干细胞研究近况

干细胞技术和基因工程技术、组织工程技术一样是二十世纪末产生的生物高技术，引起世界的密切关注。最近第一个人类多能干细胞系的分离和培养成功在学术界引起了极大的振奋犤１，２犦，并将生物医学研究推向了一个新的前沿。本文就干细胞的概念、多能干细胞在医疗保健中的巨大作用作初步介绍。１干细胞的概念干细胞具有分化产生特定细胞的能力。以人类发育的过程为例，卵子受精后产生了一个细胞－受精卵，它具有形成完整个体的潜能。受精卵称为totipotent，意为拥有全部的能力，我们称其为全能细细胞，但由于它们不能产生个体发育所需的胎盘…     

稳定型总蛋白（TP）试剂的研制

目的改良测定总蛋白（TP）的双缩脲试剂，提高试剂开瓶放置的稳定性和检测结果的准确性。方法在双缩脲基础试剂（山氖氧化钠、酒石酸钾钠、碘化钾和硫酸铜组成）中分别加入EDTA—Na2、非离子表面活性剂Triton X-100、碳酸钠等成份，通过测定50份无黄疽、甘油三酯（TG）〈2．5mmol／L血清标本和27份单纯TG〉3．0mmol/L血清标本32份总胆红素浓度在37．4—649．3μmol／L范围内的血清标本的TP值，以观察这些成份对总蛋白测定的影响：同时对自配稳定型双缩脲试剂的性能指标如线性范围、回收试验、不精密度、方法对比实验、干扰试验、试剂开瓶稳定性、试剂盒有效期进行了监测和评估。结果基础试剂在分别加入EDTA—Na2和Triton X-100后，测得血清TP值均较加入前明显下降（P〈0．05或P〈0．01）。而临床对比检测试验则显示在日立7600生化仪上自配试剂与参照试剂的检测结果非常一致．且与杜邦RXL生化仪及配套进口试剂的检测结果也非常一致，均无显著差异（P〉0．05）。自配试剂的线性范围、回收试验，不精密度，抗干扰能力．试剂开瓶放置的稳定性等性能指标均符合实验要求。结论自配稳定型试剂重复性好，性能稳定．抗干扰能力强，开瓶放置时质量稳定，线性范围宽．检测结果准确，完全可以应用于临床生化检验。     

506例胸腔积液临床分析

目的：探讨恶性胸腔积液细胞学结果与临床的联系及CEA对恶性胸腔积液的诊断价值。方法对506例胸腔积液涂片细胞学、部分恶性胸腔积液CEA检测结果进行回顾性分析。结果本组506例胸腔积液中,可见癌细胞42例,腺癌细胞41例,鳞癌1例;其中肺癌29例,胃癌4例,卵巢癌3例,结肠癌2例,乳腺癌2例,食道癌1例,肝癌1例。15例恶性胸腔积液CEA检测结果13例异常升高。结论恶性胸腔积液多是肺癌所致,且多为肺腺癌;胸腔积液CEA检测有助于恶性胸腔积液诊断。     

