原发性干燥综合征50例临床分析

<正>原发性干燥综合征是临床较为常见的自身免疫性疾病,是一种以外分泌腺高度淋巴细胞浸润和伴有多种自身抗体为特征的慢性自身免疫性疾病,国内发病率为0.29%~0.77%[1]。以泪腺、涎腺受累最为多见,亦可出现肺、血液、肾脏、神经系统等多系统损伤,且患者容易伴有抑郁或焦虑情绪,导致生活质量下降。该病起病隐匿,病情常会迁延数年甚至出现系统受累时才被诊断,临床表现多样,涉及多种学科,易导致误诊误治,值得专科医生及非专科医生     

金雀异黄酮对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡的影响

【摘要】目的 探讨金雀异黄酮对心肌缺血再灌注损伤(MI/RI)大鼠心肌细胞凋亡Bcl 2、Bax和Caspase 3蛋白及mRNA表达的影响。方法 60只雄性SD大鼠分别为假手术组、模型组、阿司匹林组（10 mg·kg-1·d-1）、金雀异黄酮低剂量组（20 mg·kg-1·d-1）、中剂量组（40 mg·kg-1·d-1）和高剂量组（80 mg·kg-1·d-1）,每组10只。给药2周后经典方法构建MI/RI大鼠模型后HE染色检测心肌组织;采集血清测乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同功酶(CK MB)和α 羟丁酸脱氢酶（α HBD）,采集心脏检测丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、总抗氧化能力(T AOC)和一氧化氮合酶（NOS）;同时,RT PCR和Western Blotting检测心肌组织中Bcl 2、Bax和Caspase 3蛋白及mRNA表达。结果 假手术组心肌排列整齐无断裂,模型组出现大量断裂;与模型组相比,各治疗组明显改善;模型组大鼠血清LDH、CK、CK MB、α HBD高于假手术组（P＜005）,心肌MDA水平高于假手术组（P＜005）,心肌SOD、T AOC及 NOS水平均低于假手术组（P＜005）;与模型组比较,金雀异黄酮三个剂量组和阿司匹林组血清LDH、CK、CK MB、α HBD明显降低（P＜005）,心肌MDA明显降低（P＜005）,心肌SOD、T AOC及NOS明显升高（P＜005）;模型组大鼠心肌Bcl 2蛋白和mRNA表达均低于假手术组（P＜005）,Bax和Caspase 3蛋白和mRNA表达均高于假手术组（P＜005）,而金雀异黄酮三个剂量组和阿司匹林组Bcl 2显著上调（P＜005）,Bax和Caspase 3显著下调（P＜005）。结论 金雀异黄酮可抑制心肌细胞凋亡,同时提高心肌抗氧化能力,抑制MI/RI给心肌带来的损伤。     

血清腹水白蛋白梯度对腹水鉴别诊断的临床价值

目的比较血清腹水白蛋白梯度与渗出液／漏出液概念对腹水鉴别诊断的准确性。方法选择诊断明确患者的51对血清及腹水标本，分为门脉高压组、非门脉高压组，比较两组问白蛋白梯度的差异；51对资料同时被分为渗出液、漏出液组，评价血清腹水白蛋白梯度≥11g／L诊断为门脉高压组，腹水总蛋白≥25g／L、腹水比重≥1．018诊断为渗出液的各自诊断准确率。结果血清腹水白蛋白梯度的诊断准确率为84．3％，腹水总蛋白诊断准确率为70．6％、腹水比重的诊断准确率为58．8％。结论血清腹水白蛋白梯度对腹水鉴别诊断较腹水总蛋白、腹水比重更有价值，腹水分类应以高白蛋白与低白蛋白梯度取代漏出液和渗出液。     

