小凹蛋白1可能参与血管紧张素转化酶2介导的病毒感染

小凹是细胞信号在细胞膜区域的枢纽结构,为细胞内外信号转导发生、募集、串联、级联、交汇(cross-talk)的集散单元。其表面标志蛋白是小凹蛋白。小凹蛋白基因家族的结构与功能在进化中从蠕虫到人都是非常相似与保守的,其生物学功能研究是近年的热点研究领域之一。本文就小凹/小凹蛋白在介导血管紧张素转化酶2介导的病毒感染作用提出一些新思路。     

低氘水抗肿瘤作用的研究进展及其可能机制

饮用低氘水可以预防疾病、延缓衰老、活化机体免疫细胞,特别是对某些癌症等疾病的辅助治疗,是近年国外核医学领域和水生理学领域对低氘水研究的重大突破。目前,抗癌化疗药物仍是肿瘤的重要治疗手段,但其毒副作用强,易导致多药耐药的产生,而低氘水使用方便,无毒副作用,且可能对肿瘤的多药耐药逆转有巨大作用。其抗癌机制极其复杂,故本文对低氘水抗肿瘤作用的研究进展及其可能机制做一综述。     

低氘水抗肿瘤作用的研究进展

目的氘是致癌的重要诱发因素之一,通过采用先进的制造技术去除天然水中的氘,降低氘含量可制得贫氘水,又称低氘
水、超轻水或无氘水。有研究表明,水中氘浓度体积分数减少65%能够抑制肿瘤生长,国外临床实验证实服用低氘水（10~
20ppm）的肿瘤患者能使肿瘤停止生长,显著提高患者的生存时间和生活质量。目前,抗癌化疗药物种类繁多,但都存在一定局
限性,而低氘水使用方便,没有毒副作用。基于低氘水的显著优势,本文主要对低氘水的抗癌作用的研究进展作一综述。
     

低氘水抑制宫颈癌 Hela 细胞增殖和侵袭能力的研究

目的 探讨培养基中氘浓度的下降对宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭能力的影响.方法 用含不同氘浓度的培养基培养Hela细胞,分为150×10-6、100×10-6、75×10-6和50×10-6共4组,其中,氘浓度为150×10-6的培养基为对照组,其他为实验组;用四甲基噻唑蓝（MTT）法、划痕实验检测随着培养基中氘浓度下降,Hela细胞增殖和迁移侵袭力的变化;流式细胞术检测含不同氘浓度的培养基对Hela细胞周期的影响;蛋白免疫印迹和免疫组化实验检测含不同氘浓度的培养基对Hela细胞肿瘤相关蛋白p21、Na＋/K＋-ATPase表达的影响.结果 MTT实验结果显示,随着培养基中氘浓度的降低Hela细胞增殖得到明显的抑制,其中氘浓度为50×10-6的培养基抑制效果最明显,相同条件下与对照组相比在72 h抑制率达到39.54％（P＜ 0.01）;划痕实验可观察到Hela细胞在氘浓度为75×10-6、50×10-6的培养基中细胞迁移能力得到明显抑制（P＜ 0.05）;Hela细胞在氘浓度为75×10-6、50×10-6的培养基中培养24 h后,流式细胞术检测S期明显低于对照组（P＜0.01）;Hela细胞肿瘤相关蛋白p21在氘浓度为100×10-6、75×10-6和50×10-6的培养基中的表达与对照组比较,差异均有高度统计学意义（P＜0.01）.结论 培养基中氘浓度的下降对宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭能力有明显的抑制作用.     

表达序列标签法寻找日本血吸虫新基因

目的 运用表达序列标签(expressed sequence tag，EST)技术，从日本血吸虫成虫eDNA文库中筛选和鉴定日本血吸虫新基因，为寻找日本血吸虫新的候选疫苗奠定基础。方法 转化日本血吸虫成虫eDNA文库，随机挑取重组阳性克隆进行测序，获得Esr；用NCBI站点的GenBank对所获得的新基因序列进行同源性检索；利用BLASTP程序对同源性高的基因进行核苷酸和氨基酸水平的同源性比较。结果 发现xzw000008克隆的eDNA序列为日本血吸虫新基因并获得GenBank登录号。该eDNA序列与曼氏血吸虫polyubiquitin基因高度同源，核苷酸水平的同一性为87％；氨基酸水平的同一性为98％。结论 用EST寻找日本血吸虫新基因是一种可行的方法，所筛选到的日本血吸虫新基因长575bp，编码191个氨基酸，与曼氏血吸虫polyubiquifin基因高度同源，为进一步研究该基因的全序列及功能作准备。     