血浆EBV DNA水平测定在监测鼻咽癌放疗后复发、转移中的临床意义

目的 探讨定量分析血浆EBV DNA水平在监测鼻咽癌复发、转移中的临床意义。方法 应用荧光定量PCR技术（real-time PCR）,检测360例根治放疗后鼻咽癌患者血浆EBV DNA水平,并与临床及影像学检查结果 比较。结果 360例患者中87例血浆EBV DNA检测阳性,273例阴性。在87例检出阳性者中,25例证实为临床复发,45例证实为远处转移,故其预测肿瘤进展阳性预测值为80%（70/87）。在273例血浆EBV DNA检测阴性患者中,共有17例复发和4例转移,故其阴性预测值为92%（252/273）。总计91例肿瘤进展患者中70例血浆EBV DNA阳性,其中复发42例,25例血浆EBV DNA阳性;转移49例,45例血浆EBVDNA阳性。269例临床缓解患者中17例血浆EBV DNA阳性,故其敏感性、特异性、假阳性率和假阴性率分别为77%（70/91）、94%（252/269）、6%（17/269）、23%（21/91）、90%（322/360）。复发患者、转移患者、肿瘤进展患者和临床缓解患者EBVDNA阳性率和中位拷贝数分别为：60%,4700 copies/ml;92%,425000 copies/ml;77%,38000 copies/ml;6%,〈500copies/ml。复发患者与转移患者比较、肿瘤进展患者与临床进展患者比较,血浆EBV DNA阳性率和中位拷贝数均有显著性差异。结论 血浆EBV DNA水平的检测是监测放疗后鼻咽癌患者转移、复发的有效指标。     

P-gp、GST-π、TS蛋白在宫颈癌中的表达及临床意义

目的探讨宫颈癌组织中P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽S-转移酶-π(GST-π)和胸苷酸合成酶(TS)的表达及临床意义。方法采用免疫组化方法检测51例宫颈癌组织及9例正常宫颈组织中P-gp、GST-π和TS蛋白的表达情况。结果9例正常宫颈组织中,P-gp、TS蛋白均不表达,GST-π蛋白高表达4例(44.44%)。51例宫颈癌组织中,P-gp、GST-π和TS蛋白表达率分别为45.10%、62.75%和43.14%。宫颈癌组织中P-gp、TS蛋白的表达率高于正常组织(P<0.05)。宫颈癌中P-gp和GST-π蛋白共表达率为29.41%,GST-π和TS蛋白共表达率为29.41%,P-gp和TS蛋白共表达率为19.61%,3种耐药蛋白共表达率为13.73%。P-gp、GST-π和TS蛋白表达与宫颈癌组织分化和临床分期均不相关(P>0.05)。结论P-gp、GST-π和TS蛋白表达可能在宫颈癌的原发性多药耐药起重要作用。     

三氧化二砷对不同宫颈癌细胞株作用的实验研究

目的 研究不同浓度三氧化二砷(Arsenic trioxide,As2O3)在体外对宫颈鳞癌SiHa和宫颈腺癌Hela细胞株的生物学效应,初步探讨As2O3对宫颈癌细胞株增殖、凋亡的作用及其机制.方法 将不同浓度As2O3与宫颈癌Hela和SiHa细胞株共同培养,通过ATP生物发光法检测体外肿瘤细胞增值情况.采用 HE染色、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪等方法进行凋亡检测,并用细胞免疫组织化学方法检测凋亡中相关基因Fas/FasL表达的变化.结果 ① As2O3能够有效抑制SiHa和Hela细胞株增殖(P＜0.05);②2.500 0 μmol/L和5.000 0 μmol/L浓度As2O3作用SiHa和Hela细胞株48 h可以观察到细胞出现典型的凋亡变化;③与对照组相比,2.500 0 μmol/L和5.000 0 μmol/L浓度的As2O3作用SiHa和Hela细胞株48 h后,细胞免疫组化显示Fas蛋白表达均明显上调(P<0.05),5.000 0 μmol/L浓度的As2O3诱导Hela细胞株凋亡过程同时伴FasL蛋白表达明显上调(P<0.05).结论 As2O3一定浓度范围内能够有效抑制两种宫颈癌细胞株增殖和诱导宫颈癌细胞凋亡;As2O3能诱导宫颈癌细胞发生凋亡,其机制与Fas基因的表达上调有关.     

