环孢菌素A联合霉酚酸酯预防小鼠H-2半相合非清髓性骨髓移植后GVHD的发生

为探讨环孢菌素A(CSA)联合霉酚酸酯 (MMF)方案对小鼠主要组织相容性抗原 (H 2 )半相合非清髓性骨髓移植后急性移植物抗宿主病 (aGVHD)的预防作用 ,建立了H 2半相合小鼠 (供鼠为C5 7BL/6J,受鼠为C5 7BL/6J×BALB/C杂交F1代小鼠 )的非清髓性骨髓移植模型。采用CSA +MMF或CSA +MTX作为aGVHD预防方案 ,观察 5 0天 ,记录受鼠发生aGVHD情况。结果显示 ,未做aGVHD预防的小鼠在移植后 2 2 - 2 5天出现典型的aGVHD症状 ,aGVHD发生率为 75 % (15 /2 0 ) ,致死率为 10 0 % (15 /15 )。接受aGVHD预防的小鼠 ,aGVHD症状和病理表现均明显减轻 ,CSA +MTX方案组aGVHD发生率为 4 0 % (8/2 0 ) ,致死率为 6 2 .5 % (5 /8) ,CSA +MMF方案组aGVHD发生率为 30 % (6 /2 0 ) ,致死率为 5 0 % (3/6 ) ,均显著低于未预防组 (P <0 .0 5 ) ,但两预防组之间无显著性差异。结论 :CSA +MTX预防方案能有效降低H 2半相合非清髓性骨髓移植小鼠aGVHD的发生率和致死率 ,而CSA +MMF方案能进一步减轻aGVHD的症状及病理损害程度。     

染色体核型分析及短串联重复序列-聚合酶链反应检测非清髓异基因造血干细胞移植造血细胞嵌合体

非清髓异基因造血干细胞移植 (ＮＡＳＣＴ)由于与传统的异基因造血干细胞移植 (ａｌｌｏ ＳＣＴ)植入方式不同 ,ＮＡＳＣＴ多通过建立稳定的嵌合体 ,逐渐过渡为供者植入[1 ] 。因此 ,ＮＡＳＣＴ后对植入状况的评估显得更为重要。为评估ＮＡＳＣＴ后植入状况 ,我们以传统的细胞遗传学分析结合我室新建立的短串联重复序列 聚合酶链反应 (ＳＴＲ ＰＣＲ) ,对我院开展的 15例ＮＡＳＣＴ患者进行了随访观察 ,现将结果报告如下。病例和方法1　病例　在我院行ＮＡＳＣＴ的血液病患者 15例 ,男 10例 ,女5例 ,年龄 2 3～ 5 6岁 (中位年龄 36岁 )。重…     

骨髓间充质干细胞防治多脏器衰竭

Objective The patients with lethal irradiation after sucessful hematopoietic stem cells transplan-tation had blood recovery, but did not avoid to died of multiple organ failure(MOF). To overcome the block, the article investigated mechanisms of mesenchymal stem cells (MSCs) protecting lethal radiated mice from multiple organ failure after haploid bone marrow cells transplantation. Method BALB/c mice irradiated with 8Gy60COγ-rays were randomly divided into two groups: MSCs group, infused MSCs labeled with cm-DiI and bone marrow monocytes of CB6F1 mice; Control group, only infused bone marrow monocytes; normal group, mice were infused cm-DiI marked MSCs without irradiation. The distribution of MSCs and the serous densities of Il-2, Il-10 and TNF-α in the recipients were observed after transplantation. Results MSCs collected in the bone marrow and the intes-tine in normal group at 15 d,in MSCs group MSCs enriched the different organs at 3,15 and 30 d. MSCs regulated down the secretion of IL-2 and TNF-α,and up the IL-10 density. Conclusions MSCs protected mice from multiple organ failure through above effects and may be open a new treatment strategy on acute radiation syndrome by stem cells.     

