高效液相色谱荧光检测法测定小鼠脑组织中氨基酸类神经递质(英文)

建立并优化高效液相色谱荧光检测法,灵敏有效地检测5种氨基酸类神经递质在小鼠脑组织中的浓度。以高丝氨酸(Hse)为内标,经过邻苯二甲醛柱前衍生化后,检测天门冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、牛磺酸(Tau)和γ-氨基丁酸(GABA)。通过等度洗脱,5种氨基酸在24分钟内被精确分离。该方法在定量范围内线性良好,相关系数不低于0.9998,且检测限不超过10nmol/L。以相对标准偏差表示批内及批间重现性均小于或等于10.5%。该方法被成功应用于C57BL/6小鼠黑质和纹状体中氨基酸类神经递质浓度检测。     

急性脑梗死患者血浆纤溶酶原激活物及其抑制剂-1水平的动态变化及其与梗死面积的关系

目的 探讨急性脑梗死患者血浆组织型纤溶酶原激活物(t-PA)及其抑制剂-1(PAI-1)水平的动态变化及其与梗死面积的关系.方法 急性脑梗死患者100例,其中大面积脑梗死22例、小面积脑梗死36例、腔隙性脑梗死42例,采用发色底物显色法检测脑梗死患者病后24 h、2 d、14 d、21 d的血浆t-PA、PAI-1水平,与正常对照组比较;并比较不同面积脑梗死患者血桨t-PA、PAI-1水平.结果 与正常对照组比较,急性脑梗死患者病后24 h、2 d、14 d血浆t-PA水平显著降低,血浆PAI-1水平明显升高(均P＜0.01);病后21 d两者与正常对照组差异无统计学意义(均P＞0.05);大面积脑梗死患者t-PA水平明显低于小面积和腔隙性脑梗死患者,小面积脑梗死患者又明显低于腔隙性脑梗死患者(均P＜0.01);不同面积脑梗死组之间PAI-1水平未见明显差异(均P＞0.05).结论 脑梗死患者急性期血浆t-PA水平降低及PAI水平升高;脑梗死面积越大的患者血浆t-PA水平降低程度越明显,而血浆PAI-1水平与梗死面积无关.     

骨化三醇对MPTP诱导慢性帕金森病小鼠模型脑内神经递质的影响

目的探讨骨化三醇对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）诱导慢性帕金森病小鼠模型脑内氨基酸类和单胺类神经递质的影响。方法C57BL／6小鼠随机分为对照组、模型组、骨化三醇高剂量给药组和低剂量给药组,构建MPTP慢性模型,应用高效液相色谱法测定中脑及纹状体内氨基酸类神经递质,包括天冬氨酸（Asp）、谷氨酸（Glu）、甘氨酸（Gly）、牛磺酸（Tau）、1,-氨基丁酸（GABA）和单胺类神经递质,包括多巴胺（DA）及其代谢产物3,4-双羟苯乙酸（DOPAC）的含量。结果与对照组相比,模型组小鼠氨基酸类神经递质除中脑内GABA外含量增加,纹状体内DA和DOPAC含量降低,代谢率增加俨〈O．01或P〈0．05）。骨化三醇给药组与模型组相比,高剂量可使中脑GIu,Gly,Tau及纹状体内五种氨基酸含量降低,DA和DOPAC含量增加,代谢率降低俨〈O．01或P〈0．05）;低剂量则仅可减缓中脑Tau和纹状体除Tau以外其他4种氨基酸含量增长状况。结论骨化三醇能改善MPTP所致慢性PD小鼠模型脑内神经递质含量异常,直接或间接保护DA能神经元,对其机制的深入研究有助于新型神经保护药物的开发。     

微囊化牛视网膜色素上皮细胞体外BDNF及GDNF分泌特性的研究

目的检测体外培养的牛视网膜色素上皮细胞（retinal pigment epithelium，RPE）脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophic factor，BDNF）及胶质源性神经营养因子（glial cell line-derived neurotrophic factor，GDNF）分泌特点，并观察微囊包裹对细胞存活率及BDNF和GDNF分泌的影响。方法原代培养牛RPE，用高压静电成囊装置制备海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠微囊化细胞，台盼兰染色法检测囊内细胞活性，ELISA法检测BDNF及GDNF分泌量。结果原代及传代后RPE上清液中在基础状态下就能够检测到BDNF和GDNF，传代后两者的分泌量较原代无显著差异。微囊化细胞BDNF和GDNF分泌量在1-5 d与未微囊化细胞相比显著降低（P〈0.01），而6-8 d两组无显著差异。囊内活细胞数及BDNF和GDNF分泌量在体外培养的第14天至第21天趋于稳定。结论RPE基础状态下就能够分泌少量BDNF和GDNF，且不受传代及微囊包裹的影响。体外培养21 d后仍检测到囊内细胞的存活及BDNF和GDNF的分泌。牛RPE是一种具有一定前景的帕金森病细胞移植的供体。     