用活化B细胞,CD3mAb,IL—2共刺激诱导膀胱TIL特异性抗瘤 …

基于Ｔ细胞完全激活依赖ＴＣＲ产生的第一信号和ＣＤ２８与Ｂ７分子作用产生的第二信号，我们用活化Ｂ细胞提供共刺激信号，联合ＣＤ３ｍＡｂ，ＩＬ－２诱导扩增了人膀胱ＴＩＬ。结果显示，在该培养体系中ＴＩＬ快速扩增，培养第１０天扩增了１１４倍，显著高于ＣＤ３ｍＡｂ／ＩＬ－２组（Ｐ〈０．０１）。ＣＤ８＾＋细胞的扩增大大快于ＣＤ４＾＋细胞，第１０天时阳性率达９２％，扩增１２５倍。ＣＤ４＾＋细胞仅扩增２１倍，膜ＩＬ     

血清LTA和CEA检测对非小细胞肺癌的诊断价值

目的探索肺癌相关抗原(LTA)与癌胚抗原(CEA)在非小细胞肺癌(NSCLC)辅助诊断中的价值。方法采用乳胶凝集试验和电化学发光分别检测87例NSCLC和46例小细胞肺癌(SCLC)病人血清的LTA与CEA。结果所有正常对照者血清的LTA与CEA均阴性;NSCLC血清的LTA阳性检出率明显高于SCLC与肺良性疾病(BLD)血清中的检出率(P均<0.005);NSCLC血清的CEA阳性检出率明显高于BLD血清中的检出率(P<0.005),但与SCLC血清中的阳性检出率无差别(P>0.005);NSCLC血清LTA结合CEA的阳性检出率明显高于SCLC及BLD血清中的检出率(P<0.005)。结论LTA结合CEA检测在NSCLC的辅助诊断中具有较高的灵敏度和特异性。     

ATP-生物荧光肿瘤药敏试验在筛选肺癌化疗药物中的应用

目的 探讨肿瘤体外药敏实验ATP生物荧光法(ATP-TCA)在肺癌化疗中的应用.方法 应用ATP-TCA对48例肺癌根治术标本、6例淋巴结活检标本、4例胸腔积液标本进行药敏检测.结果 ATP-TCA方法的可评估率为95%.健择(GEM)、诺维本(NVB)、阿霉素(ADM)分别与顺铂(DDP)组成两药联合方案(GP、NP、AP),它们的敏感率分别为78%、64%、27%.化疗药物对肺癌的杀伤作用具有较强的个体差异性.结论 ATP-TCA是一种灵敏、可靠的肿瘤药敏感检测技术,可用于肺癌化疗中化疗药物的筛选.     

稳定型总蛋白(TP)试剂的研制

目的改良测定总蛋白(TP)的双缩脲试剂,提高试剂开瓶放置的稳定性和检测结果的准确性.方法在双缩脲基础试剂(由氢氧化钠、酒石酸钾钠、碘化钾和硫酸铜组成)中分别加入EDTA-Na2、非离子表面活性剂Triton X-100、碳酸钠等成份,通过测定50份无黄疸、甘油三酯(TG)＜2.5mmol/L血清标本和27份单纯TG＞3.0mmol/L血清标本32份总胆红素浓度在37.4～649.3μmol/L范围内的血清标本的TP值,以观察这些成份对总蛋白测定的影响;同时对自配稳定型双缩脲试剂的性能指标如线性范围、回收试验、不精密度、方法对比实验、干扰试验、试剂开瓶稳定性、试剂盒有效期进行了监测和评估.结果基础试剂在分别加入EDTA-Na2和Triton X-100后,测得血清TP值均较加入前明显下降(P＜0.05或P＜0.01),而临床对比检测试验则显示在日立7600生化仪上自配试剂与参照试剂的检测结果非常一致,且与杜邦RXL生化仪及配套进口试剂的检测结果也非常一致,均无显著差异(P＞0.05).自配试剂的线性范围、回收试验,不精密度,抗干扰能力,试剂开瓶放置的稳定性等性能指标均符合实验要求.结论自配稳定型试剂重复性好,性能稳定,抗干扰能力强,开瓶放置时质量稳定,线性范围宽,检测结果准确,完全可以应用于临床生化检验.