大鼠神经系统内蛋白激酶Cγ亚单位的定位

目的　观察蛋白激酶Cγ亚单位 (PKCγ)在大鼠神经系统内的定位分布。　方法　PKCγ特异性抗体的免疫细胞化学染色技术。　结果　密集、浓染的PKCγ阳性神经元主要见于大脑皮质、海马、杏仁复合体、小脑皮质、耳蜗腹侧核和耳蜗背侧核、三叉神经脊束核尾侧亚核和脊髓背角浅层。　结论　PKCγ阳性神经元广泛分布于大鼠神经系统。本研究的结果为探讨PKCγ在神经系统信号转导过程中的作用提供了形态学证据     

大鼠延髓和脊髓背角内PKCγ阳性神经元向中缝大核的投射

目的 研究大鼠延髓背角和脊髓背角浅层内蛋白激酶Cγ亚单位（PKCγ）阳性神经元向中缝大核（NRM）的投射。方法 荧光金（FG）逆行追踪和PKCγ免疫荧光组织化学染色相结合的双标记方法。结果 将FG注入NRM，在延髓和脊髓背角的Ⅰ-Ⅲ层内可见FG逆标神经元；PKCγ阳性神经元主要分布于延髓和脊髓背角的Ⅱ层内侧部及Ⅱ、Ⅲ层交界处，Ⅰ、Ⅲ层内较少；延髓背角Ⅰ层和脊髓背角Ⅰ－Ⅲ层可观察到FG逆标并呈PKCγ阳性的双标神经元。结论 延髓和脊髓背角浅层向NRM投射的神经元含PKCγ，提示PKCγ在向NRM传递痛信息的通路中可能发挥重要作用。     

Ⅰ.Nogo在神经再生中的作用

体内大部分组织如肌肉、皮肤、肝脏和外周神经,损伤后均有很强的再生能力.然而,中枢神经系统(CNS)几乎没有这种能力,损伤后的轴突及神经元不能再生.导致损伤后功能迟迟得不到恢复,如脊髓损伤导致的瘫痪.     

脑的不对称性影响大鼠局灶性脑缺血的结局

为评价左右侧大脑中动脉闭塞(MCAO)对右利大鼠神经行为功能和脑梗死体积的影响,本研究应用四足动物觅食实验筛选右利爪雄性SD大鼠24只,随机分为经左、右侧插线组各12只,8%水合氯醛腹腔注射(300mg/kg)麻醉,线栓法经左、右侧颈外-内动脉插入头端涂有多聚赖氨酸的4-0尼龙线,建立大鼠MCAO缺血2h模型,再灌注72h后评价动物的神经行为功能,测量脑梗死体积。结果表明,所有动物在脑缺血2h神经功能缺损评分最高,再灌注1、24、48和72h经左侧MCAO大鼠显著高于经右侧MCAO大鼠(P<0.05),后者功能明显优于前者,脑梗死体积经左侧插线的大鼠显著大于经右侧插线的大鼠(P<0.05)。研究结果提示,大鼠主侧半球大脑中动脉缺血后,神经功能缺损和脑梗死体积较对侧严重,脑的不对称性影响大鼠局灶性脑缺血的最终结局。     

