中国人视神经脊髓炎疾病谱NMO-IgG/anti-AQP4抗体检测方法学的比较

[目的]建立NMO-IgG/anti-AQP4抗体检测的间接免疫荧光法(IIF),细胞分析法(CBA)和荧光免疫沉淀法(FIPA)法;研究并比较不同的检测方法对中国人群NMO疾病谱的检测效率.[方法]建立3种检测NMO-IgG/anti-AQP4抗体的方法,包括IIF、CBA和FIPA.应用盲法检测病人血清106例,其中视神经脊髓炎(NMO)组24例,纵形扩展性脊髓炎(LETM)组22例,多发性硬化(MS)组30例,健康对照(HC)组30例;对其检测的阳性率进行分析.[结果]通过3种方法检测,发现NMO组NMO-IgG/anti-AQP4抗体阳性率分别为IIF(62.5%,15/24),CBA(91.7%,22/24)及FIPA(75.0%,18/22),LETM组为IIF(59.1%,13/22),CBA(86.4%,19/22)及FIPA(72.3%,16/22),MS组IIF、CBA及FIPA均为(3.3%,1/30).正常对照组未见该抗体阳性表达.NMO组及LETM组血清NMO-IgG/anti-AQP4抗体阳性率明显高于Ms和健康对照组.[结论]在中国人群NMO疾病谱患者中,IIF、CBA和FIPA的检测效率基本和美欧报道一致.IIF是该抗体检测的基础方法;CBA法看起来最为敏感;FIPA检测可以量化该抗体,可用于临床高通量大样品筛查.     

中国人视神经脊髓炎疾病谱NMO-IgG/anti-AQP4抗体检测方法学的比较

 【目的】 建立NMO-IgG/anti-AQP4抗体检测的间接免疫荧光法(IIF),细胞分析法(CBA)和荧光免疫沉淀法(FIPA)法;研究并比较不同的检测方法对中国人群NMO疾病谱的检测效率｡【方法】 建立3种检测NMO-IgG/anti-AQP4抗体的方法,包括IIF､CBA和FIPA｡应用盲法检测病人血清106例,其中视神经脊髓炎(NMO)组24例,纵形扩展性脊髓炎(LETM)组22例,多发性硬化(MS)组30例,健康对照(HC)组30例;对其检测的阳性率进行分析｡【结果】 通过3种方法检测,发现NMO组NMO-IgG/anti-AQP4抗体阳性率分别为IIF (62.5%,15/24), CBA (91.7%,22/24) 及FIPA(75.0%,18/22),LETM组为IIF (59.1%,13/22), CBA (86.4%,19/22) 及FIPA (72.3%,16/22),MS组IIF､ CBA及FIPA均为(3.3%,1/30)｡正常对照组未见该抗体阳性表达｡NMO组及LETM组血清NMO-IgG/anti-AQP4抗体阳性率明显高于MS和健康对照组｡【结论】 在中国人群NMO疾病谱患者中,IIF､CBA和FIPA的检测效率基本和美欧报道一致｡IIF 是该抗体检测的基础方法;CBA法看起来最为敏感;FIPA检测可以量化该抗体,可用于临床高通量大样品筛查｡     

A 65-year-old man with Infratentorial diffuse encephalopathy and hydrocephalus

Tuberculous encephalopathy (TBE) is an important diagnosis in countries with a high prevalence of tuberculosis. TBE is a life-threatening condition but is rarely reported in the modern literature. We report a case of a man with extensive parenchymal lesions involving the brainstem and right cerebellar hemisphere that resolved after treatment. The clinical, laboratory and pathological features of this case are highlighted and the pathogenesis discussed.     

神经生长因子对脑缺血再灌注大鼠突触素表达的影响

为研究大鼠脑缺血再灌注后突触素p38表达的变化规律及其与神经生长因子的关系,取大鼠72只,随机分为假手术组,人工脑脊液组和神经生长因子治疗组,采用线栓法建立大脑中动脉缺血再灌注模型,应用免疫组织化学方法观察P38的表达,结果发现,脑缺血再灌注3天后P38表达增高,第7天达高峰,之后逐渐降低,第21天降至对照组水平,应用外源性神经生长因子后,P38表达较对照组无明显升高（P＞0．05）,提示中枢神经系统损伤后,神经元具有再生和修复的可塑性,外源性神经生长因子对P38的调节有待于进一步研究。     

SYBR Green荧光定量PCR检测外源ATP7B对于内源CP基因转录的影响

[目的]应用SYBR Green荧光定量PCR检测在正常BRL细胞中短暂转染人ATP7B cDNA后CP基因的转录情况.[方法]分为空质粒组(转染空质粒Kbpala/Alb)和处理组(转染野生型Kbpala/Alb-ATP7B),分别于转染后0、4、8、12、24、48、72、168 h提取mRNA,逆转录后行SYBR Green荧光PCR检测人ATP7B cDNA及大鼠CP基因的转录情况.SAS11.0统计软件进行数据处理和分析.[结果]人ATP7B cDNA在短暂转染后约48h转录达高峰,可持续至转染后7 d以上;经方差分析,空质粒组转染后各时间点CP基因的转录水平与t=0 h相比较P＞0.05;处理组亦是.[结论]外源ATP7B cDNA的转染及表达对于内源性CP基因的转录无影响.     

