油酸诱导HepG_2细胞脂肪变性模型的建立

目的:以Hep G2细胞为实验材料,用油酸诱导建立肝细胞脂肪变性模型。方法:用不同浓度的油酸培养Hep G2细胞,采用MTT法确定引起肝细胞脂肪变性的油酸的最佳浓度,用油红O染色观察细胞内脂滴形成情况,并检测细胞内TG的含量和培养液的ALT、AST的水平,实时定量PCR检测CPT-1、FAS、IL-6m RNA的表达。结果:用含0.25m M浓度的油酸的培养基培养Hep G2细胞24h,光镜下可见Hep G2细胞内有脂滴形成,模型组中细胞内TG含量及培养液中AST较对照组增高,差异有统计学意义。模型组较对照组CPT-1m RNA表达增高,FASm RNA表达降低,IL-6m RNA表达增高,差异均有统计学意义。结论:通过油酸建立的体外非酒精性脂肪肝模型,可较好地模拟人脂肪肝的主要特征,为脂肪肝的研究提供了简便的方法。     

钆塞酸二钠增强磁共振成像与超声在肝细胞癌筛查中的成本效益分析

目的比较在肝癌高危人群中采用钆塞酸二钠增强MRI(EMRI)与超声行肝癌筛查的成本效益比。方法应用Tree Age Pro 2011软件建立决策树模型,采用数学模型模拟肝硬化患者每6个月行EMRI或超声筛查的成本与收益,计算不同筛查模式下的成本效益比。结果 EMRI组和超声组平均每人每次用于肝癌筛查的成本分别为2050.2元和262.6元,获得效益分别为0.11生命年(YLG)和0.02 YLG。当肝癌发病率为17.8%时,EMRI组与超声组的成本效益比大致相同,每1个YLG的成本大致均为11445元,肝癌发病率越高,EMRI检查成本越低,筛查效果越好。EMRI价格越低,其成本效益比逐渐下降,筛查效果越明显。结论肝癌筛查的成本效益与肝癌发病率及检查价格密切相关。当肝癌风险高于17.8%时,采用EMRI筛查可获得较好的成本效益比。     

UGT1A1基因复合杂合突变致吉尔伯特综合征一例

一例吉尔伯特综合征患儿自幼反复出现巩膜黄染,无其他自觉症状;血清胆红素水平升高,以非结合胆红素为主;排除胆道梗阻、溶血等其他引起黄疸的因素;基因检测发现患儿尿苷二磷酸葡糖苷酸转移酶1A1（UGT1A1）基因存在UGT1A1*28和c.211G>A杂合突变。     

血清高病毒载量和乙型肝炎发作孕妇的抗病毒治疗

正乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染是中国重大公共卫生问题。2014年全国流行病学调查结果显示,0～4岁、4～15岁、15～29岁人群HBV感染率分别为0.32%、0.94%和4.38%,较2006年的调查结果明显下降,但育龄女性HBV感染率仍然在6%～8%~([1])。另一方面,随着国家二胎生育政策的放开,如何正确处理HBV感染的育龄女性以及如     

乙型肝炎病毒相关性肝细胞癌预测模型的优化北大核心CSCD

目的优化已建立的HBV相关性肝细胞癌（HCC）预测模型（REACH—B评分模型）。方法收集2004年10月1日至2014年5月1日于福建医科大学附属第一医院肝病中心初次入院、HBsAg阳性超过半年的患者,分为HCC组和对照组（非HCC组）,回顾性收集相关指标,进行评分评估。用受试者工作特征曲线判断各模型预测价值。结果预测3年HBV相关性HCC发生,共纳入627例患者,其中HCC组151例,对照组476例。REACHB评分模型预测3年HCC发生的曲线下面积（Auc）为0．78（95％CI：0．74～0．82）,敏感度为73．00％,特异度为78．70％。联合甲胎蛋白（AFP）建立R—AFP评分模型,对3年HCC发生的AUC升至0．80（95％CI：0．76～0．83,Z=2．50,P=0．01）,敏感度为71．03％,特异度为79．13％。联合甲胎蛋白异质体3与AFP之比（AFP—L3％）建立R—AFP—L3％评分模型,对3年HCC发生的AUC进一步升至0．83（95％CI：0．80～0．87,Z=2．45,P=0．01）,敏感度为75．01％,特异度为79．32％。预测5年HBV相关性HCC发生,共纳人159例患者,其中HCC组65例,对照组94例。REACH—B评分模型预测5年HCC发生的AUC为0．79（95％CI：0．72～0．87）,敏感度为73．60％,特异度为75．43％。R-AFP评分模型对5年HCC发生的预测价值AUC升至0．84（95％CI：0．77～0．90,Z=2．70,P=0．006）,敏感度为83．12％,特异度为77．89％。结论联合AFP及AFP—L3％能优化REACHB评分模型对3年和5年HBV相关性HCC发生的预测价值。     