白花蛇舌草总黄酮抑制人肝癌细胞的靶基因调控

目的:研究白花蛇舌草总黄酮(flavonoids fromHedyotis diffusa willd.,FHD)中制人肝癌细胞SMMC-7721的靶基因调控.方法:分别提取人正常肝细胞、人肝癌SMMC-7721细胞和FHD作用后的SMMC-7721细胞的总RNA,逆转录合成单链、双链cDNA后,体外转录合成生物素标记的cRNA与人HO4基因表达谱芯片杂交,扫描杂交芯片图像,利用软件获得FHD抗肝癌的靶基因,对靶基因进行生物信息学分析.结果:共找到20条FHD抑制肝癌细胞的有效靶基因,即给予FHD后,通过上调或下调,这些显著异常表达的基因被恢复至正常水平.其中,癌基因pim-1(Hs.81170)、rel(Hs.858)、ras(Hs.204354)、fos(Hs.25647)、myc(Hs.79070)、met(Hs.285754)以及编码Bcl-2相关蛋白的基因(Hs.227817)被显著下调;成纤维细胞生长因子(Hs.284244)、胰岛素样生长因子1受体(Hs.239176)、胰岛素样生长因子结合蛋白(Hs.1516)、G蛋白偶联受体(Hs.23016)、酪氨酸蛋白磷酸化酶(Hs.227777)、转录因子12(Hs.21704)、转录因子CP2(Hs.54970)等与细胞生长相关的信号转导分子被显著下调;细胞因子IL-1(Hs.1722)被显著下调;丝裂原活化的蛋白激酶(MAPK)信号传导通路成员MAP2K6(Hs.118825)和MAP3K12(Hs.21601)被显著上调;抑癌基因NF-2(Hs.902)被显著上调;编码T细胞活化共刺激信号分子的TNFSF9(Hs.1524)、TNFSF7(Hs.99899)基因被显著上调.这些基因均与肝癌的发生、发展密切相关.结论:FHD抑制SMMC-7721细胞的作用由多条靶基因协同,并通过胞内、胞外信号转导途径协调完成.     

Ⅱ.人类神经突生长的一种抑制蛋白

人们普遍认为成年的中枢神经不能再生[1,2]的原因,和胶质疤痕的空间阻碍作用、促神经生长因子的缺乏及髓鞘抑制因子的存在有关[3-5].这些抑制因子包括:蛋白多糖[6],髓鞘相关的糖蛋白[3,5]以及牛脑中被称为Nogo的两种蛋白[7-9].我们用牛的相关序列获得了人Nogo基因,并分离了其cDNA克隆.蛋白包含三个异构体,对神经突的生长有抑制作用,可能阻碍中枢神经的再生.     

Ⅲ.Nogo-A:一种髓鞘源性神经突生长抑制因子和单克隆抗体IN-1的抗原

成人脑和脊髓轴突损伤后的再生能力是非常有限的.在大鼠中枢神经系统,NI220/250是一种抑制神经突生长的髓鞘蛋白,针对NI220/250的一种单克隆抗体IN-1,可以使中枢神经损伤代偿性再生[1-4].我们克隆了nogo A基因,编码NI-220/250的cDNA,nogo基因编码至少三种蛋白(Nogo-A,-B和-C),重组Nogo-A可以被单克隆抗体IN-1识别,可以很敏感地抑制背根神经节(DRG)和3T3成纤维细胞的生长.针对Nogo-A的抗体可以使中枢神经髓鞘和少突胶质细胞着色,并能使DRG神经突长入中枢神经髓鞘和视神经移植物.这表明Nogo-A是一种神经突生长抑制因子及一种由少突胶质细胞产生的IN-1的抗原,由此可以引出一些新的物质,导致中枢神经再生或可塑性成为可能.     

蛋白激酶C的分子生物学特征及研究进展

本文对蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）的分子生物学特征,特别是其结构与功能的关系进行了简要综述。鉴于ＰＫＣ的γ亚单位在脊髓背角浅层痛信号传递和调控过程中的作用愈来愈受到关注,故本文还对ＰＫＣγ亚单位在痛模型中的作用及其它递质共存等方面进行了简要回顾。     

Ⅳ.Nogo作为一种浆膜蛋白发挥其轴突再生抑制作用

哺乳动物的外周神经系统轴突损伤后可以再生,但在中枢神经系统却不同.中枢一些种类的神经突可以在外周神经移植物中延伸相当长的距离[1].通过对中枢和外周的髓鞘对比可以发现中枢神经白质蛋白选择性地抑制轴突的生长[2].