小鼠肝脏特异性表达载体ALB-ATP7B的构建

[目的] 构建人肝豆状核变性病 ATP7B基因野生型及常见突变型的小鼠肝脏特异性表达载体 ALB-ATP7B,为制备转基因小鼠及相关基因治疗作准备.[方法] 定点突变法获取人群中常见的 Arg778Leu及 His1069Gln两种 ATP7B基因突变体,定向克隆将小鼠白蛋白启动子 ALB序列及野生和突变的 ATP7B基因亚克隆至真核表达载体 kbpala上,得到可在小鼠肝脏特异性表达的人 ATP7B基因正常及突变型真核表达载体 ALB-ATP7B.[结果] 经测序及酶切鉴定证实,真核表达载体 ALB-ATP7B构建成功.[结论] 人类正常及突变 ATP7B基因真核表达载体 ALB-ATP7B的构建初步奠定了转基因小鼠制备的基础.     

伴耳鸣和听力下降的重症肌无力(附7例报告)

目的探讨重症肌无力(MG)患者伴有耳鸣和听力下降的诊断与鉴别诊断及可能的机制。方法7例伴耳鸣和听力下降的MG患者在注射新斯的明前后进行脑干诱发电位(BAEP)和电测听检查,并随访。结果所有患者在抗胆碱酯酶药治疗前BAEP检查均异常,治疗后检查BAEP好转或恢复正常,耳鸣和听力下降症状6例消失,1例好转。结论MG患者的耳鸣和听力下降可能与听神经传导通路和中耳听小骨肌神经-肌肉接头受累有关,无需特殊治疗。     

脑脊液漏致自发性低颅压综合征的诊断和治疗(1例报道及文献复习)

目的　探讨自发性脑脊液漏所致的自发性低颅压综合征诊断治疗的方法。方法　对 1例脑脊液漏致自发性低颅压综合征应用同位素脑池造影和脊髓造影后CT薄层扫描确定脑脊液漏口的位置 ,然后在相应节段进行硬膜外血液修补治疗 ,并进行随诊观察。结果　同位素脑池造影没有发现脑脊液漏的直接征象 ,但放射性核素过早在膀胱内出现 ,并难以升达枕大孔和基底池到达脑部 ,显示有脑脊液漏的间接征象 ;脊髓造影后进行CT薄层扫描显示脑脊液漏发生在T4 段 ,17mL自体血注入病人的硬膜外腔 ,3天后病人症状缓解 ,临床治愈。结论　同位素脑池造影能够提供脊髓脑脊液漏的间接证据 ,脊髓造影后CT薄层扫描能够准确确定脑脊液的漏口位置 ,硬膜外血液修补是治疗该病最为有效的方法。     

小鼠肝脏特异性表达载体ALB-ATP7B的构建

【目的】构建人肝豆状核变性病ATP7B基因野生型及常见突变型的小鼠肝脏特异性表达载体ALB—ATP7B，为制备转基因小鼠及相关基因治疗作准备。【方法】定点突变法获取人群中常见的Arg778Leu及Hisl069Gln两种ATP7B基因突变体，定向克隆将小鼠白蛋白启动子ALB序列及野生和突变的ATP7B基因亚克隆至真核表达载体kbpala上，得到可在小鼠肝脏特异性表达的人ATP7B基因正常及突变型真核表达载体ALB—ATP7B。【结果】经测序及酶切鉴定证实，真核表达载体ALB—ATP7B构建成功。【结论】人类正常及突变ATP7B基因真核表达载体ALB—ATP7B的构建初步奠定了转基因小鼠制备的基础。     

TX小鼠铜代谢和肝损害的实验研究

Objective To provide right time points in selection of right aged animals and the normal physiological data of TX mice.Methods 7-12 months old TX and DL mice were studied,each group contained 3 female and 3 male mice of TX or DL mice.The concentration of copper in the serum,dry tissues (liver,brain and kidney),together with copper biochemistry indexes were measured.The liver histopathology was observed under light microscopy and electron microscope.Results Transaminase increased significantly only in 10 and 11-month-old(ASTX10=218.3 U/L,ASTTX11=197.5 U/L,ASTDL10=171.5 U/L,ASTDL11=165.0 U/L,P10＜0.001,P11=0.022),but the copper concentration of liver,brain and kidney was significantly increased dunng 7-1 2 month old(the average concentration of copper,LiverTX=(750.0±85.5)mg/kg,BrainTX=(39.7±2.2)mg/kg,KidneyTX=(29.8±5.0)mg/kg.LiverDL=(11.6±1.5)mg/kg,BrainDL=(16.8±0.9)mg/kg,KidneyDL=(14.2±1.0)mg/kg,t=21.16,23.60,7.47,for all these organs P＜0.05).Conclusion TX mice is a suitable model of liver disease with natural recovery,so selecting animal model of suitable time point is very important.