观察藻酸钙与携带人骨形态发生蛋白2及β半乳糖苷酶基因的重组腺病毒的大鼠骨髓基质细胞复合构建组织工程化骨修复大鼠股骨缺损的效果。 设计、时间及地点：随机分组设计、动物对照观察实验，于2005-10／2006-12在河南省重点分子实验室完成。 材料：F344近交系大鼠12只和Wistar大鼠12只用于提取骨髓基质细胞，另外F344近交系大鼠48只用于制备股骨缺损模型。方法：扩增携带人骨形态发生蛋白2及β半乳糖苷酶基因的重组腺病毒（Adv-hBMP-2及Adv-β gal），培养大鼠骨髓基质细胞，分为Adv-hBMP-2转染组、Adv-β gal转染组和未转染组。腺病毒转染后与藻酸钠复合形成藻酸钙凝珠。建立大鼠股骨干中段连同骨膜截去6mm的缺损模型。F344近交系大鼠48只按随机数字表法分为6组，每组8只。缺损处分别植入不同的细胞复合物。同系细胞2组，供体为F344近交系大鼠：第1组Adv-hBMP-和Adv-β gal转染的骨髓基质细胞，应用FK506肌肉注射。第2组Adv-hBMP-2和Adv-β gal转染的骨髓基质细胞，未用FK506。同种异体细胞4组，供体为Wistar大鼠：第3组Adv-hBMP-2转染的骨髓基质细胞，应用FK506。第4组Adv-hBMP-2转染的骨髓基质细胞，未用FK506。第5组Adv-β gal转染的骨髓基质细胞，应用FK506。第6组Adv-β gal转染的骨髓基质细胞，未用FK506。FK506肌肉注射共3周，前2周每天1次，后1周隔天1次，每次剂量为1mg／kg。 主要观察指标：①转染后9d观察各组碱性磷酸酶染色阳性情况。②转染后3，6，9，12，15d进行碱性磷酸酶活性定量检测。③转染后21d行Von Kossa染色观察各组钙结节形成情况。④植入后2，4，6，8周摄x射线片检查观察各组新生骨痂和骨缺损愈合情况。⑤植入后8周在大鼠原骨缺损区取材，有明显成骨组织切片在低倍下显微照像并计算新生骨在骨缺损区域所占面积的百分数。 结果：Adv—hBMP-2转染组碱性磷酸酶染色可见多数细胞红染呈阳性，Adv—β gal转染组及未转染组染色阳性细胞少见。Adv-hBMP-2转染组各时间点碱性磷酸酶活性均高于Adv—β gal转染组及未转染组（P〈0．05），Adv—β gal转染组与未转染组间各时点差异均无显著性意义（P〉0．05）。Adv—hBMP-2转染组转染21d后Von Kossa染色显示钙结节形成，其他组未见钙结节。植入后2周起第1，3，4组X射线检查有明显骨痂形成，第1，3组骨痂密度高于第4组。第2，5，6组植入后各时段均无明显骨痂，缺损未愈合。植入后8周，第1，3组组织学检查表明以板层骨为主，第4组以编织骨和类骨质为主，内有炎症细胞浸润；第2，5，6组无明显新骨形成，缺损区内为纤维结缔组织。组织形态计量学分析表明第1，3组修复性新骨占原骨面积百分数大于第4组（P〈0．05）。 结论：Adv—hBMP-2转染同种异体骨髓基质细胞与藻酸钙复合体可用于修复大鼠股骨干节段性骨缺损。     

同种异体骨髓基质细胞修复大鼠股骨缺损

目的：评估腺病毒介导的转BMP-2基因的同种异体骨髓基质干细胞的成骨潜能和免疫原性，探索骨缺损修复新途径。方法：将编码骨髓基质干细胞的基因，通过腺病毒介导转染同种异体骨髓基质干细胞后复合藻酸钙凝胶植入骨缺损部位并应用免疫抑制剂FK506。结果：术后8周检查，Adv—hBMP-2转染的同系骨髓基质干细胞-藻酸钙复合体组、Adv—hBMP-2转染的同种异体骨髓基质干细胞-藻酸钙-FK506复合体组以板层骨为主；Adv—hBMP-2转染的同种异体骨髓基质干细胞-藻酸钙复合体组以编织骨和类骨质为主，内有炎症细胞浸润；Adv-βgal转染的同系骨髓基质干细胞一藻酸钙复合体组、Adv-βgal转染的同种异体骨髓基质干细胞-藻酸钙-FK506复合体组、Adv-βgal转染的同种异体骨髓基质干细胞一藻酸钙复合体组无明显新骨形成．缺损区内为纤维结缔组织。结论：Adv—hBMP-2转染同种异体骨髓基质干细胞-藻酸钙一-FK506复合体可促进长骨干节段性骨缺损的修复。     

两种不同术式治疗中青年腰椎间盘突出症患者疗效比较

目的 比较单纯腰椎间盘髓核摘除术(LD)与腰椎间盘髓核摘除加棘突间非融合弹性内固定术( LD with Coflex system)治疗中青年腰椎间盘突出症(LDH)患者的疗效.方法 收集郑州大学第一附属医院骨科2009年1月至2011年12月接受LD(A组)患者53例,随访时间(21.9±12.6)个月;接受LD with Coflex system(B组)患者21例,随访时间(13.0±9.7)个月.随访期间观察所有随访患者术前及术后的目本矫形外科协会评分(JOA)评分,比较两组受访者疗效.结果 术前术后3个月JOA评分A组为(13.3±1.2,19.0±1.1),B组为(13.0±1.2,19.4±1.3),两组比较差异无统计学意义(P＞0.05);术后12个月和24个月JOA评分A组为(21.9±1.2、24.2±0.9),B组为(25.1±0.8、27.0±1.0),两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 LD with Coflex system 在治疗中青年LDH患者远期疗效优于LD,此术式对中青年患者更有利.     

