江苏省常熟市一起聚集性儿童上呼吸道感染疫情的病原学调查

目的 分析2021年9月江苏省常熟市某幼儿园一起急性上呼吸道感染聚集性疫情发生的原因。方法 收集2021年9月江苏省常熟市某幼儿园急性上呼吸道感染患儿的临床信息,采集患儿咽拭子样本。采用实时荧光定量PCR对样本进行18种呼吸道病原体筛查。利用巢式PCR法对高检出率的鼻病毒进行分型片段扩增及测序。使用MEGA 7.0软件对测序结果进行序列比对,并构建系统进化树。结果 此次聚集性急性上呼吸道感染疫情主要临床症状为流涕、咽痛。共采集患儿咽拭子样本51份,其中男童24份、女童27份。18种呼吸道病原体筛查结果显示,检出率为80.39%(41/51),其中单一病毒检出率为64.71%(33/51),混合病毒检出率为15.69%(8/51)。检出的单一病毒中鼻病毒占比最高,为42.43%(14/33)。其他病毒占比依次为细小病毒B19占18.18%(6/33),博卡病毒为15.15%(5/33),冠状病毒229E为6.06%(2/33),人偏肺病毒、乙型流感病毒、腺病毒、呼吸道合胞病毒、冠状病毒OC43和NL63均为3.03%(1/33)。7例鼻病毒与其他病毒混合感染。对21份鼻病毒阳性样本进行V...     

BSL-2实验室开展SARS-CoV-2核酸检测过程中的生物安全管理

目的:总结生物安全二级(bio-safety level 2,BSL-2)实验室开展新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)核酸检测过程中的生物安全管理经验与效果。方法:检测样本来源于2020年2月21日到2020年11月5日送达中国疾控中心病毒病预防控制所病毒资源中心科室的人体咽拭子、鼻拭子、痰液、尿液、便液等。在遵循常规生物安全管理要求的基础上,在检测过程中积极进行人员、岗位、标本、过程、安全巡视等生物安全管理。结果:共开展了27692人次样本的SARS-CoV-2核酸检测,平均每天检测(2.32±0.11)批样本,每批平均检测(87.22±6.83)件样本,BSL-2实验室平均每天工作时间(3.43±0.23)h。在检测过程中未出现任何生物安全问题。结论:BSL-2实验室在长时间的SARS-CoV-2核酸检测过程中,要积极从多方面加强生物安全管理,从而保障检测工作安全有序进行。     

人tau蛋白外显子2和外显子3特异性抗体的制备

目的 制备人微管相关蛋白tau N端的外显子2和外显子3特异性多克隆抗体.方法 从人外周血DNA中获得tau蛋白外显子2及外显子3序列并连接至原核表达载体pGEX-2T,表达纯化重组融合蛋白GST-E2、GST-E3;以此融合蛋白免疫家兔及小鼠制备抗血清,通过ProteinG/A、偶联GST蛋白的溴化氰(CNBr)活化柱对抗血清进行亲和纯化;用Western Blot及ELISA方法确定所制备抗体的特异性和敏感性.结果 在大肠埃希菌中表达纯化出人tau外显子2和外显子3重组融合蛋白GST-E2和GST-E3,相对分子质量为29×103.免疫实验动物后获得抗血清,经系列纯化后Western Blot和ELISA检测显示,制备的抗人tau蛋白外显子2和外显子3抗体具有良好的特异性和免疫反应效价.结论 成功制备了4种人tau外显子2和外显子3特异性抗体,为进行tau蛋白在神经退行性疾病中的作用研究提供了基础.     

伪狂犬病毒变异和流行特征的研究进展

伪狂犬病毒(PRV)是一种猪疱疹病毒, 可感染多种动物, 其中猪是PRV的天然宿主。PRV自发现以来已在全球范围内传播, 对养猪业造成重大经济损失。近年来, 人感染PRV的病例屡有报道, 提示PRV存在跨种属感染人的风险。随着对PRV病原特征的进一步分析和对PRV致病机制的深入了解, 避免PRV变成人类传染病成为当前研究和防控工作重点。为了解PRV变异特征, 本研究从PRV变异特征、流行特征方面综述了最新研究进展, 以期为更好地开展相关防控工作提供依据。     

2020年冬季青岛肺炎患儿人鼻病毒毒株的分离与鉴定

目的:青岛地区2020年儿童肺炎住院患者人鼻病毒(human rhinovims,HRV)的分离与鉴定,为儿童肺炎的预防提供科学数据。方法:收集2020年儿童肺炎住院患者的咽拭子样本,共计98份。应用荧光定量RT-PCR方法进行常见呼吸道病毒筛查,鉴定出HRV阳性的样本接种于H1-HeLa细胞,观察细胞病变。荧光定量R...     

