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目的 探讨rDNA-ITS基因序列在吸血蠓分子鉴定中的应用前景。方法 通过PCR扩增获取台湾蠛蠓rDNA-ITS基因,测定分析ITS1和ITS2基因序列,构建系统发育树。结果 台湾蠛蠓ITS1和ITS2片段长度分别为310 bp与360 bp,与汤斯维尔铗蠓的同源性最大,分别为71%和92%。系统发育分析显示,基于ITS1、ITS2基因序列的分子鉴定结果与传统形态学鉴定结果一致。结论 rDNA-ITS基因序列可作为蠓科昆虫分子鉴定的分子标记。 相似文献
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目的:优化幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)oipA核酸疫苗,构建含oipA核酸的SL7207(减毒伤寒沙门氏菌)重组菌株,并研究其在防御H.pylori感染中的作用。方法:对oipA基因进行密码子优化,Kozak前导序列添加、CpG序列优化,将oipA优化前后的基因分别克隆入pVAX1真核表达载体,获得pVAX1-oipA和pVAX1-optioipA重组子,将上述重组子与空载体pVAX1瞬时转染AGS细胞,应用Western blot检测转染细胞中OipA蛋白的表达。将重组子转化LB5000进行甲基化修饰,利用修饰后重组子转化终宿主菌SL7207,提取SL7207/pVAX1-oipA,SL7207/pVAX1-optioipA菌株质粒进行PCR,酶切鉴定。用SL7207/pVAX1-oipA和SL7207/pVAX1-optioipA免疫C57BL/6小鼠,末次免疫2周后检测抗OipA抗体,并在末次免疫4周后予H.pyloriSS1(5×108CFU/只)攻击,攻击3次,隔天一次,攻击4周后处死动物,取胃组织做快速尿素酶实验和H.pylori定量培养以检测H.pylori感染状况。结果:pVAX1-oipA、pVAX1-optioipA均可在AGS细胞中表达,且pVAX1-optioipA的OipA蛋白表达量高于pVAX1-oipA;从SL7207/pVAX1-oipA和SL7207/pVAX1-optioipA抽提的质粒,经PCR,酶切鉴定正确;免疫小鼠血清中产生抗OipA蛋白的特异性抗体IgG,且pVAX1-optioipA疫苗组诱导IgG水平明显高于pVAX1-oipA疫苗组(P0.01);pVAX1-oipA、pVAX1-optioipA疫苗组H.pylori感染率分别为60%(9/15)、26.67%(4/15),明显低于对照组100%(10/10)(P0.01)。结论:成功构建携带pVAX1-oipA,pVAX1-optioipA的SL7207重组菌株,并验证其对C57BL/6小鼠H.pylori感染具有免疫预防作用,且优化oipA基因有助于提高免疫保护效果。 相似文献
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幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)是引起萎缩性胃炎和胃溃疡等慢性炎症的致病因子,流行病学和动物实验证实,Hp慢性感染是导致胃癌的重要危险因素,1994年世界卫生组织已将其列为Ⅰ类致癌原Ⅲ。Hp感染机体后在临床上所表现出的不同结局除与宿主和环境因素有关外,还与Hp菌株的异质性,即基因组的高度多态性有关, 相似文献
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目的 研究透明保持器的不同清理方式对牙周健康的影响,为正畸结束后佩戴透明保持器的患者选择合理的清理方法、预防牙周疾患提供参考。方法 将正畸结束后佩戴透明保持器的患者60名随机分为3个组(A、B和C组),每组分别使用牙刷清理、义齿清洁剂清理及牙刷清洗加义齿清洁剂清理,在1周时和第12周时分别记录患者的菌斑指数(PLI),出血指数(BI),并提取龈沟液,测量硫化物(PS),结果用SPSS 19.0软件统计分析。结果 仅用牙刷清理或义齿清洁剂清理的患者第12周的牙周指数均较第1周高,效果不好;使用牙刷清理加义齿清理剂清理者第12周时的牙周指数与第1周类似,效果较佳。结论 采用牙刷清理加义齿清洁剂清理透明保持器,更有利于维护正畸后牙周健康。 相似文献
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