丁香等中草药有效成分的提取方法和抗菌活性关系的研究

目的探讨8种中药材有效成分的不同提取方法与抗菌活性的关系。方法分别用水煮法、醇提法和超声法提取8种中药材的有效成分，采用试管连续稀释法测定其最小抑菌浓度，探讨不同提取方法的优劣。结果除蜂房外，7种中草药的醇提取物对大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果很明显，丁香的醇提物对铜绿假单胞菌抑制效果最佳，各提取液对白色念球菌抑制效果普遍不明显。除蜂房及穿心莲外的其它6种中草药醇提液的最低抑菌浓度（MIC）均显著低于其他提取方法。就抑菌效果和相对稳定性来说，丁香最为明显。结论用不同方法提取中草药有效成分的抑菌效果比较发现，醇提法最优，其次为超声波提取法，水提法最差。     

产胞外蛋白酶细菌的快速筛选及其发酵产酶条件的初步研究

目的探讨产胞外蛋白酶细菌的快速筛选方法和产酶条件优化。方法取昆明郊区的农田土壤及河沟淤泥,采用含脱脂奶粉的菌种筛选培养基和划线法分离产蛋白酶的菌株,选用5种培养基进行发酵产酶条件优化。结果农田土壤中含有种类较多的产蛋白酶的菌株,菌种单一性不强。YPD培养基发酵的菌种蛋白酶活性高于其他4种培养基。结论利用含脱脂奶粉的筛选培养基进行初筛,YPD进行发酵培养复筛,可以显著提高筛选效率。     

泰山黄精内生真菌的分离鉴定及抑菌活性研究

目的 研究泰山黄精内生真菌的分布及其多样性,并筛选具有抑菌活性的内生真菌.方法 采用平板分离法分离黄精内生真菌,采用滤纸片扩散法测试黄精内生真菌培养物抗耐药菌活性,同时采用分子生物学方法对筛选出的活性菌株进行鉴定.结果 从泰山野生黄精的根、茎、叶和果实中共分离出32株内生真菌,分属于7个属,分布最广的类群是镰刀菌属Fusarium sp.,占总菌株的31.3％,其次是不产孢真菌Sterile mycelia (28.1％)和链格孢属Alternaria sp.(21.9％).各组织中内生真菌的分布存在一定的组织差异性,根中内生真菌的分离率最高,茎和叶中次之,果实中最少.共有来自5个属的14株内生真菌至少对1种供试菌株有抗菌活性,其中8株具有广谱抗耐药菌活性.对活性最强、抑菌谱最广的不产孢菌株HJG-10进行分子生物学鉴定,将其确定为裂褶菌Schizophyllum commune.结论 泰山黄精中蕴含着大量具有抑菌活性的内生真菌,为寻找和开发新型抑菌生物制剂开辟了一条新途径.     

泰山黄精内生真菌的分离鉴定及抑菌活性研究

目的 研究泰山黄精内生真菌的分布及其多样性,并筛选具有抑菌活性的内生真菌。方法 采用平板分离法分离黄精内生真菌,采用滤纸片扩散法测试黄精内生真菌培养物抗耐药菌活性,同时采用分子生物学方法对筛选出的活性菌株进行鉴定。结果 从泰山野生黄精的根、茎、叶和果实中共分离出32株内生真菌,分属于7个属,分布最广的类群是镰刀菌属Fusarium sp.,占总菌株的31.3%,其次是不产孢真菌Sterile mycelia（28.1%）和链格孢属Alternaria sp.（21.9%）。各组织中内生真菌的分布存在一定的组织差异性,根中内生真菌的分离率最高,茎和叶中次之,果实中最少。共有来自5个属的14株内生真菌至少对1种供试菌株有抗菌活性,其中8株具有广谱抗耐药菌活性。对活性最强、抑菌谱最广的不产孢菌株HJG-10进行分子生物学鉴定,将其确定为裂褶菌Schizophyllum commune。结论 泰山黄精中蕴含着大量具有抑菌活性的内生真菌,为寻找和开发新型抑菌生物制剂开辟了一条新途径。     

PI3K/mTOR抑制剂BEZ235抑制HepG2细胞增殖及与阿霉素的协同效应

目的探讨PI3K/Akt和mTOR双重抑制剂BEZ235对HepG2肝癌细胞增殖和凋亡的影响,并观察BEZ235与阿霉素合用的联合作用。方法采用MTT法检测HepG2细胞增殖;流式细胞术分析细胞周期变化;AnnexinⅤ-FITC试剂盒检测细胞凋亡;免疫印迹法检测蛋白表达水平。结果BEZ235 2.5μmol.L-1～7.5μmol.L-1能够抑制HepG2细胞的增殖,且抑制作用呈时间和剂量依赖性。HepG2细胞经BEZ235处理后,细胞阻滞于G1期,cyclinD1表达水平下调,而cyclinB1的表达则不受影响。BEZ235明显增强了阿霉素对HepG2细胞的抑制作用,并促进阿霉素下调β-catenin的表达。结论 BEZ235对人肝癌细胞HepG2的生长具有显著的抑制作用;联合应用BEZ235和DOX协同抑制HepG2细胞的增殖,其机制可能与共同调节β-catenin通路相关。