永州市孕妇弓形虫感染血清学调查

应用ＩＨＡ方法对永州市４１２名孕妇进行弓形虫抗体的检测。试验提示，永州市孕妇弓形早感染率为１０．９２％，城区孕妇感染率６．８９％低于郊区孕妇感染率１４．８３％，有明显异产史孕妇感染率３４．５２％，明显高于无异产史孕妇４．８８％。调查显示，异产的发生与孕妇是否受弓形虫感染有十分密切的关系。     

低氘水可选择性抑制鼻咽癌细胞增殖

目的比较不同氘体积浓度对多种鼻咽癌细胞株及正常细胞增殖的作用,初步探讨低氘水抗肿瘤的可能机制。方法MTT
法、平皿克隆实验、transwell小室检测低氘水（DDW）对鼻咽癌细胞及正常细胞的增殖、侵袭转移能力;Western blot检测PCNA
蛋白表达差异,流式细胞仪分析细胞周期。结果随着培养基中氘含量下降,多种鼻咽癌细胞增殖显著被抑制（P<0.05）,克隆生
成和游走侵袭能力显著下降（P<0.01）,Western blot检测结果显示PCNA蛋白表达水平下调,流式细胞仪检测显示,低氘水能诱
导鼻咽癌细胞生长周期阻滞：S期减少,G1期细胞显著增加（P<0.05）。但DDW对正常细胞生长有促进作用。结论DDW具有选
择性抑制鼻咽癌细胞增殖的靶向生物效应,因此其可作为新型无毒副作用抗癌辅助治疗剂,在肿瘤治疗中具有重要应用前景。
     

人脐静脉内皮细胞Caveolin-1基因沉默模型的建立

目的:利用小干扰RNA(siRNA)技术建立人脐静脉内皮细胞(ECV304)小凹蛋白(Caveolin-1)基因沉默模型,为研究Caveolin-1基因在人脐静脉内皮细胞中的作用.方法:通过Ambion专用软件对Caveolin-1基因编码区分析,设计合成短发夹RNA(shRNA)单链.通过T4连接酶将退火反应合成的shRNA双链克隆入含RNA PollII聚合酶表达元件的pENTRTM/U6入门载体,并利用Gateway技术构建相应的慢病毒RNA干扰(RNAi)表达载体.用REAL-TIME RT-PCR、蛋白印迹法分析沉默效率.结果:测序结果显示pENTRTM/U6载体插入的Cavelin-1基因shRNA序列大小及阅读框架正确.LR重组反应后成功构建了针对Caveolin-1基因的RNAi慢病毒表达系统.转染ECV-304细胞获得对Caveolin-1的沉默效率大于85%.结论:成功地构建了针对Caveolin-1基因的RNAi慢病毒表达系统,获得了长期稳定的基因剔除效应.人脐静脉内皮细胞Caveolin-1基因沉默模型能长期保种及传代,为进一步研究Cav-eolin-1基因的功能奠定了基础.     

氡暴露致肿瘤的研究进展

氡是一种分布广泛的惰性气体,在衰变过程中放出α、β、γ粒子后,衰变为氡子体,氡及氡子体对人类有明显的致癌效应,尤其氡在致肺癌和白血病方面日益受到人们的重视。对氡及其子体对人类辐射危害的研究成果进行综述。     

pcDNA3.1/NT-GFP小凹蛋白1及突变体表达载体的构建及功能分析

目的 构建pcDNA3．1/NT-GFP小凹蛋白1及对突变体表达载体及表达蛋白生物活性进行分析。方法采用硫化修饰引物与Pfu酶结合的高度保真性聚合酶链反应体系，自行设计多对引物，分别扩增带His标签的小凹蛋白1全长目的片段、小凹蛋白1（缺失81～101位氨基酸）突变体1片段及小凹蛋白1（缺失143～156位氨基酸）突变体2片段；分别亚克隆入peDNA3．1／NT-GFP-TOPO真核表达栽体，转化TOP10E．coil大肠杆菌，在含氨苄的固体LB培养基上随机挑取6个克隆，分别提取质粒后，用PCR法筛选含正确插入阅读框的阳性克隆子并测序鉴定。用脂质体介导法瞬时转染入HepG2细胞，用MTT法、Western blot法初步鉴定GFP-His小凹蛋白1及突变体重组融合蛋白的生物学活性。结果筛选得到正确peDNA3．1／NT-GFP-His小凹蛋白1及突变体表达我体，测序结果无碱基突变及阅读框移码，GFP-His小凹蛋白1及突变体重组融合蛋白具有天然表达蛋白相似的生物学活性。结论成功构建具有生物学活性的pcDNA3．1／NT-GFP小凹蛋白1及突变体表达栽体，为小凹蛋白1的功能研究奠定基础。     

恶性疟原虫HRPⅡ基因多态性分析

采用ＰＣＲ方法扩增恶性疟原虫云南株（ＰＦＤ－３／ＹＮ）与海南株（ＦＣＣ－１／ＨＮ）富含组氨酸蛋白Ⅱ部分基因序列，对扩增片段进行了限制性内切酶分析及部分基因序列测定，用ＰＣＧＥＮＥ软件对恶性疟原虫ＰＦＤ－３／ＹＮ、７Ｇ８及Ｄ１０３个虫株部分ＨＲＰⅡ基因序列进行了比较分析。结果显示ＨＲＰⅡ在３个虫株间存在不同程度的差异，我国疟原虫虫株无ＨＲＰⅡ基因缺失突变现象。     

PTEN基因与胃癌相关性研究进展

PTEN是迄今为止发现的第一个具有双重特异性磷酸酶活性的抑癌基因,与多种肿瘤发生发展密切相关,在胃癌的发生、发展、浸润、转移过程中起重要作用。对PTEN生物学功能的进一步研究有助于了解胃癌的分子机制,开发新的可能的治疗方法。     

白藜芦醇对鼻咽癌细胞ATP酶抑制作用研究

目的检测30μmol/L白藜芦醇对鼻咽癌细胞ATP酶活力及蛋白表达抑制作用。方法超微量ATP酶试剂盒检测白藜芦醇对鼻咽癌细胞膜的Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶和T-ATP酶活力的变化;Western-blot检测白藜芦醇对鼻咽癌细胞ATP酶蛋白表达差异。结果 RES能显著抑制多种鼻咽癌细胞Na+-K+-ATP酶活力(P0.01)、Ca2+-Mg2+-ATP酶活力(P0.01)和T-ATP酶活力(P0.001),Western-blot检测结果显示白藜芦醇能浓度依赖性下调ATP的表达(P0.05)。结论白藜芦醇抑制鼻咽癌细胞株ATP酶活力,显著下调ATP酶蛋白表达,可能是抑制鼻咽癌细胞株增殖的分子机制之一。     

白藜芦醇抗肿瘤作用机制的研究进展

白藜芦醇是一种天然存在的植物抗毒素, 广泛存在于多种植物中，是防治肿瘤的绿色抗癌药物。体内外实验表明，白藜芦醇对大多数肿瘤的起始、增殖、发展3个主要阶段均有抑制乃至逆转作用。其抗肿瘤机制可以通过抗氧化、阻滞细胞周期、促进肿瘤细胞凋亡、诱导肿瘤细胞分化、抑制环氧化物酶和细胞色素酶P450的活性、干扰相关信号转导通路、抑制肿瘤血管生成等发挥作用。