左旋肉碱对大鼠缺血性脑损伤的神经保护作用

目的 观察左旋肉碱(L-carnitine,LC)对大鼠早期缺血性脑损伤和低氧低糖诱导神经细胞损伤的保护作用,并探讨其可能的作用机制.方法 线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型.TTC染色法观察脑梗死面积的改变.采用连二亚硫酸钠(Na2S2O4)合并低糖培养基培养PC12细胞,建立体外细胞低氧低糖模型;MTT法检测细胞活力的改变;SYTOX、PI、TUNEL染色观察细胞的坏死与凋亡;检测各组细胞SOD、ATP酶活性和MDA含量.结果 LC预处理组大鼠脑梗死灶面积较模型组无明显减小(P＞0.05).LC预处理可使低氧低糖诱导的细胞活力增加,坏死与凋亡减少,细胞内SOD、ATP酶活性增高,MDA含量降低(P＜0.05).结论 短期急性注射LC对大鼠缺血性脑损伤保护作用不明显,对体外低氧低糖诱导的PC12细胞损伤具有明显保护作用,其机制可能与增强细胞抗氧化能力、抑制脂质过氧化反应、减少细胞凋亡与坏死有关.     

丙酮酸钠在脑缺血-再灌注损伤中的神经保护作用

目的 探讨丙酮酸钠（SP）对脑缺血-再灌注（IR）损伤的影响。方法 雄性SD大鼠24只,体重200~250g,随机分为三组：假手术+生理盐水组（S组）、脑IR+生理盐水组（M组）、脑IR+丙酮酸钠组（P组）。S组行假手术处理,M组、P组建立大脑中动脉梗死（MCAO）模型,阻断血流2 h,分别于血流再灌注时经尾静脉注射生理盐水或丙酮酸钠600 mg/kg。血流再灌注后24 h,采用TTC法测定脑梗死体积,采用mNSS评分测定神经功能缺损评分,采用Western blot法测定cleaved caspase-3、Bax、cleaved PARP-1蛋白含量以及细胞核内AIF蛋白含量,微板法测定谷胱甘肽（GSH）、超氧化物歧化酶（SOD）以及丙二醛（MDA）水平。结果 与S组比较,M组和P组脑梗死体积明显增加,mNSS评分明显升高;M组cleaved caspase-3、Bax、cleaved PARP-1蛋白含量和AIF细胞核内蛋白含量明显升高,GSH与SOD水平明显降低,MDA水平明显升高（P＜0.05）。与M组比较,P组脑梗死体积明显减小,mNSS评分明显降低,cleaved caspase-3、Bax、cleaved PARP-1蛋白含量和AIF细胞核内蛋白含量明显降低,GSH与SOD水平明显升高,MDA水平明显降低（P＜0.05）。结论 丙酮酸钠能够减轻大鼠脑IR损伤,其神经保护作用可能与减少细胞凋亡以及抑制氧化应激水平相关。     

电磁脉冲对大鼠大脑额叶皮层炎性因子TNF-α、IL-1β及NFκBp65表达的影响

目的:研究电磁脉冲(electromagnetic pulse,EMP)的生物学效应,为免受电磁辐射损伤提供新的研究靶点。方法:成年雄性SD大鼠随机分为四组:对照组、EMP照后1 h组、EMP照后6 h组、EMP照后24 h组。通过HE染色、ELISA和Western Blot实验方法,研究EMP(400 kv/m,200个脉冲)连续辐照3 d后在不同组大鼠大脑额叶皮层神经元的组织学变化、额叶皮层组织炎性因子-肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)以及NFκBp65的表达变化。结果:(1)HE染色结果显示:经EMP辐照6 h后,大脑额叶皮层内异常神经元数目增多,异常神经元细胞核边移,胞浆与细胞核深染。(2)ELISA结果显示:EMP辐照后,大脑额叶皮层内TNF-α水平随时间逐渐升高,于辐照后6 h尤为明显(P0.05),24 h逐渐恢复至正常;IL-1β水平各实验组均较对照组明显升高,于辐照后1 h升高最为明显(P0.05)。(3)Western Blot结果显示:经EMP辐照后,6 h组大脑额叶皮层内NFκBp65的表达明显增多,与对照组相比,差异有统计学意义(P0.05)。结论:电磁脉冲照射会引起大鼠大脑额叶皮层神经元损伤和炎性反应,其机制可能是通过诱导NFκB活化,启动炎性反应,进而导致大脑额叶皮层神经元损伤。     