生物碱类天然产物抗乳腺肿瘤机制研究进展

乳腺肿瘤已成为发病率最高的恶性肿瘤之一,严重威胁人类尤其是女性健康。化疗是抗乳腺肿瘤的重要治疗方法,其通过单独使用或与手术、放射治疗结合使用,几乎可用于乳腺肿瘤治疗的各个阶段。生物碱类化合物是自然界普遍存在的一类天然产物,是多种药用植物的重要活性成分。大量的研究表明,生物碱类化合物可通过抑制增殖、转移和血管生成、抗有丝分裂、促进细胞凋亡和自噬、触发细胞周期阻滞等多种途径发挥抗乳腺肿瘤作用。生物碱类化合物广泛的抗乳腺肿瘤作用使其成为重要的抗乳腺肿瘤候选药物来源。该文就生物碱类天然产物抗乳腺肿瘤机制展开综述。     

人源类溶菌酶蛋白4在受精过程中的作用及酶学性质研究

目的:对人源类溶菌酶蛋白4(LYZL4)在受精过程中的作用和重组蛋白的酶学性质进行研究,从而揭示LYZL4的生理功能。方法:细胞免疫荧光法检测LYZL4在精子细胞上的亚细胞定位,RT-PCR分析精子表面LYZL4的来源,通过精子穿透试验分析LYZL4在受精过程中的作用。构建真核重组表达载体p PIC9K-LYZL4,转化毕赤酵母GS115菌株后,甲醇诱导表达;甲壳素亲和层析和凝胶过滤层析从发酵上清中纯化重组LYZL4蛋白(rLYZL4),通过Western印迹进行验证。ELISA测定rLYZL4的透明质酸结合能力,分光光度法测定rLYZL4的胞壁质酶活性、透明质酸酶活性和自由基清除能力。结果:LYZL4免疫荧光定位于成熟精子头部的顶体膜上,RTPCR检测表明精子表面的LYZL4蛋白来源于睾丸和附睾的分泌,兔抗LYZL4多克隆抗体可明显抑制精卵结合。毕赤酵母表达系统成功表达了rLYZL4,酶活性分析显示rLYZL4无胞壁质酶和透明质酸酶活性,但能够结合透明质酸,并具有较强的自由基清除能力。结论:LYZL4由睾丸和附睾分泌后定位于成熟精子头部的顶体膜上,可在精卵结合过程中发挥作用,其还能够结合透明质酸并清除自由基,提示LYZL4可能作为一种多功能分子在精子保护及精卵结合过程中发挥作用。     

帕金森病的细胞移植治疗

在众多帕金森病(PD)细胞移植的供体中,肾上腺髓质细胞由于其存活率低已被淘汰。人胚胎腹侧中脑虽然研究最深入、广泛,但严重的伦理道德问题限制了其临床的应用。视网膜色素上皮细胞和异种胚脑组织是近年来发展前景良好的新型供体。神经干细胞-基因联合治疗为干细胞移植治疗PD提供了一个新方向。本文就PD细胞移植的这些供体研究做一综述。     

脑出血患者并发医院感染的临床研究

目的探讨脑出血患者并发医院感染的发病率和危险因素,以采取有效的控制措施。方法回顾分析2002年1月-2005年12月,神经内科收治的986例脑出血患者的相关临床资料。结果脑出血患者并发医院感染316例,感染率32.05%,感染例次率44.62%;并发医院感染的脑出血患者死亡76例,死亡率24.05%;感染部位以呼吸道最常见,占66.36%,其次为泌尿系感染,占20.68%;老龄、长住院日、气管切开、呼吸机应用、留置导尿、昏迷等是医院感染的危险因素。结论脑出血医院感染发生率较高,积极治疗原发病、减少危险因素,是降低脑出血患者医院感染的有效措施。     

老年人药品不良反应的监测和预防

摘 要 老年人药品不良反应（adverse drug reactions,ADR）监测及预防是老年医学临床实践的重要内容。由于罹患多种疾病、多重用药以及药动学和药效学的改变等因素的影响,老年人更易发生ADR。老年人ADR表现的不典型性加大了其识别的难度,GerontoNet ADR风险指数是一个用于识别ADR高风险老年患者的一种实用又简便的评估方法,进而加强对ADR高风险老年患者的监护可以减少其ADR的发生。加强老年临床药理学知识的宣教可提高医生和患者对ADR的认知程度,另外,医院可采取多种措施预防ADR的发生。对于病情复杂的老年患者,通过老年综合评估进行个体化评估来简化患者用药和患者用药需求的优先度,促进患者合理用药。