永州市孕妇弓形虫感染血清学调查

应用ＩＨＡ方法对永州市４１２名孕妇进行弓形虫抗体的检测。试验提示，永州市孕妇弓形虫感染率为１０．９２％，城区孕妇感染率６．８９％低于郊区孕妇感染率１４．８３％，有明显异产史孕妇感染率３４．５２％，明显高于无异产史孕妇４．８８％。调查显示，异产的发生与孕妇是否受弓形虫感染有十分密切的关系。     

Caveolin-1在肿瘤发生发展及耐药机制中的作用

Caveolin-1是细胞膜微囊（caveolae）的重要组成结构，在大多数正常的细胞中表达丰富。通过其脚手架区域，在多种信号分子向胞内传递信息的过程中发挥着重要作用，其功能研究是生物学研究的热点。而近来研究表明caveolin-1在大多数肿瘤细胞中表达下降甚至缺如，过表达caveolin-1能抑制其恶性生长性状。近来的癌细胞转化及基因敲除等实验结果倾向于caveolin-1就是7q31位点的肿瘤抑制基因。但在少数肿瘤如前列腺癌、乳腺癌患者的细胞中检测到caveolin-1高表达。在纤维原细胞和上皮细胞的凋亡中起促进作用。Caveolin-1与多种肿瘤细胞的增殖、分化、侵袭、转移以及凋亡关系密切，且可能是肿瘤细胞多药耐药逆转的一个新靶点，以类似于介导胆固醇流出途径的方式将药物排出细胞导致细胞耐药性增强。     

弓形虫GRA8基因真核表达重组质粒的构建、鉴定及测序

目的 构建弓形虫RH株pcDNA3，1( )-GRA8真核表达重组质粒，为进一步DNA免疫做准备。方法 用聚合酶链反应(PCR)从弓形虫RH株的基因组DNA中扩增编码致密颗粒蛋白(GRA8)的基因片段，纯化后重组入pUC-19克隆载体，再经含IPTG，XGal氨苄培养基蓝白筛选，挑选白色克隆酶切，低溶点琼脂糖纯化，回收目的基因亚克隆入pcDNA3．1( )，经氨苄培养基过夜培养挑选6个克隆提纯酶切，PCR鉴定和测序。结果 从RH株基因组DNA中扩增出特异的GRA8基因片段，克隆成功pcDNA3．1( )-GRA8重组质粒。测序表明GRA8这部分基因与GENEBANK相应基因序列完全一致。结论 本结果为研究抗弓形虫核酸疫苗打下基础。     

弓形虫微线体蛋白1部分基因原核表达重组质粒pWR450-1-MIC1的构建、鉴定及测序

目的：构建弓形虫ZS2分离株pWR450-1-MIC1原核表达重组质粒，为进一步表达及免疫做准备。方法：用PCGENE软件分析MIC1基因可能的TB抗原表位，自行设计引物，用聚合酶链反应（PCR）技术从弓形虫ZS2分离株的基因组DNA中扩增编码微线体蛋白1（MCC1）的基因片段，经酶切，连接，重组入pWR450-1原核表达载体，再经含氨苄培养基筛选，酶切，PCR鉴定和测序。结果：从ZS2分离株基因组DNA中扩增出特异的MIC1基因片段，克隆成功pWR450-1－MIC1重组质粒，测序表明MIC1这部分基因与RH株相应碱基序列完全一致。高度保守，为下一步表达及免疫奠定基础。     

永州市孕妇弓形虫感染血清学调查

应用ＩＨＡ方法对永州市４１２名孕妇进行弓形虫抗体的检测。试验提示，永州市孕妇弓形早感染率为１０．９２％，城区孕妇感染率６．８９％低于郊区孕妇感染率１４．８３％，有明显异产史孕妇感染率３４．５２％，明显高于无异产史孕妇４．８８％。调查显示，异产的发生与孕妇是否受弓形虫感染有十分密切的关系。