产胞外蛋白酶细菌的快速筛选及其发酵产酶条件的初步研究

目的探讨产胞外蛋白酶细菌的快速筛选方法和产酶条件优化。方法取昆明郊区的农田土壤及河沟淤泥,采用含脱脂奶粉的菌种筛选培养基和划线法分离产蛋白酶的菌株,选用5种培养基进行发酵产酶条件优化。结果农田土壤中含有种类较多的产蛋白酶的菌株,菌种单一性不强。YPD培养基发酵的菌种蛋白酶活性高于其他4种培养基。结论利用含脱脂奶粉的筛选培养基进行初筛,YPD进行发酵培养复筛,可以显著提高筛选效率。     

白花丹参顺式还原酮加双氧酶基因的克隆、 分子特征和表达调控分析

目的:获得白花丹参参与乙烯和多胺合成的顺式还原酮加双氧酶(acireductone dioxygenase,ARD)基因(命名为SmARD)序列,并进行生物信息学分析和初步的表达特性研究.方法:利用全长cDNA文库技术,从两年生白花丹参根中获得目的基因SmARD序列.利用BLAST进行序列比对,ORF Finder寻找该基因的开放读码框,prosite分析蛋白质的基本结构域.用半定量RT-PCR检测其在白花丹参幼苗根、茎、叶和成花中的表达情况.结果:得到688 bp的SmARD基因全长序列.具有一个591 bp的开放读码框,编码196个氨基酸,预测蛋白质相对分子质量23.27 kDa.使用预测的SmARD蛋白序列在NCBI中进行蛋白保守域分析,发现SmARD与ARD/ARD'家族具有很高的同源性.半定量RT-PCR表明,SmARD在白花丹参幼苗根、茎、叶和成花等组织中均有转录水平的表达,但是在根部表达最强.水分亏缺处理3 d,150 mmol·L-1 NaCl处理1 d,4℃低温处理1 d和100 μmol·L-1 ABA处理1 d均抑制SmARD的表达,100 μmol·L-1茉莉酸甲脂(MJ)和10 μmol·L-1乙烯利(ETH)处理1 d诱导SmARD的表达.结论:首次得到白花丹参的顺式还原酮加双氧酶(ARD)基因序列,为其参与白花丹参响应逆境和次生代谢产物合成的信号调节功能研究奠定了基础.     

血清唾液酸含量在恶性肿瘤诊断中的临床意义

目的 探讨血清唾液酸含量在恶性肿瘤诊断中的临床意义。方法 选择三组人群即正常对照组、良性疾病组和恶性肿瘤组，采用单一化学比色法检测血清唾液酸含量。结果 恶性肿瘤组血清唾液酸含量明显高于正常对照组和良性疾病组，有高度显著性差异（P〈0．0001）。同时，唾液酸含量测定对恶性肿瘤的阳性检出率也较其它两组有显著性意义（P〈0．0001）。结论 血清唾液酸检测可作为恶性肿瘤的辅助诊断指标。     

oxLDL、LP（a）与心脑血管疾病的关系

应用ＥＬＩＳＡ法检测了１２５例心、脑血管疾病患者及２８例健康者血中氧化型低密度脂蛋白（ｏｘＬＤＬ）及脂蛋白ａ〔ＬＰ（ａ）〕，结果表明脑梗塞、脑出血及冠心病三组疾病ｏｘＬＤＬ及ＬＰ（ａ）含量显著高于对照组（Ｐ＜０．０１），其阳性率亦高于对照组，尤以脑梗塞最为显著，ｏｘＬＤＬ及ＬＰ（ａ）阳性率高达７６．３％和７３．７％，结果说明ｏｘＬＤＬ及ＬＰ（ａ）与心、脑血管疾病发生有关，本方法可以做心、脑血管疾病的辅诊手段之一。     

中草药提取物的体外抑菌活性研究

目的探讨10种中草药提取物的体外抗菌活性。方法制备10种中草药提取物,采用试管连续稀释法对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和白色念珠菌进行体外抑菌试验。结果10种中草药的提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和白色念珠菌有不同程度的抑制活性;其中尤以赤芍、石榴皮、五味子和黄连的提取物抗耐药菌活性最高,赤芍提取物对上述4种菌的抑制活性均较高,其最低抑菌浓度(MIC)分别为7.80、1.95、1.957、.80 mg/ml。结论赤芍、石榴皮、五味子和黄连提取物呈现广谱抗菌特性,且具有抗耐药菌作用。     