2021年冬季江苏省常熟市成年人患者呼吸道鼻病毒感染分析

目的 了解2021年冬季江苏省常熟市成年人呼吸道感染者的病毒流行情况和鼻病毒的感染种类及型别。方法 采集江苏省常熟市门诊与呼吸道感染住院成年人患者的咽拭子样本,采用实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）方法开展15种常见呼吸道病毒检测;扩增鼻病毒VP4-VP2基因测序,以MEGA 7.0软件对获取序列进行系统发育分析与同源性分析。结果 共收集咽拭子样本333份,检出病毒阳性样本120份,阳性检出率为36.04%,其中人鼻病毒（human rhinovirus, HRV）检出样本数占阳性样本的28.33%(34/120),检出率最高,其次是腺病毒22.50%(27/120)和乙型流感病毒15.83%(19/120)。以单一病毒感染为主,占83.33%(100/120);混合感染以2种病毒为主80%(16/20),3种病毒共感染仅有4份。34份鼻病毒感染样本中成功扩增出32条条带,比对分析发现涉及20种血清型,分属于HRV-A(19株)、HRV-B(9株)和HRV-C(4株)3种。结论 HRV是2021年冬季江苏省常熟市成年人呼吸道感染的主要病原体之一,存在HRV-A、HRV-B、HRV-C...     

血流感染的病原菌分布及耐药性分析

目的：了解医院血培养病原菌分布及其耐药性,指导临床合理使用抗菌药物。方法血培养采用法国生物梅里埃公司BACT/ALERT3D全自动血培养仪进行培养,阳性标本用西门子MicroScan Walk-Away 40全自动微生物鉴定仪进行鉴定和药敏试验。结果2898份血培养标本中分离出病原菌341株,阳性率为11．77％,其中革兰阳性球菌182株,以金黄色葡萄球菌为主;革兰阴性杆菌140株,以大肠埃希菌为主;真菌19株,以白色念珠菌为主。病原菌主要分布于急诊病区、肿瘤内科和重症监护病房。革兰阳性球菌对万古霉素、利奈唑烷和奎奴普丁/达福普丁较敏感;革兰阴性杆菌对亚胺培南、阿米卡星和哌拉西林/三唑巴坦较敏感。结论临床应多做血培养,根据药敏试验结果选用最佳抗菌药物,延缓耐药菌株的产生。     

复方白玉散对金黄色葡萄球菌生物被膜的体外抑制作用研究

目的:研究复方白玉散对金黄色葡萄球菌生物膜形成的体外抑制作用。方法:采用微量肉汤二倍稀释法测定复方白玉散作用于标准菌株ATCC29213和临床分离33株金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC),用结晶紫染色法检测复方白玉散对生物膜最小抑膜浓度(s MIC)。结果:复方白玉散对标准菌株ATCC29213和强成膜株SA17的MIC分别为25mg/m L和50mg/m L,MBC分别为50mg/m L和100mg/m L。标准菌株ATCC29213为生物膜阳性菌株,并且33株临床分离S.aureus中,有25株为生物膜阳性菌株,生物膜的形成率为75.6%。复方白玉散对标准菌株ATCC29213的s MIC50为1.6mg/m L,s MIC80为6.3mg/m L,对强成膜株SA17的s MIC50为3.2mg/m L,s MIC80为6.3mg/m L。结论:复方白玉散能抑制金黄色葡萄球菌生物膜的生成,并且具有一定的抑菌和杀菌作用。     

两种模式病毒灭活风险实验研究

目的 研究模式病毒在环境中的存活能力,以及常用消毒液和紫外线对病毒的灭活能力.方法 利用表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒rADV和重组单纯疱疹病毒rHSV作为模式病毒,将滴有病毒的NC膜于室温下、浸于不同稀释度的各消毒液(乙醇、次氯酸钠、来苏尔、新洁尔灭)中,分别于15、30、45、60、75、90、105 min,或紫外线连续照射20、40、60、80、100 min后,放入细胞表面培养48 h,于荧光显微镜下观察.结果 (1)rHSV在环境中的平均存活时间不足60 min,rAd病毒均高于105 min;(2)100%、70%、50%的乙醇,以及5%、2.5%和1.25%次氯酸钠均可灭活两种病毒;(3)0.1%的新洁尔灭15 min可灭活rHSV和rADV;0.01%新洁尔灭作用45 min可灭活rHSV病毒;0.05%新洁尔灭中作用75 min可灭活rADV病毒;而0.01%新洁尔灭则无灭活作用;(4)5%和2.5%的来苏尔可灭活两种病毒;但1.25%来苏尔灭活rADV病毒需75 min;(5)紫外线照射大于20 min可有效灭活rHSV,但对rADV无灭活作用.结论 无包膜病毒与有包膜病毒在环境中的生存能力是不同的;两种模式病毒对各消毒液的抵抗能力也不尽相同,应根据病毒的特点选择不同的灭活方式.