高分子聚乙烯颈椎融合器在山羊体内的应用

背景：颈椎病手术中常用钛合金颈椎融合器，但其出现下沉等情况常影容性和稳定性。设计：随机分组，观察对比实验。单响疗效。目的：观察自制高分子聚乙烯颈椎融合器在动物体内应用后的生物相位：郑州大学动物实验中心。材料：雌性未孕山羊20只，年龄在1．1～1．6岁。方法：实验于2001-06／11在郑州大学动物实验中心完成。①将山羊随机分为实验组10只，对照组10只。②实验组植入自制颈椎融合器，内填塞自体松质骨，对照组植入自体髂骨块。③6周后两组山羊分别摄X射线片观察椎间隙高度改变；并在麻醉状态下处死动物，将部分颈椎标本置于YJ-14生物力学试验机上测试抗压缩力、椎间隙高度及做病理学观察。主要观察指标：①两组抗压缩力测试及颈椎椎间隙的高度变化。②两组椎间融合处组织病理学观察结果。结果：①两组抗压缩力测试及颈椎椎间隙的高度变化：实验组压缩载荷显著大于对照组[（358．64&;#177;15．63），（268．82&;#177;11．36）N，P〈0．05]；两组相比椎间隙高度差异无统计学意义（P〉0．05）。②两组椎间融合处组织病理学观察结果：实验组融合器周围组织切片有大量骨母细胞生长，与对照组无明显差别。结论：自制颈椎融合器具有很强的支撑力和良好的稳定性，可起到稳定颈椎间隙高度的作用。     

腰椎术后椎间隙感染诊疗探讨

目的探讨腰椎间隙感染的早期诊断与有效的诊疗方法。方法回顾分析1995年1月-2008年10月诊治的28例腰椎间隙感染患者的诊疗过程,比较经后路病灶清除置管持续冲洗与传统的保守治疗方法在疗效方面的差异。结果本组28例腰椎间隙感染患者经手术治疗后,根据改良的Maenad评分标准优良率达96.4%。结论采用经后路病灶清除置管持续冲洗手术治疗腰椎间隙感染,抗生素液直接到达感染椎间隙,有效控制感染,患者能迅速解除症状、缩短疗程,是治疗腰椎间隙感染最为有效的方法。     

经皮椎体成形术中骨水泥对老年骨质疏松症患者凝血功能的影响

目的 观察经皮椎体成形术(PVP)中骨水泥对老年骨质疏松症患者凝血功能的影响.方法 于椎弓根穿刺前10 min、注入骨水泥后1、20 min、2 h分别抽血检测11例患者的凝血功能相关指标,包括血浆凝血酶原时间(PT)、活化的部分凝血酶原时间(APTT)、血浆纤维蛋白原(FIB)和鱼精蛋白副凝固实验(3P实验),并汇总数据进行统计学分析.结果 PVP中骨水泥注入后20 min,PT缩短、FIB增高、3P实验阳性率升高(P<0.05),骨水泥注入2 h后基本恢复至注入前水平.除1例患者PTA术后2 h稍高于正常值(126%),其余患者各个时间点的各项指标均在正常参考值范围内.结论 PVP术中注入骨水泥对于凝血功能正常的患者基本安全,但在注入后会产生一过性轻微的高凝倾向.     

Coflex系统在腰4/5椎间盘突出治疗中的应用效果

目的探讨Coflex系统在腰4/5椎间盘突出治疗中的应用效果。方法收集2009年1月至2011年6月郑州大学第一附属医院收治的67例腰4/5椎间盘突出患者,按治疗方式分为A组(35例)和B组(32例)。A组患者接受单纯腰椎间盘髓核摘除术治疗,B组患者接受腰椎间盘髓核摘除术联合Coflex系统治疗。术后定期随访,分别采用日本矫形外科协会评分(JOA)和Oswestry功能障碍指数(ODI)比较手术前后患者的疼痛和功能改善程度。比较两组患者手术前后椎间隙前后缘高度。结果 A组和B组随访时间分别为(93.1±6.4)、(86.3±2.5)个月,无失访患者,两组患者随访时间比较,差异无统计学意义(P<0.05)。两组患者的JOA评分随术后时间延长而升高,ODI随术后时间延长而下降,并且两相邻时间点比较,差异有统计学意义(均P<0.05)。B组患者术前、术后2 a、末次随访的JOA评分分别与A组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。B组患者术前、术后2 a的ODI分别与A组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。B组患者末次随访的ODI高于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者手术节段椎间隙前缘及后缘高度均随术后时间延长而下降,并且两相邻时间点比较,差异有统计学意义(均P<0.05)。B组患者术前手术节段椎间隙前缘及后缘高度分别与A组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。术后2 a、末次随访,B组患者手术节段椎间隙前缘及后缘高度均高于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论单独采用腰椎间盘髓核摘除术或联合Coflex系统治疗腰4/5椎间盘突出症的效果均较好,但Coflex系统能更好地维持手术节段椎间隙高度。