泰山蛹虫草菌产胞外多糖发酵工艺的研究

目的研究蛹虫草菌产胞外多糖的最佳发酵培养基和发酵条件。方法采用干重法测定菌丝生物量。采用硫酸-苯酚法测定多糖含量。结果蛹虫草产胞外多糖最佳发酵培养基组成为:蔗糖6%,硝酸钾0.2%,酵母膏2%,MgSO4.7H2O 0.02%,K2HPO40.04%,FeSO4.7H2O 0.002%;优化发酵培养条件为:接种量6%,初始pH7.0,温度24℃。结论在优化的培养基组成和发酵条件下,蛹虫草胞外多糖产量为4.84 g/L,菌丝体干重为21.12g/L。     

丁香等中草药有效成分的提取方法和抗菌活性关系的研究

目的探讨8种中药材有效成分的不同提取方法与抗菌活性的关系。方法分别用水煮法、醇提法和超声法提取8种中药材的有效成分，采用试管连续稀释法测定其最小抑菌浓度，探讨不同提取方法的优劣。结果除蜂房外，7种中草药的醇提取物对大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果很明显，丁香的醇提物对铜绿假单胞菌抑制效果最佳，各提取液对白色念球菌抑制效果普遍不明显。除蜂房及穿心莲外的其它6种中草药醇提液的最低抑菌浓度（MIC）均显著低于其他提取方法。就抑菌效果和相对稳定性来说，丁香最为明显。结论用不同方法提取中草药有效成分的抑菌效果比较发现，醇提法最优，其次为超声波提取法，水提法最差。     

猫须草超临界CO2萃取物的GC-MS分析及其抑菌作用

目的 对猫须草超临界CO₂萃取法制备的提取物进行化学成分分析及体外抑菌作用研究。方法 利用超临界CO₂萃取法提取猫须草中化学成分,利用GCMS法分离并分析其化学成分,采用面积归一化法定量;采用Kirby-Baue纸片扩散法观察提取物对各种细菌的抑制效果。结果 CO₂超临界萃取法的萃取率为0.8%,鉴定出19种成分,以萜烯类化合物为主要成分,其数量占总量的67.17%。醇类化合物次之,数量占总量的26.10%。不同浓度的猫须草超临界CO2萃取物对各种细菌生长都有一定的抑制作用,并随提取物浓度的降低,抑菌效果明显减弱;其中,猫须草超临界CO₂萃取物对肺炎链球菌的抑制效果最明显,其次对金黄色葡萄球菌、福氏Ⅱ型杆菌的抑菌效果也比较明显。结论 猫须草超临界CO₂萃取物中的化合物均为首次分离鉴定,其在体外有一定的抑菌作用。     

文献阅读在细胞工程教学中的应用和意义

细胞工程是生物技术和生物工程专业本科生教育的核心课程,其理论教学在本科生培养中发挥着重要的作用。在细胞工程理论教学中引入文献阅读,不仅有利于激发学生的学习兴趣,还能提高他们的文献阅读以及分析问题的能力。     

腰椎软骨结节的多层螺旋CT分型及临床意义

目的提高对腰椎软骨结节的认识,探讨多层螺旋CT多平面重组对本病的分型及其临床意义。方法回顾性分析85例经16层螺旋CT机容积扫描的腰椎软骨结节患者,并进行多平面重组,最后由2名有经验的CT诊断医师进行评价。结果85例腰椎软骨结节分为椎体中央型、椎体前缘型和椎体后缘型（LMPN）三种类型。CT表现为椎体局部骨质缺损,其内有椎间盘密度充填,周边骨质硬化。椎体中央型46例70个结节;椎体前缘型15例15个结节;椎体后缘型（LPMN）24例24个结节,均伴发椎体后缘离断,硬膜囊及神经根容易受压,18例继发椎管狭窄。结论MSCT能明确腰椎软骨结节的分型与诊断,椎体中央型与椎体前缘型软骨结节多无临床意义,而椎体后缘型（LPMN）常继发椎体后缘离断与椎管狭窄,临床症状明显,MSCT对制订手术方案具有重要指导意义。