猕猴单倍体相合外周血造血干细胞移植后多种细胞因子mRNA表达的动态分析

本研究分析猕猴单倍体相合造血干细胞移植前后外周血单个核细胞中细胞因子（TGF-β,IL-2,IL-6,IL-10,IFN-γ,TNF-α,FAS-L）mRNA的表达并探讨这些细胞因子在急性移植物抗宿主病（aGVHD）发生和病理变化中的作用,以寻找能够早期预测和鉴别诊断aGVHD的指标.5例猕猴经非清髓预处理后接受单倍体相合外周血造血干细胞移植;半定量逆转录聚合酶链反应法（RT-PCR）检测移植前后8种细胞因子mRNA的表达,动态观察这些细胞因子在移植后aGVHD中的表达情况.结果表明：5例猕猴均成功获得造血重建.1例移植排斥,长期无病存活;其余4例为混合嵌合和完全嵌合植入,1例低比例嵌合植入经第二次;注供者外周血造血干细胞后获得高比例嵌合植入;1例发生肠道Ⅲ度GVHD.移植前后体内Th1和Th2类细胞因子都有不同程度的变化,在aGVHD期间TGF-β呈下调表达,其余均为上调表达;植入比例减低的猕猴各细胞因子也下降至移植前水平.结论：TGF-β在aGVHD发生前的下降趋势可能是GVHD预测指标,并且能够作为肠道GVHD的鉴别诊断指标.     

急性未分化型白血病的基因重排及免疫学分析

本文联合用细胞形态学、细胞化学、免疫学分型、免疫球蛋白重链(IgH)和T细胞受体(TCR)基因重排及电镜下过氧化物酶(EMPO)等多参数研究分析了14例急性未分化型白血病(AUL)。结果发现,AUL均缺乏典型的细胞形态和细胞化学特征,8例表达CD_9、HLA-DR抗原及CD19抗原或可检出IgH基因重排,属早期B细胞来源;4例形态学、细胞化学似ALL,无淋巴系抗原但表达1至多种粒系抗原或对EMPO阳性,属早期粒细胞来源,诊断为MPO~-AML或AML-MO。2例无任何抗原表达属于干细胞或细胞来源不明者。本文还分析了AUL的疗效并发现AUL表达CD19~+、CD9~+、DR~+者对ALL方案效果好。表达粒系抗原者对AML方案反应好,应推荐按其细胞标志选用化疗方案。AUL,CR期短,容易复发,应建议对AUL采用较强诱导化疗及骨髓移植以延长其生存期。最后,本文还讨论了AUL的诊断条件,并建议在Raghavachar诊断标准的基础上增加对CD19~-、CD22~-、CD13~-、CD33~-两点以严格AUL的标准。     

骨髓间充质干细胞防治多脏器衰竭

Objective The patients with lethal irradiation after sucessful hematopoietic stem cells transplan-tation had blood recovery, but did not avoid to died of multiple organ failure(MOF). To overcome the block, the article investigated mechanisms of mesenchymal stem cells (MSCs) protecting lethal radiated mice from multiple organ failure after haploid bone marrow cells transplantation. Method BALB/c mice irradiated with 8Gy60COγ-rays were randomly divided into two groups: MSCs group, infused MSCs labeled with cm-DiI and bone marrow monocytes of CB6F1 mice; Control group, only infused bone marrow monocytes; normal group, mice were infused cm-DiI marked MSCs without irradiation. The distribution of MSCs and the serous densities of Il-2, Il-10 and TNF-α in the recipients were observed after transplantation. Results MSCs collected in the bone marrow and the intes-tine in normal group at 15 d,in MSCs group MSCs enriched the different organs at 3,15 and 30 d. MSCs regulated down the secretion of IL-2 and TNF-α,and up the IL-10 density. Conclusions MSCs protected mice from multiple organ failure through above effects and may be open a new treatment strategy on acute radiation syndrome by stem cells.     