血清铜蓝蛋白水平与慢性乙型肝炎患者临床病理关系的初步研究

目的 探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者血清铜蓝蛋白(CP)水平与肝脏炎症活动度分级、纤维化分期的关系,建立肝纤维化分级无创模型并分析其诊断价值.方法 2009年1月至2011年6月于福建医科大学附属第一医院肝病中心确认的CHB患者148例,同步进行肝组织病理学、血清CP及生物化学指标检查.Spearman等级相关分析法判断CP水平与肝脏病理学分级之间的相关性;Logistic回归分析法分析相关指标的诊断意义.构建肝脏纤维化诊断预测模型,受试者工作曲线(ROC)法评价模型的诊断价值.结果 148例CHB患者炎症活动度分级G1、G2、G3、G4的血清CP平均值分别为(212.5±34.9)、(205.5±32.0)、(201.4±37.7)和(172.8±20.4) mg/L,ANOVA分析提示4组炎症活动度分级间CP水平的差异有统计学意义(F=6.309,P＜0.01);纤维化分期S1、S2、S3、S4的血清CP平均水平分别为(217.4±32.3)、(206.0±37.7)、(194.2±29.8)和(179.7±30.4)mg/L,ANOVA分析提示纤维化分期间CP的差异有统计学意义(F=8.608,P＜0.01).Spearman等级相关分析法分析提示,CP与炎症活动度分级(r=-0.316,P＜0.01)以及纤维化分期(r=-0.404,P＜0.01)均呈负相关关系.应用ROC分别建立CP水平对S≥2、S≥3、S=4的诊断曲线,曲线下面积(AUC)分别为0.71、0.70和0.72.经Logistic回归分析,筛选出模型-1(S≥2)、模型-2(S≥3)、模型-3(S=4)组包括CP、甲胎蛋白、胆碱酯酶、PLT、年龄的肝纤维化独立预测因子,最终构建数学模型并计算肝纤维化评分,模型-1、模型-2、模型-3的AUC分别为0.84、0.83和0.87,准确率分别为71.8％、80.3％和79.2％.结论 CHB患者的血清CP水平与肝脏炎症活动度分级、纤维化分期呈负相关关系,随病理分级的增加而呈阶梯状降低.CP水平可作为无创性判断肝脏纤维化状态的一项重要指标,纳入CP而构建的肝纤维化预测模型对CHB肝纤维化肝硬化有较好的诊断价值.     

野生型p16和p53抑癌基因共转染对 K562细胞增殖的抑制作用

抑癌基因p16和p53在抑制肿瘤的发生中起重要作用，在髓细胞白血病细胞系K562中检测出这两种基因有纯合缺失。为探讨野生型p16和p53基因的转染与表达对K562细胞的生长影响，采用了脂质体介导外源野生型p16和p53共转染K562细胞，用免疫细胞化学染色检测p16和P53基因的表达，检测细胞生长曲线，采用流式细胞术进行细胞周期分析。结果显示，共转染后p53和p16在K562细胞中表达阳性率分别为23％和28％；细胞生长受到一定程度的抑制，G1期细胞的比例增加，S期细胞减少，与单独转染p53或p16基因的抑制作用有明显差别(P＜0.05)。结论：外源野生型p16和p53基因的共转染比转染单基因对K562细胞生长有更明显的抑制作用，有可能成为白血病基因治疗的一种方法。     

恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎合并非酒精性脂肪性肝病患者疗效及其对肝组织脂肪变的影响*

目的 探讨恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎（CHB）合并非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）患者疗效及其对脂肪肝的影响。方法 25例CHB患者接受恩替卡韦治疗96 w。经肝穿组织学检查行脂肪变分级,使用磁共振氢质子波谱成像（¹H -MRS）检测脂水比（LWR）以判断肝脂肪变变化。采用自行设计的健康问卷调查表调查生活习惯并予以量化。结果 25例CHB患者经组织病理学检查,发现脂肪变≥F1者16例（64.0%）,被认为合并脂肪肝;治疗96 w末,21例（84.0%）患者达到完全病毒学应答;治疗前后血清HBsAg和HBV DNA水平差异有统计学意义（P<0.05）,而血清TBIL、ALT、体质指数、腰臀比、低密度脂蛋白胆固醇等无统计学意义的变化（P>0.05）;根据治疗前后LWR变化,发现治疗后脂肪变变重者8例,未变者13例,改善者4例,而脂肪肝改善患者治疗后腰臀比显著下降（P<0.05）;对生活习惯得分分析发现,每日主食量对脂肪肝的影响比较大（P<0.05）,即每日主食量大者会加重脂肪肝。结论 恩替卡韦治疗未能改善CHB合并NAFLD患者肝脏脂肪变程度,而这些患者在抗病毒的同时控制主食,降低腰臀比或许能减轻肝脂肪变程度。     

强直性脊柱炎患者血清IFN一百的变化

为探讨免疫调节异常在强直性脊柱炎(AS)发病机制中所起的作用,采用酶联免疫法(ELISA)检测35例AS患者的血清IFN—γ百含量,并以30例健康体检者为正常对照。结果显示AS患者血清IFN—γ(33.16±12.23pg/mL)明显低于正常对照组(55.16±30.75pg/mL),差异有显著性意义(P<0.01)。提示T淋巴细胞功能异常可能参与AS的发病过程。     

RNA干扰SIRT1基因表达对HepG2细胞部分能量代谢信号及炎症因子影响

目的 研究RNA干扰抑制SIRT1基因表达对HepG2部分能量代谢信号及炎症因子影响.方法 将SIRT1-siRNA在脂质体介导下瞬时转入人肝癌HepG2细胞,用实时荧光定量PCR方法检测转染效率及转染后CPT-1mRNA、ECHS-1 mRNA、UCP-2 mRNA、FAS mRNA、ACC mRNA、IL-6 mRNA的表达变化.结果 HepG2细胞成功转染SIRT1-siRNA后,UCP-2 mRNA表达降低（P＜0.01）、FASmRNA表达增高（P＜0.01）、ACC mRNA表达增高（P＜0.05）、IL-6 mRNA表达增高（P＜0.001）,而CPT-1mRNA、ECHS-1 mRNA表达无明显差异.结论 肝癌HepG2细胞中抑制SIRT1基因表达可抑制对UCP-2mRNA表达,促进脂肪酸合成及诱发炎症反应,而对线粒体氧化途径CPT-1、ECHS1表达无明显影响.