前脑啡肽原基因转染对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响

目的 观察采用非病毒、非质粒微量免疫原定义的基因表达(minimalistic immunological defined gene expression,MIDGE)方法构建前脑啡肽原(preproenkephalin,PPENK)-MIDGE-核定位序列(nuclear localization sequence,NLS)基因载体在缺血心肌的表达及对心肌的保护作用.方法 48只雄性SD大鼠采用随机数字表法分为4组(每组12只):假手术组(C组)、缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)组(I/R组)、载体组(P组)、拮抗剂组(D组).C组仅进行开胸手术,冠状动脉左前降支(left anterior descending,LAD)挂线不结扎;I/R组开胸结扎LAD 30 min再灌注24 h;P组尾静脉注射PPENK-MIDGE-NLS基因载体24 h后建立心肌I/R模型;D组实验前24 h尾静脉注射PPENK-MIDGE-NLS基因载体,实验前30 min给予纳曲吲哚(1 g/kg).记录缺血前(T0)和缺血30 min(T1)、再灌注30 min时(T2)的MAP、HR;按Lambeth会议标准记录T1和T2心律失常情况并评分;于I/R后24 h用ELISA检测大鼠血清肌钙蛋白I(carciac troponin I,cTnI)、 氯化三苯四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色测量心肌梗死面积、H-E染色观察心肌形态学改变、Western blot检测心肌组织内前脑啡肽(proenkephalin,PENK)的表达.结果 PPENK-MIDGE-NLS基因载体静脉注射后可减轻心肌I/R诱导的MAP、HR下降程度,P组的cTnI低于I/R组和D组(P<0.05),P组大鼠心律失常评分[(2.0±0.9)分]分别低于I/R组[(4.1±0.6)分]和D组[(4.0±1.0)分](P<0.05),P组的心肌梗死面积较I/R组明显减少(P<0.05),H-E染色示P组大鼠心肌损伤程度明显减轻,心肌PENK蛋白表达量明显高于其他组(P<0.05).结论 PPENK-MIDGE-NLS提高心肌缺血区PENK含量,具有心肌保护作用.     

乙酰左旋肉碱预处理对低氧低糖诱导PC12细胞凋亡的影响

目的 评价乙酰左旋肉碱预处理对低氧低糖诱导PC12细胞凋亡的影响.方法 PC12细胞接种于96孔板中,采用随机数字表法,将细胞随机分为5组(n=6):对照组(C组)、细胞损伤组(Ⅰ组)和不同浓度乙酰左旋肉碱预处理组(A1-3组).C组加入含葡萄糖4.5 g/L的DMEM溶液孵育3h;Ⅰ组加入含葡萄糖0.5 g/L和Na2SO4 3 mmol/L的DMEM溶液孵育3h;A1-3组分别加入0.2、0.4和0.6 mmol/L乙酰左旋肉碱孵育24h,然后加入含葡萄糖0.5 g/L和Na2S2O4 3mmol/L的DMEM溶液孵育3h.采用MTT法检测细胞活力,采用TUNEL法检测细胞凋亡率,测定细胞SOD和ATP酶的活性和MDA含量.结果 与C组比较,Ⅰ组细胞活力降低,细胞凋亡率升高,SOD和ATP酶的活性降低,MDA含量增加(P＜0.05),A1-3组细胞活力、细胞凋亡率、SOD和ATP酶的活性和MDA含量差异无统计学意义(P＞0.05);与Ⅰ组比较,A1-3组细胞活力升高,细胞凋亡率降低,SOD和ATP酶的活性升高,MDA含量下降(P＜ 0.05);A1-3组间细胞活力、细胞凋亡率、SOD和ATP酶的活性和MDA含量比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 乙酰左旋肉碱预处理可通过抑制细胞凋亡,减轻低氧低糖诱导PC12细胞损伤.     