恶性血液病伴发侵袭性肺曲霉病3例诊治分析

侵袭性肺曲霉病诊断图难，病情凶险，死亡率高。本对合并有侵袭性肺曲霉病的3例恶性血液病(2例急性白血病和l例MDS-RA)患的诊治过程进行了回顾性分析。3例患均有免疫力低下的病史，虽经过预防性抗真菌治疗，仍发生了肺曲霉菌感染，经过痰培养确诊后采用脂质体两性霉素B，伊曲康唑和氟胞嘧啶联合治疗。结果表明，联合治疗7—14天后，3例中2例痊愈，l例显效。结论：对侵袭性肺曲霉病的早期诊治很关键，脂质体两性霉素B，伊曲康硅和氟胞嘧啶联合治疗起效快，效果好。     

猕猴异体间充质干细胞输注安全性评价及异体存活分析

目的:探讨经静脉或骨髓内输注异体猕猴间充质干细胞(MSCs)的安全性以及异体MSCs是否能归巢骨髓并长期存活.方法:用密度梯度离心和贴壁筛选法分离、培养猕猴骨髓中的MSCs,观察其生物学特性.用流式细胞仪检测MSCs的细胞表型,采用不同培养条件诱导多向分化,用特异性染色鉴定;将雄性猕猴的MSCs经静脉输注或骨髓内输注给雌性猴,评价其不良反应和移植物抗宿主病(GVHD)表现,用PCR法检测受者骨髓中的Y特异性序列,评价MSCs在异体存活情况.结果:成功培养了猕猴的MSCs,多向分化实验证明其可分化为脂肪和成骨细胞;输注后未见急、慢性毒性反应和GVHD表现,部分雌性猕猴体内可检出Y特异性序列.结论:猕猴异体静脉或骨髓内输注MSCs未见急、慢性不良反应和GVHD,MSCs可在异体骨髓内存活.     

骨髓间充质干细胞移植治疗硬皮病样慢性移植物抗宿主病:4例免疫机制变化

背景:骨髓间充质干细胞由于具有免疫调节能力使其能用于治疗移植物抗宿主病,特别是治疗急性移植物抗宿主病己获临床成功,但是对于治疗慢性移植物抗宿主病,特别是硬皮病样慢性移植物抗宿主病(ScGVHD)的研究报道还很少.目的:评价骨髓间充质干细胞治疗ScGVHD的有效性及安全性,同时探讨取得疗效的免疫学机制.方法:于2006-09/2008-08在解放军307医院血液移植科接受骨髓间充质干细胞髓内注射ScGVHD患者4例,男3例,女1例;中位年龄41岁.骨髓间充质干细胞髓内注射具体方法:取右髂前上棘为穿刺注射点,注射骨髓间充质干细胞悬液,4例患者的给药剂量基本控制在(1.0～2.0)×10~7个细胞/次,行间断多次给药.合并用药亦有差异,但都为治疗ScGVHD的传统药物,且用量大为减少.结果与结论:经过多次骨髓内输注骨髓间充质干细胞后,Th细胞的比例发生了明显的变化,Th1的比例上调,Th2的比例相应的下调,从而使两者达到了新的平衡点.与之相应,患者的临床症状也逐渐好转.而且在骨髓间充质干细胞治疗的随访期内,患者的生命体征和实验室检查指标均未发现异常,也未出现白血病的复发.证明骨髓间充质干细胞对ScGVHD是有治疗效果的,为临床治疗ScGVHD开辟了一个新的方法,从而能提高自血病患者骨髓移植的存活率.但由于样本数较少,需要进一步扩大规模进行临床研究,以进一步证实其安全性和疗效.     

极重度骨髓型与肠型急性放射病的救治进展

极重度骨髓型与肠型急性放射病(ARS)一直是医学难以攻克的热点问题。本文从4个方面概括ARS治疗的新进展:①WR-2721作为细胞防护剂的机制和早期应用,可能阻断组织器官的不可逆性放射损伤;②细胞因子治疗放射病的新进展,提出重视造血恢复后患者的免疫重建;③造血干细胞移植的适应证,骨髓间充质干细胞对放射病有重要治疗意义;④放射病的抗感染防护和治疗,临床真菌感染症状出现前,抗真菌用药的适应证。