新斯的明拮抗老年患者米库氯铵肌松残余的临床效果

目的观察新斯的明对老年患者应用米库氯铵术后肌松残余的影响。方法选择择期行全麻下腹腔镜下胃肠肿瘤切除手术的老年患者46例,男32例,女14例,年龄65~73岁,体重45~80kg,ASAⅠ或Ⅱ级。将患者随机分为两组,研究组(A组,n=22)术后给予拮抗药新斯的明20μg/kg,对照组(B组,n=24)给予等量生理盐水。采用四个成串刺激尺神经,通过拇内收肌的收缩反应以监测并记录术毕时(T_1)、拔管时(T_2)、拔管后5 min(T_3)、10 min(T_4)、30 min(T_5)时的TOFR(T4/T_1,T_1和T_4为第1和第4个颤搐反应高度)。统计拔管时Steward苏醒评分、Ramsay镇静评分及术后不良反应,并记录两组肌松恢复指标:临床时效(M1)(T_1恢复到25%的时间)、恢复指数(M2)(T_1从25%恢复到75%的时间)、TOFR恢复到0.7的时间(M3)、TOFR从0.7恢复到0.9的时间(M4)、停药至拔管时间(M5)。两组在麻醉诱导前和拔管时分别采集动脉血并检测血浆假性胆碱酯酶活性(D1和D2)。结果两组患者性别、年龄、身高、体重、BMI、手术时间、失血量、术毕体温、输液量、D1和D2、苏醒评分和镇静评分差异均无统计学意义。两组患者D1和D2的差值D与手术时间、输液量、失血量的相关性分析中,D与输液量明显相关(P0.05)。A组M1、M2、M3、M4和M5均明显小于B组(P0.05)。T3~T5时A组TOFR明显高于B组(P0.05)。T_3、T_4时A组TOFR0.7和T_4、T_5时A组TOFR0.9的发生率均低于B组(P0.05)。结论米库氯铵肌松恢复快,残余肌松相对较少,使用小剂量新斯的明拮抗使老年患者的麻醉恢复更加安全高效。     

Aβ_(1-42)诱导的小胶质细胞炎性反应对神经元细胞Mecp2蛋白表达的影响

目的:体外研究Aβ_(1-42)诱导的小胶质细胞炎症反应对海马神经元细胞甲基化Cp G结合蛋白(Mecp2)表达的影响。方法:(1)用不同浓度的Aβ_(1-42)(终浓度分别为0,5,10,20,30μmol/L)处理小胶质细胞系(N9),24h后取上清液,ELISA检测每组N9细胞培养上清中炎症因子TNF-α、IL-1β的含量,选择合适的Aβ_(1-42)的终浓度。(2)用Aβ_(1-42)(终浓度为20μmol/L)及TLR4拮抗剂TAK-242(终浓度为1μg/ml)处理小胶质细胞系(N9),分为3组:正常对照组(con组)、单纯Aβ_(1-42)处理组(Aβ_(1-42)组)、Aβ_(1-42)处理后TAK-242干预组(TAK-242组)。24 h后取上清液,ELISA检测每组N9细胞培养上清中炎症因子TNF-α、IL-1β的含量。(3)实验分组同(2),24 h后收集培养液,分别干预生长良好的海马神经元细胞系(HT-22)。24 h后,通过Western Blot、免疫荧光染色方法检测每组HT-22细胞中Mecp2蛋白的表达。结果:(1)ELISA结果显示:与con组相比,Aβ_(1-42)处理后,N9细胞分泌的TNF-α、IL-1β的表达量随Aβ_(1-42)浓度的增加而增加(P0.05)。(2)ELISA结果显示:与con组相比,Aβ_(1-42)组的TNF-α、IL-1β的表达水平明显提高(P0.05);TAK-242组的细胞分泌TNF-α、IL-1β水平较Aβ_(1-42)组显著降低(P0.05)。(3)Western Blot结果显示:与con组相比,Aβ_(1-42)组HT-22细胞中Mecp2蛋白表达明显增加(P0.05);与Aβ_(1-42)组相比,TAK-242组HT-22细胞中Mecp2蛋白表达明显减少(P0.05)。(4)免疫荧光染色结果显示:与con组相比,Aβ_(1-42)组HT-22细胞中Mecp2蛋白表达明显增强;而与Aβ_(1-42)组相比,TAK-242组HT-22细胞中Mecp2蛋白表达减弱。结论:Aβ诱导的小胶质细胞发生炎性反应,导致神经元的损伤,可能是由于这种炎性反应使得神经元细胞中Mecp2蛋白的表达量增加,从而损伤神经元。